專利名稱：：新穎的5-取代的7-氨基-[1,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：'本發(fā)明-坡露了新穎的5-取代的7-氨基-[l,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶衍生物以及它們的制備方法，含有它們的藥物組合物和它們在治療中的用途。
背景技術(shù)：
：趨化因子在多種疾病和障礙的免疫和炎性反應(yīng)中發(fā)揮重要作用，這些疾病和障礙包括哮喘、動脈粥樣硬化(atherosclerosis)和變應(yīng)性疾病，以及自身免疫性病變?nèi)珙愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性硬化。這些被分泌出的小分子屬于不斷增加的8-14kDa蛋白超家族，該家族特征為保守的半胱氨酸基序。目前，趨化因子超家族包括顯示出特征性結(jié)構(gòu)基序的四類家族，C-X-C、C-C、c-xrc和xc家族。c陽x-c和c-c家族具有系列相似性，并且它們相互的區(qū)別在于半胱氨酸殘基NH-近端對之間的單個氨基酸插入。C-X3-C家族與其它兩個家族的區(qū)別在于半胱氨酸殘基NH-近端對之間的三個氨基酸插入。相反，XC家族成員缺乏前兩個半胱氨酸殘基之一。C-X-C趨化因子包括嗜中性粒細(xì)胞的幾種強效的化學(xué)引誘物和活化劑，如白介素-8(IL-8)和嗜中性粒細(xì)胞活化肽2(NAP-2)。C-C趨化因子包括單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞的強效化學(xué)引誘物。實例包括人單核細(xì)胞趨化蛋白1-3(MCP-1,MCP-2和MCP-3)，RANTES(調(diào)節(jié)活化、正常T細(xì)胞表達和分泌)、嗜酸細(xì)胞活化趨化因子(eotaxin)以及巨噬細(xì)胞炎性蛋白la和ip(MIP-la和MIP-1(3)。C-X3-C趨化因子(也稱作fmctalkine)既是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的強效化學(xué)引誘物和活化劑，也是單核細(xì)胞、T纟田月包、NK細(xì)胞和肥大細(xì)胞的強效化學(xué)引誘物和活化劑。研究已經(jīng)表明趨化因子的作用是通過G蛋白-偶聯(lián)受體亞族介導(dǎo)的，其中這些受體稱為CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10和CCR11(對C-C家族而言)；CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4和CXCR5(對C-X-C家族而言)和CX3CR1(對C-X3-C家族而言)。由于調(diào)節(jié)這些受體的藥物可用于治療上述提及的那些疾病和障礙，因此這些受體表現(xiàn)了較好的藥物開發(fā)目標(biāo)。WO00/09511公開了某些2-取代的-4-氨基卩塞唑并嘧啶衍生物，它們可用作與C-X-C和C-C趨化因子家族相關(guān)的受體的拮抗劑，特別是用作CXCR2受體的拮抗劑。本發(fā)明部分涉及落入WO00/09511通式范圍、但未加以明確示例i兌明的一組化合物。當(dāng)與WO00/09511中公開的實施例進行比較時，本發(fā)明化合物出人意料地顯示出作為CX3CR1受體拮抗劑的有用特性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供式(I)化合物或其可藥用鹽其中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>W表示CH3或CH3CH2;R2表示H、2-F、2-Cl、3-F、3-OCH3、3-CN、3-CF3、3-CONH2或3-S02CHR3表示H或CH3;R4表示H或CH3;和R5表示H;或者，當(dāng)R4是CH3時，R5表示H或F。合物所有的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、外消旋體、互變異構(gòu)體及其混合物都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。在一實施方案中，R^表示CH3。在另一實施方案中，R^表示CH3CH2。在一實施方案中，R2表示H、2-F、3國F、2-Cl、3-OCH3、3-CN或3-CF3。在另一實施方案中，W表示H、2-F或3-CN。在另一實施方案中，112表示H。在另一實施方案中，W表示2-F。在另一實施方案中，W表示3-CN。。應(yīng)理解為式(I)化在一實施方案中，RS表示H。在一實施方案中，114表示013。在另一實施方案中，W表示H。