基于芝麻油的注射配制品的制作方法
【專利摘要】披露了包含乙醇、芝麻油、以及免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑化合物的可注射配制品。還提供了制備這些配制品的方法以及使用這些配制品在受試者中治療疾病例如腫瘤性疾病的方法，這些方法包括將這些配制品注射進(jìn)入需要治療的受試者。
【專利說(shuō)明】基于芝麻油的注射配制品
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002] 本申請(qǐng)要求于2013年11月5日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)序列號(hào)61/900,255的優(yōu)先 權(quán)，將其披露通過(guò)引用以其全文結(jié)合在此。
[0003] 背景
[0004] 近年來(lái)，在對(duì)于免疫系統(tǒng)的了解以及用于修飾免疫應(yīng)答以治療或預(yù)防疾病的藥物 化合物的探索方面已經(jīng)取得了重要的進(jìn)展。已經(jīng)在多類(lèi)化合物中發(fā)現(xiàn)了這類(lèi)免疫應(yīng)答調(diào)節(jié) 劑（"IRM"）化合物，這些化合物種類(lèi)包括咪唑并喹啉胺、咪唑并吡啶胺、6，7-稠合環(huán)烷基咪 唑并吡啶胺、1，2-橋接咪唑并喹啉胺、噻唑并喹啉胺、噁唑并喹啉胺、噻唑并吡啶胺、噁唑并 吡啶胺、咪唑并萘啶胺、咪唑并四氫萘啶胺、以及噻唑并萘啶胺。參見(jiàn)，例如美國(guó)專利號(hào)4， 689,338；4,929,624；5,266,575；5,268,376；5,346,905；5,352,784；5,389,640；5,446, 153；5,482,936；5,756,747；6,110,929；6,194,425；6,331,539；6,376,669；6,451,810；6, 525,064；6,541,485；6,545,016；6,545,017；6,573,273；6,656,938；6,660,735；6,660, 747；6,664,260；6,664,264；6,664,265；6,667,312；6,670,372；6,677,347；6,677,348；6, 677，349;6,683,088;6,756,382 ;7,799,800;美國(guó)專利公開(kāi)號(hào)2012/040461以及2013/ 0230578。這些化合物中很多已證實(shí)具有強(qiáng)有力的免疫刺激、抗病毒與抗腫瘤(包括抗癌)活 性，并且還顯示可用作疫苗佐劑以及用于治療TH2介導(dǎo)的疾病。
[0005] 然而，此類(lèi)化合物提供所希望的治療益處的能力取決于多種因素，這些因素包括 以適合于具體療法的方式，可對(duì)此類(lèi)化合物進(jìn)行配制和遞送的程度。因此，需要從這些重要 的免疫改善藥物化合物中提供潛在治療益處的新方法和配制品。
[0006] 概述
[0007] 盡管很多疾病可以通過(guò)免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)化合物的全身遞送進(jìn)行治療，與局部遞送相 比，全身遞送可具有加劇的負(fù)面副作用，如全身性TNF誘導(dǎo)，并且還可通過(guò)使其擴(kuò)散到整個(gè) 身體來(lái)限制可供用于有效治療疾病的IRM化合物的量。盡管在IRM的局部遞送方面已取得了 一些進(jìn)步（參見(jiàn)例如美國(guó)專利號(hào)7,799,800;以及美國(guó)專利公開(kāi)號(hào)2004/0265351; 2009/ 0035323;以及2013/0230578)，仍需要提供增加IRM遞送局部化的穩(wěn)定配制品。
[0008] 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，含有IRM化合物、乙醇以及芝麻油的配制品在較長(zhǎng)的時(shí)間段里提供局部 活性IRM化合物。
[0009] 本發(fā)明提供了包含乙醇、芝麻油、以及免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑（IRM)化合物的可注射配制 品。該IRM化合物通常具有化學(xué)式(I):
[0011] 其中1?、1?2、乂、￥以及1?1是如下文定義的。
[0012] 在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供了一種遞送在此所描述的藥物配制品的方法，該方 法包括將該配制品注射進(jìn)入受試者。
[0013] 在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供了一種治療疾病的方法，該方法包括將在此所描述 的任一種配制品注射進(jìn)入需要治療該疾病的受試者。
[0014] 在另一個(gè)方面中，本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種制備藥物配制品的方法，該藥物配制 品包括乙醇、芝麻油、以及具有化學(xué)式I的IRM化合物。
[0015] 術(shù)語(yǔ)"包含"及其變體，在這些術(shù)語(yǔ)在本說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中出現(xiàn)的情況下，不 具有限制性含義。
[0016] 如此處使用的，"一個(gè)/一種(a/an)"、"該"、"至少一個(gè)"、與"一個(gè)或多個(gè)"可互換使 用。
[0017] 另外在本文中，借助端點(diǎn)對(duì)數(shù)值范圍進(jìn)行的描述包括隸屬該范圍的全部數(shù)字（例 如，1至5包括1、1.5、2、2.75、3、3.80、4、5等）。
[0018] "誘導(dǎo)"及其變體是指細(xì)胞活性的任何可測(cè)量的增加。例如，免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)可包 括例如細(xì)胞因子產(chǎn)生方面的、免疫細(xì)胞激活、增殖或成熟方面的、和/或其他免疫功能提高 的指示方面的的增加。
[0019] "治療性的"及其變體是指改善與病癥相關(guān)的一種或多種現(xiàn)有癥狀或臨床征象的 治療。
[0020] "治療"及其變體是指使與病癥相關(guān)的癥狀或征象在任何程度上降低、限制發(fā)展、 改善、預(yù)防、或消退。
[0021] 本發(fā)明的以上概述不意在描述本發(fā)明的每個(gè)所披露的實(shí)施例或每一個(gè)實(shí)施方式。 以下的描述是更具體地示例說(shuō)明性實(shí)施例。在貫穿本說(shuō)明書(shū)的數(shù)個(gè)地方，通過(guò)實(shí)例的列表 提供指導(dǎo)，這些實(shí)例能以不同的組合形式使用。在每種情況下，該列表僅作為代表性群組發(fā) 揮作用并且不應(yīng)當(dāng)解釋為排他性列表。
[0022] 發(fā)明詳述
[0023]本發(fā)明涉及免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑（IRM)的方法與配制品，該方法與配制品在一些實(shí)施 例中可以經(jīng)由注射沉積在局部化組織區(qū)域內(nèi)并且可以在較長(zhǎng)的時(shí)間段里提供局部活性IRM 化合物。在此描述的配制品展現(xiàn)出高度的穩(wěn)定性，尤其是IRM化合物。
[0024]通常，本發(fā)明的配制品包括乙醇、芝麻油、以及具有以下化學(xué)式（I)的IRM化合物：
[0026]其中：
[0027] X是具有多至8個(gè)碳原子的亞烷基，這些碳原子可任選地被-0-間隔或封端；
[0028] R2是氫、烷基、烷氧基烷撐基（alkoxyalkylenyl)、烷氨基烷撐基 (alkylaminoalkylenyl) n 〇!c^xS^^iS(hydroxyalkylenyl)；
[0029] Y 是-C(0)_ 或-S(0)2-;
[0030] h是具有11-23個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂肪族基團(tuán)，任選地包括一個(gè)或多個(gè)不飽 和的碳_碳鍵;并且
[0031] R是氫、鹵素或羥基；
[0032] 或其一種藥學(xué)上可接受的鹽。
[0033] 如本文所用，術(shù)語(yǔ)"烷基"、"烯基"和前綴"烷包括直鏈和支鏈基團(tuán)以及環(huán)狀基 團(tuán)，例如環(huán)烷基和環(huán)烯基。除非另外規(guī)定，這些基團(tuán)包含1至23個(gè)碳原子，烯基包含2至23個(gè) 碳原子。在一些實(shí)施例中，這些基團(tuán)總共具有多至20個(gè)碳原子、多至18個(gè)碳原子、多至16個(gè) 碳原子、多至10個(gè)碳原子、多至8個(gè)碳原子、多至7個(gè)碳原子、多至6個(gè)碳原子、或多至4個(gè)碳原 子。環(huán)狀基團(tuán)可以是單環(huán)的或多環(huán)的并優(yōu)選地具有3-10個(gè)環(huán)碳原子。示例性的環(huán)狀基團(tuán)包 括環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基、環(huán)戊基、環(huán)己基、金剛烷基及取代和未取代的冰片基、降冰片基和降 冰片烯基。
[0034]除非另外指明，"亞烷基"和"亞烯基"是如上定義"烷基"和"烯基"基團(tuán)的二價(jià)形 式。當(dāng)"亞烷基"和"亞烯基"分別被取代時(shí)，使用術(shù)語(yǔ)"烷撐基（alkylenyl)"和"烯撐基 (alkenyleny 1)。例如，烷氧基燒撐基基團(tuán)包含與烷氧基基團(tuán)連接的亞烷基部分。
[0035] 具有可任選地被間隔"的碳原子的亞烷基基團(tuán)是指在-0-的任一側(cè)上具有碳 原子。實(shí)例是-CH2-CH2-〇-CH2-CH2-。