在一實施方案中，RS表示H。在一實施方案中，R"表示CH3并且RS表示F。在一實施方案中，114表示CH3并且RS表示H。在一實施方案中，R'表示CH3;R2表示H、2-F、3-F、2-Cl、3-OCH3、3-CN或3-CF3;R表示H;R4表示H或CH3;和R5表示H。在另一實施方案中，R'表示CH3;W表示H、2-F或3-CN;R表示H;R4表示HCH3;和R5表示H。在另一實施方案中，R'表示CH3;R2表示H、2-F或3-CN;r3表示H;R4表示H;和R5表示H。在另一實施方案中，R'表示CH3;R表示H、2-F或3-CN;R表示H;R4表示CH3;和R5表示H或F。在另一實施方案中，R'表示CH3;R2表示H;R表示H;114表示CH3;和R5表示H。式①的具體化合物包括(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(15>1-(2-氟苯基)乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-^]嘧啶-7-基)氨基]戊烷-1-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-{[(15)-1-(2-氟苯基)乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇；(211)-2-({2-氨基-5-[(1-苯基乙基)硫基][1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基}氨基)-4-曱基戊烷-l-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-([(lW)-l-苯基乙基]硫基)[l,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇；3-{(15>1-[(2-氨基-7-{[(1"-1-(羥曱基)丁基]氨基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-5-基)硫基]乙基}苯曱腈；(2R)-2-{[2-氨基-5-({(15>1-[3-(曱磺酰基)苯基]乙基}硫基)[1，3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基]氨基卜4-曱基戊烷-1-醇；(2尺)-2-[(2-氨基-5-{[(15>1-苯基乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]戊烷-l-醇；3-{(15>1-[(2-氨基-7-{[(1"-1-(羥甲基)-3-曱基丁基]氨基}[1,3]噻口坐并嘧啶-5-基)硫基]乙基}苯曱腈；(2R)-2-({2-氨基-5-[(1-苯基丙基)硫基][1，3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基}氨基)-4-曱基戊烷-l-醇；3-{1-[(2-氨基-7-{[(1"-1-(羥曱基)-3-曱基丁基]氨基}[1，3]噻唑并[4,5-《嘧啶-5-基)硫基]乙基}苯甲酰胺；(211)-2-{[2-氨基-5-({1-[3-(三氟曱基)苯基]乙基}硫基)[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基]氨基}-4-曱基戊烷-1-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-[(l-苯基乙基)硫基][l,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基}(曱基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-([l-(2-氯苯基)乙基]硫基丌l,3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-{[1-(3-曱氧基苯基)乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇；(211)-2-[(2-氨基-5-{[(15>1-苯基乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4，5-,密啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇；；(2R)-2-[(2-氨基-5-([(lQ-l-苯基乙基]硫基)[l,3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-氟-4-曱基戊烷-1-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-([(l^-l-(2-氟苯基)乙基]硫基ni,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-氟-4-曱基戊烷-1-醇；(211)-2-[(2-氨基-5-{[(15>1-(3-氟苯基)乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊烷-1-醇；或其可藥用鹽。