[0036] 具有可任選地被封端"的碳原子的亞烷基基團(tuán)是指在亞烷基基團(tuán)或碳原子鏈 的任一端上具有-0-。實(shí)例包括-〇-CH2-CH2-CH2-CH 2-和-CH2-CH2-CH2-CH2-〇-。在本發(fā)明中所 使用的化合物中，當(dāng)X是具有多至8個(gè)碳原子的亞烷基，而這些碳原子被-0-封端時(shí)，-0-可以 連接至咪唑環(huán)的氮或者酰胺(Y是-c(0)-)或磺酰胺(Y是-s(0)2-)基團(tuán)的氮。
[0037]本發(fā)明包括任何其藥學(xué)上可接受形式的本文描述的IRM化合物(包括中間體），包 括固體、半固體、溶劑化物(例如水合物）、異構(gòu)體(例如非對(duì)映體和對(duì)映體）、鹽、多晶型物、 前藥等。特別地，如果化合物是光學(xué)活性的，本發(fā)明具體地包括該化合物對(duì)映體的每一個(gè)， 以及對(duì)映體的外消旋混合物。需理解術(shù)語(yǔ)"化合物"包括任何或所有這些形式，無(wú)論是否明 確說(shuō)明（雖然有時(shí)明確說(shuō)明了"鹽"）。
[0038]對(duì)于在此提出的任何化合物，包括化學(xué)式I，以下變量(例如X、R2、R等等）中的每一 個(gè)在其任何實(shí)施例中可以與任何一個(gè)或多個(gè)其他的變量在其任何實(shí)施例中結(jié)合并且與在 此所描述的任一個(gè)化學(xué)式相關(guān)聯(lián)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所能理解的那樣。每個(gè)所得變量組合 都是本發(fā)明的實(shí)施例。
[0039] 在一些實(shí)施例中，X是具有多至8個(gè)碳原子的亞烷基，這些碳原子可任選地被-0-間 隔或封端。
[0040] 在一些實(shí)施例中，X是具有多至4個(gè)碳原子的亞烷基，這些碳原子可任選地被-0-間 隔或封端。
[0041 ] 在一些實(shí)施例中，X是-0-C2-8亞烷基(例如-0-C2-5亞烷基）。在這些實(shí)施例中，-〇-直 接附接至咪唑環(huán)的氮。
[0042] 在一些實(shí)施例中，X是-0-C3-8亞烷基(例如-0-C3-5亞烷基）。在這些實(shí)施例中，-0-直 接附接至咪唑環(huán)的氮。
[0043] 在一些實(shí)施例中，X是-&-8亞烷基(例如_C2-5亞烷基）。
[0044] 在一些實(shí)施例中，X是被-0-間隔的-C2-8亞烷基(例如_C2- 5亞烷基）。
[0045] 在一些實(shí)施例中，X是-C3-8亞烷基(例如_C3-5亞烷基）。
[0046] 在一些實(shí)施例中，x是-〇-亞丁基（例如-o-ch2-ch2-ch2-ch 2-)。在這些實(shí)施例中，_ 〇-直接附接至咪唑環(huán)的氮。
[0047] 在一些實(shí)施例中，X是-CH2-CH2-O-CH2-CH2-。
[0048] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，R2是氫、烷 基、烷氧基烷撐基、烷氨基烷撐基、或羥基烷撐基。
[0049] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，R2是氫、烷 基、烷氧基烷撐基、或羥基烷撐基。
[0050] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，R2是氫、烷 基、或烷氧基燒撐基。
[0051] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，1?2是甲基、 乙基、丙基、丁基、乙氧基甲基、甲氧基甲基、乙基氨基甲基、或2-甲氧基乙基。
[0052]在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，1?2是甲基、 乙基、丙基、丁基、乙氧基甲基、甲氧基甲基、或2-甲氧基乙基。
[0053]在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，1?2是乙基、 丁基、乙氧基甲基、或2-甲氧基乙基。
[0054]在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，心是心^烷 基。
[0055] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，R2是丁基 (例如-ch2-ch 2-ch2-ch3)。
[0056] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，1?2是乙氧基 甲基(例如-ch 2-o-ch2-ch3 )。
[0057] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，辦是2-甲氧 基乙基（例如_CH2 _CH2_0_CH3)。
[0058] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X時(shí)，1?2是乙基氨 基甲基(例如-CH 2-NH-CH2-CH3)。
[0059] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了XSR2時(shí)，R是氫、 鹵素、羥基、烷基、鹵代烷基、或烷氧基。
[0060] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了XSR2時(shí)，R是鹵 素或羥基。
[0061 ]在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了XSR2時(shí)，R是氫。
[0062] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了XSR2時(shí)，R是鹵 素。在一些實(shí)施例中，R是氟、氯、或溴。
[0063] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X、RSR2時(shí)，￥是_ c(o)-或-s(o) 2-〇
[0064] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X、RSR2時(shí)，Y是- c(o)-〇
[0065] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了乂、1?、1?2或￥時(shí)，1?1 是具有11-23個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂肪族基團(tuán)，任選地包括一個(gè)或多個(gè)不飽和的碳-碳鍵 (例如-(CH2) 7-CH = CH- (CH2) 7-CH3、_ (CH2) 7-CH = CH- (CH2) 5-CH3、_ (CH2) 9-CH = CH- (CH2) 5-CH3、_ (CH2) 6_ (CH2-CH=CH) 2_ (CH2) 4-CH3、_ (CH2) 6_ (CH2-CH = CH) 3-CH2-CH3、或_ (CH2) 2_ (CH2-CH=CH)4-(CH2)4-CH3)。
[0066] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X、R、R2或Y時(shí)，心 是C11-C23烷基。
[0067] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了乂、1?、1?2或￥時(shí)，1?1 是Cl5_C23烷基。
[0068] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了X、R、R2或Y時(shí)，h 是Cl5_Cl9烷基。
[0069] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了乂、1?、1?2或￥時(shí)，1?1 是Cl5_Cl7烷基。
[0070] 在一些實(shí)施例中，包括以上化學(xué)式I的實(shí)施例的任一項(xiàng)，當(dāng)定義了乂、1?、1?2或￥時(shí)，1?1 是Cl7烷基。
[0071] 在化學(xué)式I的一些實(shí)施例中，X是-〇-C3-5亞烷基，并且R2是甲基、乙基、丙基、丁基、 乙氧基甲基、甲氧基甲基、或2-甲氧基乙基。
[0072] 在化學(xué)式I的一些實(shí)施例中，X是-0-亞丁基，并且辦是丁基。
[0073] 在化學(xué)式I的一些實(shí)施例中，是直鏈或支鏈烷基基團(tuán)。
[0074] 在化學(xué)式I的一些實(shí)施例中，是直鏈烷基基團(tuán)。
[0075] 在一些實(shí)施例中，具有化學(xué)式I的化合物是N-(4_{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4， 5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺：
[0077]或其一種藥學(xué)上可接受的鹽。