當(dāng)與WO00/0951中公開的化合物比較時，本發(fā)明化合物其特征在于存在位于噻唑并吡啶環(huán)系5-位上的支鏈硫千基。也就是說，本發(fā)明化合物包括不是氫的R'基團。根據(jù)本發(fā)明，我們還提供了用于制備式(I)化合物、或其可藥用鹽的方法，該方法包4舌a)使式(II)化合物與式(III)化合物反應(yīng)，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>(II)其中R3、R4和RS如式(I)中所定義；其中R'和R"如式(I)中所定義，并且匸表示離去基團；或者b)使式(IV)化合物與式(V)化合物反應(yīng)，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>(IV)其中1^和112如式(1)中所定義，并且l7表示離去基團；(V)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>其中R3、R"和RS如式(I)中所定義；以及如果需要的話，將所得到的式(I)化合物或其其它鹽轉(zhuǎn)化為其可藥用鹽；或者將所得到的式(I)化合物轉(zhuǎn)化為其它式(I)化合物；以及如果需要的話，將所得到的式(I)化合物轉(zhuǎn)化為其旋光異構(gòu)體。在方法(a)中，在適宜的有機溶劑例如二甲亞砜(DMSO)、乙腈或l-曱基-2-他咯烷酮(NMP)中偶聯(lián)反應(yīng)物(II)和(III)。反應(yīng)任選在加入的有機或無機堿例如三乙胺、N,N-二異丙基乙基胺(DIPEA)或氫化鈉存在下進行。反應(yīng)任選地在溫和還原劑例如硼氫化鈉存在下進行。反應(yīng)在適宜的溫度，通常是室溫至溶劑沸點之間的溫度進行。反應(yīng)通常持續(xù)大約1小時至1周的時間，或者直到分析顯示目標(biāo)產(chǎn)物的形成結(jié)束。在方法(b)中，在合適的有機溶劑例如四氫呋喃、乙腈、二曱基亞石風(fēng)或1畫曱基-2-吡咯烷酮中偶聯(lián)反應(yīng)物(IV)和(V)。該反應(yīng)任選在添加的堿存在下進行。該堿可以是有機堿，例如三乙胺或N，N-二異丙基乙基胺，或者是無機堿，例如碳酸鉀。該反應(yīng)在合適的溫度，通常在室溫和溶劑沸點之間的溫度進行，但是如果使用密封的反應(yīng)器，則任選在較高溫度進行。該反應(yīng)一般持續(xù)1小時到1周左右的時間，或者直到分析顯示所要求的產(chǎn)物形成完畢。合適的離去基團匸和I^是卣素，特別是氯或溴。在一實施方案中，L1和L2分別表示氯。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，在上述方法中可能希望或需要對胺、羥基或其它潛在的反應(yīng)基團進行保護。一般來說，適宜的保護基團以及添加和除去這類基團的詳細(xì)情況是本領(lǐng)域眾所周知的。參見例如"ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis",第3版(1999)，Greene和Wuts著。本發(fā)明包括鹽形式的式(I)化合物。適宜的鹽包括與有機或無機酸或者有機或無機堿形成的鹽。這類鹽通常應(yīng)該是可藥用的，但是非藥用酸或堿的鹽可以用于制備和純化本發(fā)明所述的化合物。式(I)化合物的鹽可以通過將游離化合物或其鹽、對映異構(gòu)體或外消旋物與1或更多當(dāng)量的適宜酸或石威反應(yīng)形成。該反應(yīng)可以在所述鹽不;容于其中的溶劑或溶媒或者所述鹽溶于其中的溶劑(例如水、二。惡烷、乙醇、四氫呋喃或乙醚或者溶劑的混合物)中進行，這些溶劑可以真空除去或凍干除去。該反應(yīng)還可以是復(fù)分解反應(yīng)或者可在離子交換樹脂上進行。式(II)化合物或者從WO00/09511已知，或者可以j吏用對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言非常明顯的已知方法進行制備。式(IV)化合物可以使用與WO00/09511中所公開方法類似的方法進行制備，或者使用對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言非常明顯的其它已知方法進行制備。式(ni)和(v)化合物或者從市場上可買到，或者在文獻中已知，或者可以使用對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言非常明顯的已知方法進行制備。式(n)、(ni)、(iv)和(v)化合物的合適具體制備方法詳見本申請實施例例如，式(II)化合物，以及由其得到的式(I)化合物，可以如流程l所示進行制備中間體化合物可以按原樣使用或者以受保護形式使用。適宜的保護基團以及添加和除去這類基團的詳細(xì)情況是本領(lǐng)域眾所周知的。參見例如"ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis",第3版(1999)，Greene和Wuts著。本發(fā)明化合物及其中間體可以由其反應(yīng)混合物中分離，如果需要的話，進一步通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)純化。式(I)化合物可以以立體異構(gòu)形式存在。因此，所有對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、外消旋物及其混合物均落入本發(fā)明范圍內(nèi)?？梢允褂贸Ｒ?guī)技術(shù)，例如分步結(jié)晶或HPLC,對所述化合物的立體異構(gòu)混合物進行分離，從而分離出各種旋光異構(gòu)體。或者，各種旋光異構(gòu)體可以直接使用具有旋光性的起始原料制備。式(I)化合物含有兩個產(chǎn)生立體異構(gòu)的中心，因此可以以式(Ia)-(Id)所示的四種獨立的立體異構(gòu)形式存在。方案1所有這些立體異構(gòu)體及其混合物均落入本發(fā)明范圍內(nèi)。在一實施方案中，式(I)化合物具有式(Ia)所示的立體化學(xué)。在另一實施方案中，式(I)化合物具有式(Ib)所示的立體化學(xué)。中間體化合物也可以以立體異構(gòu)形式存在，因而可用作純化的對映異構(gòu)體、外消旋物或其混合物。因為式(I)化合物或其可藥用鹽具有作為CX3CR1受體拮抗劑的藥理活性，所以它們具有效用。特別地，當(dāng)與WO00/09511中具體示例的化合物相比較時，本發(fā)明的式(I)化合物抑制CX3CR1受體的效力顯著提高和/或抑制CXCR2受體的效力降低。本發(fā)明優(yōu)選的化合物同時顯示出抑制CX3CR1的提高效力和抑制CXCR2的降低效力。在一方面，本發(fā)明提供了式(I)化合物或其可藥用鹽，其用作藥物。在另一方面，本發(fā)明提供了式(I)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防下述疾病或病癥的藥物中的用途，在所述疾病或病癥中，對CXgCRl受體的拮抗作用是有益的。在另一方面，本發(fā)明提供了式(I)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防神經(jīng)變性疾病(neurodegenerativedisorders)、脫髓鞘疾病(demyelinatingdisease)、'G月S血管動月永辣弓才羊石更"fb癥(cardio-andcerebrovascularatheroscleroticdisorders)、夕卜周動月永疾病(peripheralarterydisease)、類風(fēng)濕寸生關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis)、肺部疾病(pulmonarydiseases)例如COPD、嗜喘(asthma)或疼痛(pain)的藥物中的用途。在另一方面，本發(fā)明提供了式(I)化合物或其可藥用鹽在治療或預(yù)防多發(fā)性硬化(MS)的藥物中的用途。在另一方面，本發(fā)明提供了式(I)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防動脈粥樣硬化的藥物中的用途，所述藥物通過預(yù)防和/或減少新動月永粥樣硬化損傷或斑塊形成和/或通過預(yù)防或減緩現(xiàn)有損傷和斑塊進展來治療或預(yù)防動脈粥樣^^化。在另一方面，本發(fā)明提供了式(I)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防動脈粥樣硬化的藥物中的用途，所述藥物通過改變斑塊組成以降^f氐斑塊破裂和動脈粥樣血栓形成事件(atherothromboticevent)的危險來治療或預(yù)防動脈粥樣硬化。本發(fā)明還提供了治療下述疾病或病癥或者降低所述疾病或病癥危險的方法，在所述疾病或病癥中，對CX3CR1受體的拮抗作用是有益的，所述方法包括向患有或面臨所述疾病或病癥危險的人給藥治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。