[0078]本發(fā)明配制品中所使用的IRM化合物可以由包括與化學(xué)領(lǐng)域眾所周知的那些方法 類(lèi)似的方法的合成途徑來(lái)合成，特別是根據(jù)本文所包括的說(shuō)明來(lái)合成。原料一般可從商業(yè) 來(lái)源如Aldrich Chemicals(奧德里奇化學(xué)公司）（Milwaukee(密爾沃基），威斯康辛，美國(guó)） 獲得或使用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法容易地制備(例如通過(guò)下列文獻(xiàn)中一般性描述的方 法制備：Louis F.Fieser(路易斯F.費(fèi)塞爾）和Mary Fieser(瑪麗費(fèi)塞爾），Reagents for Organic Synthesis(有機(jī)合成試劑），第1-19卷，Wiley(偉利），紐約（1967-1999版）；Alan R.Katritsky(艾倫R?凱楚斯基），Otto Meth_Cohn(奧托麥斯科恩），Charles W.Rees(查爾 其ifW?瑞茜），Comprehensive Organic Functional Group Transformations(綜合有機(jī)官能 團(tuán)轉(zhuǎn)化），第1-6卷，Pergamon Press(帕加蒙出版社），牛津，英國(guó)，（1995) ;Barry M.Trost (巴里M?特羅斯特）與Ian Fleming(伊恩弗菜明），Comprehensive Organic Synthesis(綜 合有機(jī)合成），第1-8卷，Pergamon Press (帕加蒙出版社），牛津，英國(guó)，（1991);或 Beilsteins Handbuch der organischen Chemie(貝爾斯坦有機(jī)化學(xué)手冊(cè)），第4版， Springer-Verlag，柏林，德國(guó)，包括增刊(也可通過(guò)貝爾斯坦在線數(shù)據(jù)庫(kù)得到））。
[0079] 對(duì)于可以用于制備具有化學(xué)式I的化合物的各個(gè)反應(yīng)步驟的更詳細(xì)的描述，參見(jiàn) 例如美國(guó)專利號(hào)7，799，800;以及美國(guó)專利公開(kāi)號(hào)2013/0230578。
[0080] 具有化學(xué)式I的化合物還可以制備自描述于現(xiàn)有技術(shù)中的高級(jí)中間化合物。具有 化學(xué)式I的化合物可以制備自分別描述于國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朩02012/167081的反應(yīng)方案II、 III與IV中具有化學(xué)式XIV、XXIV以及XXXVI的高級(jí)中間化合物。具有化學(xué)式I的化合物還可 以制備自均描述于美國(guó)專利號(hào)6451810中的反應(yīng)方案I中具有化學(xué)式VII的高級(jí)中間化合物 或反應(yīng)方案II中具有化學(xué)式VIII的高級(jí)中間化合物。用于制備上述高級(jí)中間化合物的合成 程序還描述于國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朩0 2012/167081以及美國(guó)專利號(hào)6451810中。
[00811使用描述于美國(guó)專利號(hào)6451810的反應(yīng)方案II-III中的程序，可以通過(guò)將上述高 級(jí)中間化合物與適當(dāng)?shù)聂人峄螋弱Ｂ然衔镞M(jìn)行反應(yīng)制備具有化學(xué)式I的化合物，其中X 是-c(o)-?？梢允褂靡韵卖人?或?qū)?yīng)的羧酰氯衍生物）制備優(yōu)選的化學(xué)式I化合物，其中X 是-c(0)- :月桂酸、豆蔻酸、棕櫚酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、山崳酸、以及木蠟酸。可以從 不飽和脂肪酸(如油酸、棕櫚油酸、異油酸、亞油酸、亞麻酸（linoleneic acid)或花生油酸） 制備化學(xué)式I化合物，其中X是-C(0)_并且R1是不飽和脂肪族基團(tuán)（即具有一個(gè)或多個(gè)不飽 和的碳-碳鍵的脂肪族基團(tuán)）。
[0082]使用描述于美國(guó)專利號(hào)6331539的反應(yīng)方案II中的程序，可以通過(guò)將上述高級(jí)中 間化合物與適當(dāng)?shù)幕酋Ｂ冗M(jìn)行反應(yīng)制備具有化學(xué)式I的化合物，其中X是-s(0)2-。
[0083] 本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解其他合成路徑可用于合成本發(fā)明的化合物。
[0084] 在本發(fā)明配制品中所使用的IRM化合物的制備中，有時(shí)可能需要保護(hù)特定的官能 度，而使中間體上的其他官能團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)。對(duì)這種保護(hù)的需求可以根據(jù)特定官能團(tuán)的性質(zhì) 和反應(yīng)步驟條件的不同而改變。適合的氨基保護(hù)基團(tuán)包括乙?；⑷阴；⑹?丁氧基 羰基(Boc)、芐氧基羰基、以及9-芴甲氧羰基(Fmoc)。適合的羥基保護(hù)基團(tuán)包括乙酰基和甲 硅烷基，如叔丁基二甲基甲硅烷基基團(tuán)。關(guān)于保護(hù)基和其用途的一般說(shuō)明，參看T .W.Greene (T.W?格林）與P.G.M.Wuts(P.G.M?伍茲），Protective Groups in Organic Synthesis(《有 機(jī)合成中的保護(hù)基》）John Wiley&Sons(約翰威利父子公司），紐約，美國(guó)，1991。
[0085] 可以將常規(guī)的分離與純化方法和技術(shù)用于分離本發(fā)明配制品中所使用的IRM化合 物。這類(lèi)技術(shù)可以包括例如所有類(lèi)型的色譜法（高效液相色譜法(HPLC)、使用常用吸收劑 (如硅膠)的柱色譜法、以及薄層色譜法）、重結(jié)晶、微分(即液-液)萃取技術(shù)。
[0086]在此描述的可注射配制品中所使用的乙醇典型地是以約lwt-%至約9wt_%的量 存在。在一些實(shí)施例中，乙醇是以約3wt_%至約8wt_%的量存在。在一些實(shí)施例中，乙醇是 以約5wt-%至約7.5wt-%的量存在。在一些實(shí)施例中，乙醇是以約lwt-%至約3wt-%的量 存在。在一些實(shí)施例中，乙醇是以約3wt-%至約4wt-%的量存在。在一些實(shí)施例中，乙醇是 以約4wt-%至約5wt-%的量存在。在一些實(shí)施例中，乙醇是以約5wt-%至約6wt-%的量存 在。在一些實(shí)施例中，乙醇是以約6wt-%至約7wt-%的量存在。在一些實(shí)施例中，乙醇是以 約6.5wt-%至約7.5wt-%的量存在。在一些實(shí)施例中，乙醇是以約8wt-%至約9wt-%的量 存在。在一些實(shí)施例中，如以下方法中所描述，將過(guò)量的乙醇（即大于可溶于芝麻油中的 量），例如在一些實(shí)施例中至少l〇wt-%乙醇，在一些實(shí)施例中至少12wt-%乙醇，在一些實(shí) 施例中至少14wt- %乙醇，用于溶解更大量的IRM化合物。當(dāng)將IRM-乙醇溶液添加至芝麻油 中時(shí)，相比于簡(jiǎn)單地將IRM添加至預(yù)混合的芝麻油-乙醇溶液，IRM溶解地更加迅速;然后將 過(guò)量的乙醇（即以超出芝麻油中的溶解極限存在）蒸發(fā)，以產(chǎn)生最終配制品（包含9wt-%乙 醇或更少）。在一些實(shí)施例中，適合用于在此描述的可注射配制品中的乙醇包括不包含任何 水和變性劑的乙醇?？捎糜诒景l(fā)明所述配制品中的示例性乙醇包括200普如弗（proof)乙 醇，例如無(wú)水乙醇，USP級(jí)。
[0087]在此描述的可注射配制品還包括芝麻油。在此描述的配制品中所使用的芝麻油為 藥物級(jí)，如芝麻油(Sesame Oil)，NF。在一些實(shí)施例中，可將芝麻油進(jìn)行精制，這樣使得一種 或多種極性化合物基本上從芝麻油中去除或在基本上不改變芝麻油的脂肪酸譜的情況下 使其含量降低。例如，芝麻油可具有包括棕櫚酸、硬脂酸、油酸、與亞油酸的脂肪酸譜。其他 脂肪酸也可以較低水平存在，典型地低于lwt-%。存在于芝麻油中的極性化合物包括但不 限于如下化合物:甘油單酯、甘油二酯、游離脂肪酸、植物固醇、色素（葉綠素、胡蘿卜素）、芝 麻素、芝麻酚林、產(chǎn)生自氧化的產(chǎn)品、以及環(huán)境化學(xué)物質(zhì)?？梢允褂脴?biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)，如酸值試驗(yàn)、 羥值試驗(yàn)、過(guò)氧化值試驗(yàn)、以及微量氮值試驗(yàn)，定量地測(cè)量芝麻油中的極性化合物。可將標(biāo) 準(zhǔn)色譜法用于從芝麻油中去除或?qū)嵸|(zhì)性地降低至少一種極性化合物的含量，以提供精制的 芝麻油。本領(lǐng)域熟知的適合的色譜法包括基于重力的柱色譜法、快速柱色譜法、中壓液相層 析、或高壓色譜法。
[0088] 在一些實(shí)施例中，芝麻油具有小于或等于2的羥值?？梢愿鶕?jù)USP 36〈401>Fats and Fixed Oils,Hydroxyl Value(《USP 36〈401>脂肪與脂肪油，輕值》）中所描述的公布的 程序來(lái)測(cè)定芝麻油的羥值。在一些實(shí)施例中，芝麻油的酸值小于或等于0.1。可以根據(jù)USP 36〈401>Fats and Fixed 0ils，Acid Value(《USP 36〈401>脂肪與脂肪油，酸值》）中所描述 的公布的程序來(lái)測(cè)定芝麻油的酸值。在一些實(shí)施例中，芝麻油的過(guò)氧化值小于或等于1。可 以根據(jù)USP 36〈401>Fats and Fixed Oils,Peroxide Value(《USP 36〈401>脂肪與脂肪油， 過(guò)氧化值》）中所描述的公布的程序來(lái)測(cè)定芝麻油的過(guò)氧化值。在一些實(shí)施例中，芝麻油的 總氮含量小于或等于lppm。可以根據(jù)ASTM D5762-12中所描述的公布的方法來(lái)測(cè)定芝麻油 的微量氮值。在一些實(shí)施例中，芝麻油包含不大于〇. 〇5wt-%的芝麻素。在一些實(shí)施例中，芝 麻油包含不大于0.05wt-%的芝麻酸林?？梢愿鶕?jù)由T.Tashiro(田代），Y.Fukuda(福田）， T.Osawa(大澤）和M.Namiki(并木）在Journal of the American Oil Chemists'Society (美國(guó)油化學(xué)協(xié)會(huì)雜志），67,508(1990)中所描述的公布的芝麻素/芝麻酸林測(cè)定來(lái)確定芝 麻素與芝麻酚林的水平。