本發(fā)明還提供了治療神經(jīng)變性疾病、脫髓鞘疾病、心腦血管動脈粥才羊硬化癥、外周動脈疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肺部疾病例如COPD、哮喘或疼痛或者降^f氐所述疾病或病癥危險的方法，包括向患有或面臨所述疾病或病癥危險的人給藥治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。本發(fā)明還提供了治療多發(fā)性硬化(MS)或降低其危險的方法，包括向患有或面臨所述疾病或病癥危險的人給藥治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。過預(yù)防和/或減少新動脈粥樣硬化損傷或斑塊形成和/或通過預(yù)防或減緩現(xiàn)有損傷和斑塊進展來治療動脈粥樣硬化或降低其危險，所述方法包括向患有或面臨所述疾病或病癥危險的人給藥治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。本發(fā)明還提供了治療動脈粥樣硬化或降低其危險的方法，所述方法通過改變斑塊組成以降低斑塊破裂和動脈粥樣血栓形成事件的危險來治療動脈粥樣硬化或降低其危險，所述方法包括向患有或面臨所述疾病或病癥危險的人給藥治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。在另一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包括治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽，以及混合有藥用輔料、稀釋劑或載體，所述藥物組合物用于治療或預(yù)防下述疾病或病癥，在所述疾病或病癥中，對CX3CR1受體的拮抗作用是有益的。在另一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包括治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽，以及混合有藥用輔料、稀釋劑或載體，所述藥物組合物用于治療或預(yù)防神經(jīng)變性疾病、脫髓鞘疾病、心腦血管動脈粥才羊石更化癥、外周動脈疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、COPD、哮喘或疼痛。在另一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包括治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽，以及混合有藥用輔料、稀釋劑或載體，所述藥物組合物用于治療或預(yù)防多發(fā)性硬化。在另一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包括治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽，以及混合有藥用輔料、稀釋劑或載體，所述藥物組合物通過預(yù)防和/或減少新動脈粥樣硬化損傷或斑塊形成和/或通過預(yù)防或減緩現(xiàn)有損傷和斑塊進展來治療動脈粥樣硬化。在另一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包括治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽，以及混合有藥用輔料、稀釋劑或載體，所述藥物組合物通過改變斑塊組成以降低斑塊破裂和動脈粥樣血栓形成事件的危險來治療動脈粥樣硬化。式(I)化合物或其可藥用鹽適用于治療或預(yù)防需要調(diào)節(jié)CX3CR1受體活性的疾病或病癥。具體地，所述化合物適用于治療包括人在內(nèi)的哺乳動物的神經(jīng)變性疾病或脫髓鞘疾病。更具體地說，所述化合物適用于治療多發(fā)性硬化。該化合物還適用于治療疼痛、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、心腦血管動脈粥樣硬化癥、夕卜周動脈疾病和月巿動月永高壓(pulmonaryhypertension)?？删唧w提及的病癥有神經(jīng)變性疾病和癡呆障礙，例如阿爾茨海默氏病，肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化和其它運動神經(jīng)元疾病，Creutzfeldt-Jacob，s疾病和其它朊病毒病，HIV腦病、亨廷頓氏病、額顳癡呆、盧《尹體癡呆和血管性癡呆；多發(fā)性神經(jīng)病，例如吉蘭-巴雷綜合征(Guillain-Ban^syndrome),'l"曼性炎癥性脫髓鞘多發(fā)性神經(jīng)根神經(jīng)病(chronicinflammatorydemyelinatingpolyradiculoneuropathy),多病灶運動神經(jīng)病和神經(jīng)叢??