[0089]出人意料地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)包含IRM化合物、乙醇、以及精制的芝麻油的配制品（精制的 芝麻油如以上描述使得一種或多種極性化合物基本上從芝麻油中去除）具有增強(qiáng)的穩(wěn)定 性，不僅是配制品的總體穩(wěn)定性，而且還有IRM化合物自身的穩(wěn)定性。在此描述的配制品展 現(xiàn)出高度的化學(xué)和物理穩(wěn)定性，尤其是IRM化合物。例如，在此所描述的一些實(shí)施例中，如當(dāng) 使用精制的芝麻油時(shí)，配制品展現(xiàn)出可接受的用于商業(yè)用途的貨架期，例如6個(gè)月的貨架 期、1年的貨架期等。
[0090]在一些實(shí)施例中，本發(fā)明所述的可注射藥物配制品包含芝麻油、乙醇(7.5wt_% )、 BHA(300ppm)、以及N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基}丁基)十八 酰胺（0.15mg/mL)。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明所述的可注射藥物配制品包含芝麻油、乙醇 (7.5￥卜％)、8骱(30(^口111)、以及1(4-{[4-氨基-2-丁基-111-咪唑并[4,5-(3]喹啉-1-基]氧 基}丁基)十八酰胺(〇.3mg/mL)。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明所述的可注射藥物配制品包含芝 麻油、乙醇（7.5￥卜％)、8骱(30(^口111)、以及1(4-{[4-氨基-2-丁基-111-咪唑并[4,5-(3]喹 啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺(〇.6mg/mL)。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明所述的可注射藥物配 制品包含芝麻油、乙醇（7.5的-%)、8說(shuō)(30(^口111)、以及1(4-{[4-氨基-2-丁基-111-咪唑并 [4,5-c]喹啉-1-基]氧基}丁基)十八酰胺（1.2mg/mL)。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明所述的可注 射藥物配制品包含芝麻油、乙醇（7.5wt-% )、BHA(300ppm)、以及N-(4-{ [4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺(2.4mg/mL)。
[0091]在一些實(shí)施例中，本發(fā)明所述的可注射藥物配制品包含芝麻油、乙醇(7.5wt_% )、 BHA(300ppm)、以及N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基}丁基)十八 酰胺（〇 ? lmg/mL至約2 ? 5mg/mL)。
[0092] 可注射制劑的選擇中所涉及的因素包括IRM化合物在該制劑中的溶解度、IRM化合 物在該制劑中的穩(wěn)定性、該制劑的物理穩(wěn)定性。當(dāng)設(shè)計(jì)可以長(zhǎng)時(shí)間（>6個(gè)月）并且在5 °C至40 °(：范圍的溫度下儲(chǔ)存的配制品時(shí)，這些因素尤其重要。
[0093] 可以通過(guò)該配制品的化學(xué)組成和貯存條件影響IRM化合物在該配制品中的化學(xué)穩(wěn) 定性。可以通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)分析方法(如HPLC)分析隨時(shí)間的推移該配制品中IRM化合物的含 量來(lái)確定IRM化合物在該配制品中的化學(xué)穩(wěn)定性。
[0094] 在一些實(shí)施例中，藥物配制品可以進(jìn)一步包括一種或多種添加劑，該添加劑包括 但不限于抗氧化劑、抗微生物劑、佐劑、增稠劑、助懸劑、表面活性劑、以及分散劑。在一些實(shí) 施例中，該配制品可以包括添加的抗氧化劑，如丁羥茴醚(BHA)或丁羥甲苯(BHT)。該配制品 中添加的抗氧化劑濃度可以為至少1 Oppm、50ppm、1 OOppm、200ppm、以及高達(dá)300ppm。
[0095] 在一些實(shí)施例中，本披露的這些藥物配制品與方法可以包括其他另外活性劑，例 如混合或分別投放。此類(lèi)添加劑可以包括抗原(例如疫苗）、化學(xué)治療劑、細(xì)胞毒性劑、抗體、 抗病毒劑、細(xì)胞因子、腫瘤壞死因子受體(TNFR)激動(dòng)劑、或另外的免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑?？梢耘c 本發(fā)明所述配制品結(jié)合遞送的TNFR激動(dòng)劑包括CD40受體激動(dòng)劑，如披露于申請(qǐng)美國(guó)專利申 請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2004/0141950(N 〇elle(諾勒)等人）中。其他與本發(fā)明所述IRM配制品組合使用的 活性成分包括披露于例如美國(guó)專利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2003/0139364(Krieg(克里格)等人）中的那 止匕 -、〇
[0096] 具有化學(xué)式I的IRM化合物已經(jīng)顯示出誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞因子，如TNF_a(參見(jiàn)例如美國(guó) 專利號(hào)7，799,800;以及美國(guó)專利公開(kāi)號(hào)2013/0230578)。用于誘導(dǎo)細(xì)胞因子產(chǎn)生的能力表 明，本發(fā)明所述配制品中所使用的IRM化合物可以多種不同方式調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，從而使得 IRM化合物可以用于治療多種障礙。可以通過(guò)施用在此披露的配制品誘導(dǎo)產(chǎn)生的其他細(xì)胞 因子通常包括 I 型干擾素（例如 INF-a)、IL-l、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、MIP-l、MCP-l&&# 種其他細(xì)胞因子。在其他效應(yīng)中，這些和其他細(xì)胞因子抑制病毒產(chǎn)生和腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，使得 本發(fā)明所述配制品可用于病毒性疾病和腫瘤性疾病的治療。例如，腫瘤壞死因子、干擾素、 或白細(xì)胞介素已經(jīng)顯示出刺激某些單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞衍生的細(xì)胞因子的快速釋放并且還 能夠刺激B細(xì)胞分泌在抗病毒與抗腫瘤活性中起重要作用的抗體。
[0097] 在一些實(shí)施例中，本發(fā)明所述配制品可用于治療實(shí)體瘤，如頭頸部腫瘤、乳腺腫 瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、以及膀胱腫瘤。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明所述配制品可用于治療皮膚 T細(xì)胞淋巴瘤。
[0098] 在一些實(shí)施例中，本發(fā)明所述配制品可用于治療病毒性疣以及肥厚性、或瘢痕疙 瘩性瘢痕。
[0099] 本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種遞送在此所描述的藥物配制品的方法，該方法包括將該 配制品注射進(jìn)入受試者。注射可以通過(guò)例如皮下、肌內(nèi)、或進(jìn)入選定的組織部位，如腫瘤塊。 在一些實(shí)施例中，將該配制品注射進(jìn)入腫瘤塊、疣、或肥厚性瘢痕組織中。
[0100] 本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療疾病的方法，該方法包括將在此所描述的任一種配 制品注射進(jìn)入需要治療該疾病的受試者。
[0101] 本發(fā)明所述方法可以在任何合適的受試者上進(jìn)行。合適的受試者包括動(dòng)物，如人 類(lèi)、非人類(lèi)靈長(zhǎng)動(dòng)物、嚙齒類(lèi)、狗、貓、馬、豬、綿羊、山羊、或奶牛。
[0102] 用于治療的配制品所施用至的動(dòng)物可患有疾病(例如病毒性或腫瘤性疾?。?，并且 施用該化合物可提供治療性治療?？梢酝ㄟ^(guò)施用本發(fā)明所述配制品進(jìn)行治療的示例性病癥 包括：
[0103] (a)腫瘤性疾病，如黑色素瘤、白血?。ɡ绻撬栊园籽　⒙粤馨图?xì)胞性白血 病、多發(fā)性骨髓瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、皮膚T淋巴細(xì)胞瘤、B細(xì)胞淋巴瘤、以及毛細(xì)胞白血 病）、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、頭或頸部癌、膀胱癌及其他癌癥；
[0104] (b)病毒性疾病，如由痘病毒(例如正痘病毒，如天花或牛痘、或觸染性軟疣)或乳 多孔病毒(例如乳頭瘤病毒，如引起生殖器疣、普通疣或跖疣的那些)感染導(dǎo)致的疾?。?br>[0105] (c)與傷口修復(fù)相關(guān)聯(lián)的疾病，如抑制瘢痕疙瘩及其他類(lèi)型瘢痕的形成(例如促進(jìn) 傷口愈合，包括慢性傷口）。
[0106] 在一些實(shí)施例中，所治療的疾病是腫瘤性疾病。在一些實(shí)施例中，將該配制品注射 進(jìn)入腫瘤塊中。在一些實(shí)施例中，所治療的疾病選自頭或頸部癌、乳腺癌、淋巴瘤、黑色素 瘤、以及膀胱癌。
[0107] 在一些實(shí)施例中，所治療的疾病是導(dǎo)致疣的病毒性疾病。在一些實(shí)施例中，將該配 制品注射進(jìn)入統(tǒng)中。
[0108] 應(yīng)當(dāng)理解的是，在上述疾病的治療中，例如，也可以將在此披露的配制品與其他治 療組合使用，如其他活性劑及其他程序(例如放射、化學(xué)治療、化學(xué)消融術(shù)、激光消融、冷凍 療法、以及手術(shù)切除）。
[0109] 對(duì)于根據(jù)本發(fā)明所述方法治療有效的配制品中IRM化合物的精確量、以及劑量方 案，例如根據(jù)本領(lǐng)域已知的因素而變化，包括載體的性質(zhì)、受試者免疫系統(tǒng)的能力與狀態(tài) (例如受抑的、受損的、受激的）、配制品所施用至的物種、所選擇的劑量方案、應(yīng)用位點(diǎn)、具 體的配制品、以及所治療的病情。因此，概括地給出配制品的組合物是不實(shí)際的，該配制品 包括乙醇、芝麻油、以及具有化學(xué)式I的IRM化合物或構(gòu)成有效量或?qū)τ谒锌赡軕?yīng)用有效 的劑量方案的量的IRM化合物。然而，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以容易地確定適當(dāng)?shù)呐渲?品、治療有效量的IRM化合物、以及基于在此提供的指導(dǎo)的劑量方案、在本領(lǐng)域中可獲得的 關(guān)于IRM化合物的信息、以及常規(guī)試驗(yàn)。因此，術(shù)語(yǔ)"治療有效量"意指足夠誘導(dǎo)治療或預(yù)防 效果的IRM化合物的量，如細(xì)胞因子誘導(dǎo)、TH2免疫應(yīng)答的抑制、抗病毒或抗腫瘤活性、瘢痕 的縮小、或促進(jìn)傷口愈合。
[0110] 有效誘導(dǎo)細(xì)胞因子生物合成的配制品或配制品中IRM化合物的量是以下量，該量 足夠引起一種或多種細(xì)胞類(lèi)型(如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞以及B細(xì)胞)產(chǎn)生一種或多 種細(xì)胞因子(如1?^€^冊(cè)-€1、11-1、11-6、11-10以及11-12)的量增加超過(guò)此類(lèi)細(xì)胞因子的 自然背景值。精確量根據(jù)本領(lǐng)域已知的因素而變化但預(yù)期劑量為約100納克每千克(ng/kg) 至約50毫克每千克(mg/kg)，在一些實(shí)施例中約10微克每千克(yg/kg)至約5mg/kg，約100ii g/kg至約lmg/kg、或約0.01mg/m 2至約10mg/m2?？商娲?，可以使用療程即將開(kāi)始之前獲得 的實(shí)際體重來(lái)計(jì)算劑量。對(duì)于以此方式計(jì)算的劑量，在療程開(kāi)始之前使用Dubois法:m 2 = (wt k，4、身高cV'72% 0.007184來(lái)計(jì)算體表面積(m2)。有效治療或抑制病毒感染的量， 例如，是引起病毒感染的一種或多種表現(xiàn)例如病毒病損、病毒載量、病毒產(chǎn)生速度和死亡率 與未治療的對(duì)照動(dòng)物相比降低的量并且可包括上述劑量的任一個(gè)?；衔锘蛩幬锝M合物能 有效治療瘤形成性病癥的量是將導(dǎo)致腫瘤尺寸或腫瘤病灶數(shù)減少的量并且可包括上述劑 量的任一個(gè)。
[0111] 本發(fā)明所述配制品可誘導(dǎo)某些細(xì)胞因子的產(chǎn)生并且可用作免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑，其能 夠以大量不同的方式調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，使它們可用于各種不同疾病的治療。在其他效應(yīng)中，這 些和其他細(xì)胞因子可抑制病毒生產(chǎn)和腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，使得配制品可用于例如病毒性以及腫 瘤性疾病的治療。還應(yīng)指出的是，可以在患病之前施用該配制品，這樣使得該配制品的施用 可提供預(yù)防性治療。
[0112]除引起細(xì)胞因子誘導(dǎo)的能力之外，本發(fā)明所述配制品可對(duì)先天免疫應(yīng)答的其他方 面產(chǎn)生作用。例如，可以刺激自然殺傷細(xì)胞的活性，這種效應(yīng)可能是由于細(xì)胞因子誘導(dǎo)所導(dǎo) 致。該配制品也可以引起巨噬細(xì)胞的激活，它反過(guò)來(lái)刺激一氧化氮的分泌和其他細(xì)胞因子 的產(chǎn)生。此外，該配制品可以引起B(yǎng)-淋巴細(xì)胞的增殖和分化。
[0113] 本發(fā)明所述配制品還可能對(duì)獲得性免疫應(yīng)答產(chǎn)生影響。例如，當(dāng)施用該配制品時(shí)， 可間接誘導(dǎo)T輔助細(xì)胞1型(Td)細(xì)胞因子IFN-y的產(chǎn)生以及抑制T輔助細(xì)胞2型(Th2)細(xì)胞因 子IL-4、IL-5與IL-13的產(chǎn)生。
[0114] 本發(fā)明所述配制品可以對(duì)具有受損的免疫功能的個(gè)體特別有用。例如，化合物或 鹽可以用于治療在例如移植患者、癌癥患者以及HIV患者中在抑制細(xì)胞介導(dǎo)免疫之后發(fā)生 的機(jī)會(huì)性感染與腫瘤。
[0115] 本發(fā)明因此還提供了例如一種在動(dòng)物中治療病毒感染的方法以及一種在動(dòng)物中 治療腫瘤性疾病的方法，該方法包括經(jīng)由注射給予該動(dòng)物有效量的本發(fā)明所述配制品。有 效治療或抑制病毒感染的量是引起病毒感染的一種或多種表現(xiàn)例如病毒病損、病毒載量、 病毒產(chǎn)生速度和死亡率與未治療的對(duì)照動(dòng)物相比降低的量。對(duì)于此類(lèi)治療有效的精確量根 據(jù)本領(lǐng)域已知的因素而變化，但預(yù)期為這樣一個(gè)量使得能夠遞送劑量為約lOOng/kg至約 50mg/kg，優(yōu)選地約lyg/kg至約5mg/kg的IRM化合物。配制品能有效治療瘤形成性病癥的量 是將導(dǎo)致腫瘤尺寸或腫瘤病灶數(shù)減少的量。同樣，精確量根據(jù)本領(lǐng)域已知的因素而變化，但 預(yù)期為這樣一個(gè)量使得在給定的藥物濃度下能夠經(jīng)由注射遞送劑量為約lOOng/kg至約 50mg/kg，例如約lyg/kg至約5mg/kg的IRM化合物。
[0116] 經(jīng)由注射遞送的本發(fā)明所述配制品的用途的具體實(shí)例包括但不限于頭頸癌以及 乳腺癌的治療。
[0117] 在此描述的可注射制劑可包括一系列的IRM化合物濃度，其下限基于IRM化合物的 最低治療潛能而上限主要基于藥物的溶解度。通常，IRM化合物的濃度為約0.1mg/ml至約 10mg/ml(大約按重量計(jì)0.01%至約1%)。在一些實(shí)施例中，IRM化合物是以約0. lmg/ml至約 6mg/ml的量存在。在一些實(shí)施例中，IRM化合物是以約0.5mg/ml至約3mg/ml的量存在。
[0118] 在此處所披露的方法的一些實(shí)施例中，可以例如每周單劑量至多劑量施用該配制 品，盡管在一些實(shí)施例中，可以通過(guò)以超出此范圍的頻度施用該配制品進(jìn)行本發(fā)明所述的 方法。在一些實(shí)施例中，可以按約每月一次至約每周五次施用該配制品。在一些實(shí)施例中， 按每周一次施用該配制品。
[0119] 本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種制備藥物配制品的方法，該藥物配制品包括乙醇、芝麻 油、以及具有化學(xué)式I的IRM化合物。在一些實(shí)施例中，該制備方法包括將該IRM化合物溶解 于乙醇中，以產(chǎn)生乙醇-IRM化合物溶液。在一些實(shí)施例中，該IRM化合物完全溶解于乙醇中， 而在一些實(shí)施例中，少量的IRM化合物保持不溶，但大部分的IRM化合物溶解。然后將該乙 醇-IRM化合物溶液與芝麻油進(jìn)行混合，以制備芝麻油-乙醇-IRM化合物配制品。在一些實(shí)施 例中，該IRM化合物完全溶解于該芝麻油-乙醇-IRM化合物配制品中，而在一些實(shí)施例中，少 量的IRM化合物在該芝麻油-乙醇-IRM化合物配制品中保持不溶，但大部分的IRM化合物溶 解。
[0120]在一些實(shí)施例中，該制備方法包括將該IRM化合物與乙醇以及芝麻油同時(shí)混合，以 制備該芝麻油-乙醇-IRM化合物配制品。在一些實(shí)施例中，該IRM化合物完全溶解于該芝麻 油-乙醇-IRM化合物配制品中，而在一些實(shí)施例中，少量的IRM化合物在該芝麻油-乙醇-IRM 化合物配制品中保持不溶，但大部分的IRM化合物溶解。
[0121] 在一些實(shí)施例中，該制備方法可進(jìn)一步包括從該芝麻油-乙醇-IRM化合物配制品 中蒸發(fā)一部分乙醇的步驟。通過(guò)在混合步驟過(guò)程中允許使用過(guò)量乙醇（乙醇以超出芝麻油 中的溶解極限存在），此類(lèi)方法允許IRM在該芝麻油-乙醇溶液中更快速的溶解。在一些實(shí)施 例中，在蒸發(fā)掉一部分乙醇之后，乙醇在最終配制品中殘余例如lwt-%至9wt_%。
[0122] 應(yīng)認(rèn)識(shí)到，可以在上述任何混合步驟過(guò)程中添加任何上述的添加劑。
[0123] 通過(guò)下文的非限制性實(shí)例來(lái)進(jìn)一步闡明本發(fā)明的實(shí)施例，但是這些實(shí)例中引述的 具體材料及其量以及其他條件和細(xì)節(jié)不應(yīng)當(dāng)解釋為不適當(dāng)?shù)叵拗票景l(fā)明。
[0124] 實(shí)例
[0125] 注射配制品組分
[0126] 根據(jù)美國(guó)專利公開(kāi)號(hào)2013/0230578(懷特曼）的實(shí)例1中描述的合成程序制備1 (4- {[ 4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4，5-c ]喹啉-1 -基]氧基} 丁基)十八酰胺。