；CNS脫髓鞘疾病，例如急性彌散性/出血性腦脊髓炎和亞急性硬化性全腦炎；神經(jīng)肌肉障礙，例如重癥肌無力和蘭伯特-伊特綜合征(Lambert-Eatonsyndrome);脊柱障石尋，例如熱帶痙攣性輕截癱和僵人綜合征；瘤外綜合征，例如小腦變性和腦脊髓炎；創(chuàng)傷性腦損傷；偏頭痛；癌癥；同種異體移植物排斥；全身性;更化；病毒感染；寄生蟲轉(zhuǎn)移疾病，例如瘧疾；牙周??；心肌梗塞；中風(fēng)；冠心病；缺血性心臟病；以及再狹窄；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；肺部疾病例如COPD;哮喘或疼痛。本發(fā)明化合物還適用于治療動脈粥樣硬化，其通過預(yù)防和/或減少新動脈粥樣硬化損傷或斑塊形成和/或通過預(yù)防或減緩現(xiàn)有損傷和斑塊進展來治療動"永粥樣;更化。本發(fā)明化合物還適用于治療動脈粥樣硬化，其通過改變斑塊組成以降低斑塊^破裂和動脈粥樣血栓形成事件的危險來治療動脈粥樣硬化。本發(fā)明化合物還適用于治療炎癥性腸病(IBD)，例如克羅恩氏病和潰瘍性結(jié)腸炎，其通過誘導(dǎo)炎癥性腸病(IBD)緩和和/或保持緩和而其起到治療作用。預(yù)防被認(rèn)為與患有所述疾病或病癥的先前發(fā)作的人員的治療特別有關(guān)，或被認(rèn)為與處于所述疾病或病癥的增加危險之中的人員的治療特別有關(guān)。處于形成具體疾病或病癥的危險之中的人員，通常包括具有該疾病或病癥的家族史的那些人員，或已經(jīng)通過遺傳學(xué)試l全或篩選確定為特別易患該疾病或病癥的那些人員。對于上述治療適應(yīng)癥，給藥劑量自然可隨所使用的化合物、給藥方式和期望的治療變化而變化。然而，當(dāng)化合物按照1mg-2000mg/天固體形式的劑量給藥時，通常會獲得滿意的結(jié)果。式(I)化合物或其可藥用衍生物可以單獨使用，也可以以適宜的藥物組合物形式使用，其中所述化合物或衍生物與藥用輔料、稀釋劑或載體相混合。給藥可以是但不限于腸內(nèi)(包括口服、舌下或直腸)、鼻內(nèi)、靜脈內(nèi)、局部或其它腸胃外途徑。選擇和制備適宜藥物組合物的常規(guī)步驟描述于例如"Pharmaceuticals-TheScienceofDosageFormDesigns",M.E.Aulton,ChurchillLivingstone,1988中。藥物組合物優(yōu)選含有低于80%、更優(yōu)選^氐于50%的式(1)化合物或其可藥用鹽。本發(fā)明還提供了制備這類藥物組合物的方法，包括將這些成分進行混合。本發(fā)明進一步涉及聯(lián)合療法，其中將式(I)化合物或其可藥用鹽或者含有式(I)化合物的藥物組合物或制劑與用于心腦血管動脈粥樣硬化癥和外周動脈疾病中任何一種的療法和/或藥劑同時或順序給藥。具體而言，式(I)化合物或其可藥用鹽可以與一種或多種選自下述的化合物聯(lián)用給藥.1)抗炎劑，例如a)NSAIDs(例如乙酰水楊酸、布洛芬、萘普生、氟比洛芬、雙氯芬酸、吲哚美辛)；b)白細(xì)胞三烯合成抑制劑(5-LO抑制劑，例如AZD4407、棄留通、licofelone、CJ13610、CJ13454;FLAP抑制劑,例如BAY-Y-1015、DG-031、MK591、MK886、A81834;LTA4水解酶抑制劑,例如SC56938、SC57461A);c)白細(xì)胞三烯受體拮抗劑(例如CP195543、阿美盧班(amelubant)、LY293111、扎魯司特(accolade)、MK571);2)抗高血壓劑，例如a)(3-阻斷劑(例如美托洛爾、阿替洛爾、索他洛爾)；b)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(例如卡托普利、雷米普利、喹那普利、依那普利)；c)4丐通道阻斷劑(例如維拉帕米、地耳硫卓、非洛地平、氨氯地平)；d)血管緊張素II受體拮抗劑(例如依貝沙坦、坎地沙坦、替米沙坦、氯沙坦)；3^元;疑血劑，例i口a)凝血酶抑制劑(例如美拉加群(ximelagatran))、肝素、Xa因子抑制劑；b)血小板凝聚抑制劑(例如氯吡格雷(clopidrogrel)、噻氯匹定、prasugel、AZ4160);4)脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)劑，例如a)胰島素致敏劑例如PPAR激動劑(例如吡格列酮、羅格列酮、Galida、muraglitazaar、gefemrozil、非諾貝特)；b)HMG-CoA還原酶抑制劑、他汀類(例如辛伐他汀、普伐他汀、阿伐他汀、羅蘇伐他汀、氟伐他汀、匹伐他汀)；c)膽固醇吸收抑制劑(例如依澤替米貝)；d)IBAT抑制劑(例如AZD-7806);e)LXR激動劑(例如GW-683965A、T畫0901317);f)FXR受體調(diào)節(jié)劑；g)磷脂酶抑制劑；5)抗心絞痛藥，例如硝酸酯(鹽)和亞硝酸酯(鹽)；6)氧化應(yīng)激調(diào)節(jié)劑，例如抗氧化劑(普羅布考)、髓過氧化酶抑制劑。