[0127] 乙醇（200 普如弗(proof)，USP 級(jí)）獲得自 Pharmac〇-AAPER(Brookfield(布魯克菲 爾德），CT)或 Columbus Chemical Indus tries (哥倫布化學(xué)工業(yè)）（Columbus (哥倫布），WI)。 對(duì)于含有BHA的最終配制品，通過(guò)使溫和干燥氮?dú)饬魍ㄟ^(guò)乙醇(噴射)持續(xù)約5至10分鐘制備 脫氧乙醇的新鮮儲(chǔ)樣品。然后立即將瓶子蓋上。
[0128] 芝麻油獲得自Croda Inc.(克羅達(dá)公司）（Edison(愛(ài)迪生），NJ)的SUPER REFINED⑩芝麻油NF/NP等級(jí)產(chǎn)品（產(chǎn)品序號(hào)SR40280)。"NP"標(biāo)志表明，芝麻油不含M1T(丁 羥甲苯)作為添加的抗氧化劑。根據(jù)生產(chǎn)廠商，具有SUPERREFINED?標(biāo)志的芝麻油是使用 快速層析以去除芝麻油中存在的極性雜質(zhì)而進(jìn)行純化的。對(duì)于含有添加的BHA的最終配制 品，通過(guò)使溫和干燥氮?dú)饬魍ㄟ^(guò)芝麻油(噴射)持續(xù)約10至20分鐘制備脫氧芝麻油的新鮮儲(chǔ) 樣品。然后立即將瓶子蓋上。
[0129] 丁輕茴釀，NF級(jí)（BHA)獲得自 Spectrum Chemical Company (光譜化學(xué)公司）（New Brunswick(新不倫瑞克），NJ)。使用濃度為300ppm的BHA制備含有BHA的配制品。
[0130] 分析方法
[0131] 使用反相高效液相層析(配備有設(shè)置在321nm處的紫外光檢測(cè)器安捷倫1100HPLC 儀器，Agilent Technologies(安捷倫科技），圣克拉拉，CA)來(lái)確定注射配制品中N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺的含量。所使用的分析柱 是長(zhǎng)150mm、內(nèi)徑4.6mm、以及粒度3.5微米的Zorbax Bonus RP柱(安捷倫科技）。將柱維持在 45°C。用由在水中的0.1%三氟乙酸、甲醇、以及異丙醇組成的流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫。初始流 動(dòng)相由0.1%三氟乙酸與甲醇以85:15的比例組成。最終流動(dòng)相由0.1%三氟乙酸、甲醇與異 丙醇以5:40:55的比例組成。流速是1. OmL/分鐘。
[0132] 實(shí)例1。注射配制品：芝麻油中的乙醇(7.5重量百分比）
[0133] 將N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5_c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺 (〇.21g)與乙醇（26.79g)添加至琥珀玻璃瓶中。將瓶子蓋上并且置于超聲波浴中（Branson 型號(hào)8510_DTH，Branson Ultrasonics(必能信超聲公司），Danbury(丹伯里），CT)。將該樣品 超聲處理直至所有N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八 酰胺溶解(約10分鐘）。所得乙醇溶液含有0.78重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪 唑并[4，5-c ]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺瓶。然后，將21.59g的含有0.78重量百分比的 N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺的乙醇溶液轉(zhuǎn) 移至含有277.5g芝麻油的琥珀玻璃瓶中。再添加另外1.08g的乙醇添加至該瓶中。將瓶子蓋 上并且置于實(shí)驗(yàn)室滾軸混合器上。攪拌該配制品直至目測(cè)其變得透明（攪拌持續(xù)約15分 鐘）。在最后一步中，使該配制品穿過(guò)0.2微米聚醚砜(PSA)膜濾器(EMD Mi 11 ipore (EMD密理 博公司），Billerica(比勒利卡），MA)并且將6mL的配制品收集在透明玻璃血清瓶(Miller Analytical Company(米勒分析公司），Bristol (布里斯托爾），PA)中。用干燥氮?dú)饬鞔祾咝?瓶中的頂部空間并且將小瓶用含有灰色氯丁基-異戊二稀隔片（Miller Analytical Company(米勒分析公司））的錯(cuò)卷曲蓋加帽。N-(4-{ [4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹 琳-1-基]氧基} 丁基)十八醜胺在最終配制品中的濃度是約0.5mg/mL。
[0134] 實(shí)例2。注射配制品：含有BHA的芝麻油中的乙醇(7.5重量百分比）
[0135] 將N-(4_{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5_c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺 (〇.21g)與脫氧乙醇（26.79g)添加至琥珀玻璃瓶中。將瓶子蓋上并且置于超聲波浴中 (Branson型號(hào)8510-DTH)。將該樣品超聲處理直至所有N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并 [4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺溶解(約10分鐘）。所得乙醇溶液含有0.78重量百 分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺瓶。然 后，將21.59g的含有0.78重量百分比的N-(4-{ [4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1- 基]氧基}丁基)十八酰胺以及BHA(90mg)的乙醇溶液轉(zhuǎn)移至含有277.5g脫氧芝麻油的琥珀 玻璃瓶中。再將添加另外l.〇8g的脫氧乙醇添加至該瓶中。然后使溫和干燥氮?dú)饬魍ㄟ^(guò)該配 制品持續(xù)約10秒。將瓶子蓋上并且置于實(shí)驗(yàn)室滾軸混合器上。攪拌該配制品直至目測(cè)其變 得透明（攪拌持續(xù)約15分鐘）。在最后一步中，使該配制品穿過(guò)0.2微米聚醚砜(PSA)膜濾器 (EMD Millipore(EMD密理博公司），Billerica(比勒利卡），MA)并且將6mL的配制品收集在 透明玻璃血清瓶(Miller Analytical Company(米勒分析公司），Bristol(布里斯托爾）， PA)中。用干燥氮?dú)饬鞔祾咝∑恐械捻敳靠臻g并且將小瓶用含有灰色氯丁基-異戊二烯隔片 (Miller Analytical Company(米勒分析公司））的錯(cuò)卷曲蓋加帽。N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4，5-c ]喹啉-1 -基]氧基} 丁基)十八酰胺在最終配制品中的濃度是約0.5mg/mL。
[0136] 實(shí)例3。注射配制品：芝麻油中的乙醇(5重量百分比）
[0137] 將N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5_c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺 (0.30g)與乙醇（15.0g)添加至琥珀玻璃瓶中。將瓶子蓋上并且置于超聲波浴中（Branson型 號(hào)8510-DTH)。將該樣品超聲處理直至所有N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹 啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺溶解(約10分鐘）。所得乙醇溶液含有2.0重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺瓶。然后，將0.29g的 含有2.0重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基） 十八酰胺的乙醇溶液轉(zhuǎn)移至含有10.5g芝麻油的琥珀玻璃瓶中。再將添加另外0.23g的乙醇 添加至該瓶中。將瓶子蓋上并且置于實(shí)驗(yàn)室滾軸混合器上。攪拌該配制品直至目測(cè)其變得 透明（攪拌持續(xù)約15分鐘）。在最后一步中，使該配制品穿過(guò)0.2微米聚醚砜(PSA)膜濾器 (EMD Millipore(EMD密理博公司），Billerica(比勒利卡），MA)并且將6mL的配制品收集在 透明玻璃血清瓶(Miller Analytical Company(米勒分析公司），Bristol(布里斯托爾）， PA)中。用干燥氮?dú)饬鞔祾咝∑恐械捻敳靠臻g并且將小瓶用含有灰色氯丁基-異戊二烯隔片 (Miller Analytical Company(米勒分析公司））的錯(cuò)卷曲蓋加帽。N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4，5-c ]喹啉-1 -基]氧基} 丁基)十八酰胺在最終配制品中的濃度是約0.5mg/mL。
[0138] 實(shí)例4。注射配制品：芝麻油中的乙醇(9重量百分比）
[0139] 將N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5_c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺 (0.30g)與乙醇（15.0g)添加至琥珀玻璃瓶中。將瓶子蓋上并且置于超聲波浴中（Branson型 號(hào)8510-DTH)。將該樣品超聲處理直至所有N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹 啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺溶解(約10分鐘）。所得乙醇溶液含有2.0重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺瓶。然后，將3.0g的 含有2.0重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基） 十八酰胺的乙醇溶液轉(zhuǎn)移至含有54.5g芝麻油的琥珀玻璃瓶中。再將添加另外2.4g的乙醇 添加至該瓶中。將瓶子蓋上并且置于實(shí)驗(yàn)室滾軸混合器上。攪拌該配制品直至目測(cè)其變得 透明（攪拌持續(xù)約15分鐘）。在最后一步中，使該配制品穿過(guò)0.2微米聚醚砜(PSA)膜濾器 (EMD Millipore(EMD密理博公司），Billerica(比勒利卡），MA)并且將6mL的配制品收集在 透明玻璃血清瓶(Miller Analytical Company(米勒分析公司），Bristol(布里斯托爾）， PA)中。用干燥氮?dú)饬鞔祾咝∑恐械捻敳靠臻g并且將小瓶用含有灰色氯丁基-異戊二烯隔片 (Miller Analytical Company(米勒分析公司））的錯(cuò)卷曲蓋加帽。N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺在最終配制品中的濃度是約lmg/mL。
[0140] 實(shí)例5。注射配制品：芝麻油中的乙醇(8.5重量百分比）
[0141] 將N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺 (1.22g)與乙醇(60.0g)添加至琥珀玻璃瓶中。將瓶子蓋上并且置于超聲波浴中（Branson型 號(hào)8510-DTH)。將該樣品超聲處理直至所有N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹 啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺溶解(約30分鐘）。所得乙醇溶液含有2.0重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺瓶。然后，將9.0g的 含有2.0重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基） 十八酰胺的乙醇溶液轉(zhuǎn)移至含有60.0g芝麻油的琥珀玻璃瓶中。將瓶子蓋上并且置于實(shí)驗(yàn) 室滾軸混合器上。攪拌該配制品直至目測(cè)其變得透明（攪拌持續(xù)約15分鐘）。使干燥氮?dú)饬?通過(guò)攪拌的配制品上方，以蒸發(fā)3.4g的乙醇。在最后一步中，使該配制品穿過(guò)0.2微米聚醚 砜(PSA)膜濾器(EMD Millipore(EMD密理博公司），Billerica(比勒利卡），MA)并且將6mL的 配制品收集在透明玻璃血清瓶(Miller Analytical Company(米勒分析公司），Bristol(布 里斯托爾），PA)中。用干燥氮?dú)饬鞔祾咝∑恐械捻敳靠臻g并且將小瓶用含有灰色氯丁基-異 戊二稀隔片(Miller Analytical Company(米勒分析公司））的錯(cuò)卷曲蓋加帽。N-(4-{ [4-氨 基-2-丁基-1H-咪唑并[4，5-c ]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺在最終配制品中的濃度是 約3mg/mL。
[0142] 實(shí)例6。注射配制品：芝麻油中的乙醇(9重量百分比）
[0143] 將N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5_c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺 (1.22g)與乙醇(60.0g)添加至琥珀玻璃瓶中。將瓶子蓋上并且置于超聲波浴中（Branson型 號(hào)8510-DTH)。將該樣品超聲處理直至所有N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹 啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺溶解(約30分鐘）。所得乙醇溶液含有2.0重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4，5-c]喹啉-1-基]氧基}丁基)十八酰胺瓶。然后，將25 ? 0g的 含有2.0重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基） 十八酰胺的乙醇溶液轉(zhuǎn)移至含有90.5g芝麻油的琥珀玻璃瓶中。將瓶子蓋上并且置于實(shí)驗(yàn) 室滾軸混合器上。攪拌該配制品直至目測(cè)其變得透明（攪拌持續(xù)約15分鐘）。使干燥氮?dú)饬?通過(guò)攪拌的配制品上方，以蒸發(fā)15.5g的乙醇。在最后一步中，使該配制品穿過(guò)0.2微米聚醚 砜(PSA)膜濾器(EMD Millipore(EMD密理博公司），Billerica(比勒利卡），MA)并且將6mL的 配制品收集在透明玻璃血清瓶(Miller Analytical Company(米勒分析公司），Bristol(布 里斯托爾），PA)中。用干燥氮?dú)饬鞔祾咝∑恐械捻敳靠臻g并且將小瓶用含有灰色氯丁基-異 戊二稀隔片(Miller Analytical Company(米勒分析公司））的錯(cuò)卷曲蓋加帽。N-(4-{ [4-氨 基-2-丁基-1H-咪唑并[4，5-c ]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺在最終配制品中的濃度是 約 5mg/mL 〇
[0144] 實(shí)例7。注射配制品：芝麻油中的乙醇(6.5重量百分比）
[0145] 將N-(4_{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5_c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺 (0.30g)與乙醇（15.3g)添加至琥珀玻璃瓶中。將瓶子蓋上并且置于超聲波浴中（Branson型 號(hào)8510-DTH)。將該樣品超聲處理直至所有N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹 啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺溶解(約10分鐘）。所得乙醇溶液含有1.9重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺瓶。然后，將0.18g的 含有1.9重量百分比的N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基） 十八酰胺的乙醇溶液轉(zhuǎn)移至含有31.7g芝麻油的琥珀玻璃瓶中。再將添加另外2.Og的乙醇 添加至該瓶中。將瓶子蓋上并且置于實(shí)驗(yàn)室滾軸混合器上。攪拌該配制品直至目測(cè)其變得 透明（攪拌持續(xù)約15分鐘）。在最后一步中，使該配制品穿過(guò)0.2微米聚醚砜(PSA)膜濾器 (EMD Millipore(EMD密理博公司），Billerica(比勒利卡），MA)并且將6mL的配制品收集在 透明玻璃血清瓶(Miller Analytical Company(米勒分析公司），Bristol(布里斯托爾）， PA)中。用干燥氮?dú)饬鞔祾咝∑恐械捻敳靠臻g并且將小瓶用含有灰色氯丁基-異戊二烯隔片 (Miller Analytical Company(米勒分析公司））的錯(cuò)卷曲蓋加帽。N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺在最終配制品中的濃度是約0.1mg/mL。
[0146]實(shí)例8。注射配制品：芝麻油中的乙醇(7.2重量百分比）
[0147]通過(guò)將3.9g的乙醇與50 .Og的芝麻油添加至琥I自瓶中，隨后輕輕攪拌來(lái)制備在芝 麻油中的乙醇（7.2重量百分比）溶液。然后，將^(4-{[4-氨基-2-丁基-111-咪唑并[4,5-(3] 喹啉-1-基]氧基}丁基)十八酰胺（53.9mg)添加至乙醇/芝麻油溶液中。將瓶子蓋上并且置 于超聲波浴中（Branson型號(hào)8510-DTH)。將該樣品超聲處理30分鐘，并且然后使用振動(dòng)臺(tái) (Erbach Corporation(爾巴旭公司），Ann Arbor(安阿伯），MI)進(jìn)一步振蕩，直至所有N_(4_ {[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺全部溶解（約20小 時(shí)）。使所得溶液穿過(guò)〇 . 2微米聚醚砜（PSA)膜濾器（EMD Mi 11 ipore (EMD密理博公司）， Billerica(比勒利卡），MA)并且收集在玻璃瓶中。用干燥氮?dú)饬鞔祾咂恐械捻敳靠臻g并且 給瓶加帽。N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺在 最終配制品中的濃度是約lmg/g。
[0148] 實(shí)例9。另外的注射配制品
[0149] 使用實(shí)例1-7的通用程序來(lái)制備具有不同水平的乙醇濃度（乙醇在該配制品中的 重量百分比）、N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺 濃度(配制品的mg/mL)、以及BHA濃度(ppm)的多種配制品。對(duì)于配制品9-H到9-J，使用脫氧 乙醇和芝麻油。配制品記錄于表1中。
[0150]通過(guò)在最終過(guò)濾步驟之前立即進(jìn)行乙醇蒸發(fā)步驟降低配制品的乙醇含量來(lái)制備 配制品。通過(guò)使干燥氮?dú)饬魍ㄟ^(guò)攪拌的配制品上方來(lái)完成配制品中的乙醇的蒸發(fā)。
[0151]表1.
[0152]
[0153] 實(shí)例10。瘤內(nèi)（IT)注射
[0154] 所有的程序都是依照經(jīng)過(guò)批準(zhǔn)的研究機(jī)構(gòu)動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)(IACUC)方案進(jìn) 行的。將動(dòng)物飼養(yǎng)在設(shè)施中，該設(shè)施得到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)護(hù)評(píng)價(jià)認(rèn)定協(xié)會(huì)(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care)(AAALAC,Frederick,MD) 的認(rèn)可，C57BL/6J-Tyr阿博諾小鼠（Albino mice)，雌性，15-20克獲得自Jackson Labs (杰 克森實(shí)驗(yàn)室），巴爾港，緬因州。同系B16. OVA黑色素瘤細(xì)胞系獲得自Wynette Dietz(溫尼特 迪茨)博士，明尼蘇達(dá)大學(xué)。將細(xì)胞系在3M進(jìn)行表征并且確定表達(dá)OVA。
[0155] 在形成荷瘤小鼠之前，在密封盒中用1%異氟烷麻醉動(dòng)物，并且然后經(jīng)由面罩給予 1%異氟烷而保持在麻醉狀態(tài)下。給予每只小鼠獨(dú)特的描述信息(在尾上帶有獨(dú)特的刺青數(shù) 字）。對(duì)右脅進(jìn)行剃毛，并且將O.lmL DPBS中的5x 105B16.0VA黑色素瘤細(xì)胞經(jīng)皮下植入。
[0156] 腫瘤植入7天后，將小鼠隨機(jī)分成3組(組A-C)，每組20只小鼠。在此時(shí)，小鼠平均的 腫瘤尺寸大約為20mm 2。基于由GraphPad軟件公司（拉荷亞，CA)開(kāi)發(fā)的ROUT統(tǒng)計(jì)法，將基于 腫瘤尺寸為離群值的動(dòng)物鑒定出并且排除出研究。組A動(dòng)物接受瘤內(nèi)注射0.05mL實(shí)例3的配 制品。組B動(dòng)物接受注射0.05mL實(shí)例3的配制品，該配制品經(jīng)皮下（SC)給予至與植入的腫瘤 相對(duì)脅部區(qū)域（即左脅）。組C動(dòng)物接受瘤內(nèi)注射0.05mL運(yùn)載體對(duì)照配制品。運(yùn)載體對(duì)照配制 品與實(shí)例3的配制品相同，除了在該配制品中不包括N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4， 5-c]喹啉-1-基]氧基}丁基)十八酰胺。對(duì)于組A-C的所有配制品，使用具有26計(jì)量規(guī)格注射 針的0.5mL注射器進(jìn)行給藥。在腫瘤植入7天和14天后，向所有三組注射對(duì)應(yīng)的配制品。對(duì)于 組A和C，瘤內(nèi)注射給藥至腫瘤中央。在注射之前，經(jīng)由面罩用1%異氟烷將動(dòng)物麻醉。對(duì)于每 只動(dòng)物，使用校準(zhǔn)的數(shù)顯卡尺測(cè)量腫瘤尺寸。所有腫瘤都是可觸知而且可見(jiàn)的。如果腫瘤尺 寸測(cè)定為200mm 2或更大，將動(dòng)物安樂(lè)死。在腫瘤植入后監(jiān)視動(dòng)物90天。對(duì)于每只動(dòng)物，腫瘤 尺寸數(shù)據(jù)報(bào)告于表2A-C中，而百分比存活數(shù)據(jù)報(bào)告于表3中。組A以天數(shù)計(jì)的中位存活期為 34天，組B為22天，而組C為21.5天。使用Prism 5.04軟件(GraphPad軟件公司）分析動(dòng)物存活 數(shù)據(jù)。通過(guò)對(duì)數(shù)秩（Mantel-Cox)檢驗(yàn)，隨后通過(guò)使用格漢-畢思樓-威爾克森（661^11-1^681〇￥-胃；[1(301011)測(cè)試進(jìn)行成對(duì)比較，將卡普蘭-邁耶(1^。1311-]\16161')存活曲線進(jìn)行比 較。組A對(duì)比組B和C動(dòng)物的存活優(yōu)勢(shì)被確定為統(tǒng)計(jì)學(xué)上有義意的(P值〈0.0001)。
[0157] 實(shí)例 11
[0158] 使用實(shí)例1-7的通用程序來(lái)制備具有固定水平的乙醇濃度（在該配制品中 7 ? 5wt_%的乙醇）、在0 ? lmg/mL至2 ? 5mg/mL范圍內(nèi)不同水平的N-(4_{ [4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基）十八酰胺濃度、以及BHA濃度（300ppm)的多種配制 品。對(duì)于配制品11-A到11-E，使用脫氧乙醇和芝麻油。配制品記錄于表4中。
[0159] 通過(guò)在最終過(guò)濾步驟之前立即進(jìn)行乙醇蒸發(fā)步驟降低配制品的乙醇含量來(lái)制備 配制品。通過(guò)使干燥氮?dú)饬魍ㄟ^(guò)攪拌的配制品上方來(lái)完成配制品中的乙醇的蒸發(fā)。
[0160] 表4.
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種適合于注射的藥物配制品，該藥物配制品包含： 芝麻油； 乙醇；以及 具有以下化學(xué)式的免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑化合物：其中： X是具有多至8個(gè)碳原子的亞烷基，這些碳原子任選地被-ο-間隔或封端； R2是氫、烷基、烷氧基烷撐基、烷氨基烷撐基、或羥基烷撐基； Y 是-c(o)-或-S(0)2_; Ri是具有11-23個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂肪族基團(tuán)，任選地包括一個(gè)或多個(gè)不飽和的 碳-碳鍵;并且 R是氫、鹵素或羥基； 或其藥學(xué)上可接受的鹽。2. 如權(quán)利要求1所述的配制品，其中該乙醇以從約lwt- %至約9wt- %的濃度存在。3. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中該乙醇以從約3wt-%至約8wt-%的濃 度存在。4. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中該乙醇以從約6.5wt-%至約7.5wt-% 的濃度存在。5. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中該免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑化合物以從約 0 · lmg/mL至約10mg/mL的濃度存在。6. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中該芝麻油的羥值小于或等于2。7. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中該芝麻油的酸值小于或等于0.1。8. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中該芝麻油的過(guò)氧化值小于或等于1。9. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中該芝麻油的總氮含量小于或等于 lppm〇10. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中該芝麻油包含不多于0.05wt-%的芝 麻素以及不多于〇.〇5wt-%的芝麻酸林。11. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中R2是甲基、乙基、丙基、丁基、乙氧基甲 基、甲氧基甲基、乙基氨基甲基、或2-甲氧基乙基。12. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中Y是-C(0)-。13. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中烷基。14. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中辦是&5-(：23烷基。15. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中1?1是&5-(：17烷基。16. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中辦是&7烷基。17. 如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的配制品，其中該免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑化合物包含N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧基} 丁基)十八酰胺，或其藥學(xué)上可接受 的鹽。18. -種遞送如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的藥物配制品的方法，該方法包括將該配 制品注射進(jìn)入受試者。19. 如權(quán)利要求18所述的方法，其中將該配制品注射進(jìn)入腫瘤塊中。20. 如權(quán)利要求18所述的方法，其中將該配制品注射進(jìn)入疣中。21. 如權(quán)利要求18所述的方法，其中將該配制品注射進(jìn)入肥厚性瘢痕組織中。22. -種在受試者中治療疾病的方法，該方法包括將如權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)所述的 配制品注射進(jìn)入需要治療該疾病的受試者。23. 如權(quán)利要求22所述的方法，其中該疾病是腫瘤性疾病。24. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中將該配制品注射進(jìn)入腫瘤塊中。25. 如權(quán)利要求23-24中任一項(xiàng)所述的方法，其中該疾病選自頭或頸部癌、乳腺癌、淋巴 瘤、黑色素瘤、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤以及膀胱癌。26. 如權(quán)利要求22所述的方法，其中該疾病是導(dǎo)致疣的病毒性疾病。27. 如權(quán)利要求26所述的方法，其中將該配制品注射進(jìn)入疣中。28. -種制備如權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)所述的配制品的方法，該方法包括提供 芝麻油； 乙醇；以及 具有以下化學(xué)式的免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑化合物： 其中：X是具有多至8個(gè)碳原子的亞烷基，這些碳原子任選地被-0-間隔或封端； R2是氫、烷基、烷氧基烷撐基、烷氨基烷撐基、或羥基烷撐基； Y 是-c(o)-或-S(0)2_; Ri是具有11-23個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂肪族基團(tuán)，任選地包括一個(gè)或多個(gè)不飽和的 碳-碳鍵;并且 R是氫、鹵素或羥基； 或其藥學(xué)上可接受的鹽； 將該IRM化合物與該乙醇組合，以形成乙醇-1RM化合物溶液;并且 將該乙醇-IRM化合物溶液與該芝麻油組合，以形成芝麻油-乙醇-IRM化合物配制品。29. 如權(quán)利要求28所述的方法，該方法進(jìn)一步包括以下步驟:從該芝麻油-乙醇-IRM化 合物配制品中蒸發(fā)一部分該乙醇。30. 如權(quán)利要求1所述的配制品，其中該配制品包括： 芝麻油； 7.5wt-% 乙醇； 300ppm BHA;以及 從0.1mg/mL至約2.5mg/mL N-(4-{[4-氨基-2-丁基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]氧 基} 丁基)十八酰胺。
【文檔編號(hào)】C07D471/04GK105873587SQ201480058605
【公開(kāi)日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2014年10月30日
【發(fā)明人】J·波爾林, J·埃爾夫克羅格, J·瓦西拉科斯, J·T·卡佩基, K·E·約翰遜
【申請(qǐng)人】3M創(chuàng)新有限公司