通過下面的實施例對本發(fā)明進行示例性但非限制性說明一般方法使用的所有溶劑都是分析純級的，商購得到的無水溶劑均是反應(yīng)中常規(guī)使用的溶劑。反應(yīng)通常在氮氣或氬氣的惰性氣氛下進行?；蛘哐b備有Z-梯度的60)il二元反流探針(dualinverseflowprobe)的BrukerAvance400NMR光譜儀、或者裝備有Z-梯度的4-核:探針的BrukerDPX400NMR光鐠儀記錄400MHz(質(zhì)子)的'H和100MHz(石灰-13)的"CNMR光譜。600MHz'HNMR光譜在裝備有Z-梯度的5mmBBI4笨針頭的Brukerav600NMR光鐠儀上記錄。300MHzNMR光譜在裝備有5mmBBI探針頭的VarianGemini300NMR上記錄。除非實施例中具體說明，光i普在400MHz(質(zhì)子)和100MHz(碳-13)下記錄。使用下面的參比信號dmso-d6的中間線S2.50Ch),539.51(13C);CD30D的中間線S3.31(1H)或349,15(13C);丙酮-42.04(1H),206,5(13C);以及CDC13S7.26('H),CDC13的中間線577.16(13C)(除非另外指出)。對映體過量通過GC在CyclodexB柱上測定(恒溫洗脫100。C)。質(zhì)i普在由Alliance2795(LC)和ZQ單四極質(zhì)譜儀組成的WatersLCMS上記錄。質(zhì)語儀裝備有電噴射離子源(ESI),在陽性或陰性離子模式下操作。毛細(xì)管電壓為3kV,質(zhì)譜儀在m/z100-700之間掃描，掃描時間為0.3或0.8s。分離在WatersX-TerraMS,C8-柱，(3.5|im,50或100mmx2.1mmi.d.)或者ScantecLab'sACE3AQ柱(IOOmmx2.1mmi.d.)上進行。柱溫度i殳定為40。C。使用中性或酸性流動相體系施加線性梯度，在0%-100%有機相中運行4-5分鐘，流速0.3ml/min。中性流動相體系乙腈/[10mMNH4OAc(>K溶液)/MeCN(95:5)]、或[10mMNH4OAc(水溶液)/MeCN(1/9)]/[10mMNH4OAc(水溶液)/MeCN(9/1)]。酸性流動相體系[133mMHCOOH(水溶液)/MeCN(5/95)]/[8mMHCOOH(水溶液)/MeCN(98/2)]?；蛘?，使用VF匿5MS柱(ID0.25mmx30m,0.25(im(VarianInc.)),在GC-MS(GC6890,5973NMSD,AgilentTechnologies)上記錄質(zhì)譜。線性溫度梯度使用(4(TC-300。C),25。C/分鐘。MS裝備有CI離子源，反應(yīng)氣體是甲烷。MS在m/z50-500之間進行掃描，掃描速率設(shè)定為3.25scan/s。HPLC分析在由G1379A微真空脫氣器、G1312A二元泵、G1367A孑L板自動進樣器、G1316A柱溫箱和G1315B二極管陣列檢測器組成的AgilentHPIOOO系統(tǒng)上進行。柱X-TerraMS,Waters,4.6x50mm，3.5pm。柱溫i殳定為40。C，流速為1.5ml/min。二極管陣列檢測器在210-300nm之間掃描，步長和峰寬分別設(shè)定為2nm和0.05min。采用線性梯度，由0%乙腈運行至100%乙腈，4min。流動相乙腈/10mM醋酸銨的5%乙腈+MilliQWater溶液。反應(yīng)后的典型搡作步驟包括產(chǎn)物使用溶劑例如乙酸乙酯萃取，用水洗滌后，有機相用MgSO4或Na2S04干燥，溶液真空濃縮。薄層色譜法(TLC)在MerckTLC-板(硅膠60254)上進行，使用UV顯影斑點?？焖偕V法在使用RediSepTM正相快速柱的CombiFlashCompanionTM或Merck硅膠60(0.040-0.063mm)上進行。用于快速色譜法的典型溶劑是氯仿/曱醇、曱苯/乙酸乙酯和乙酸乙酉旨/己烷混合物。制備型色譜法在具有二極管陣列檢測器的Gilson自動制備型HPLC上進行。柱XTerraMSC8,19x300mm,7jim。梯度為乙腈/0.1M醋酸銨的5%乙腈+MilliQ水溶液，由20%乙腈運行至60%乙腈，時間為13min。流速20ml/min。或者，在半制備型ShimadzuLC-8AHPLC上進行chunhau，所述半制備型ShimadzuLC-8AHPLC裝備有WatersSymmetry⑧柱(C18,5100mmx19mm)和ShimadzuSPD-10A紫外-可見光檢測器。梯度為乙腈/0.1%三氟乙酸的MilliQ水溶液，由35。/。乙腈運行至60%乙腈，時間為20min。流速10ml/min。重結(jié)晶通常在溶劑或溶劑混合物例如乙醚、乙酸乙酯/庚烷和曱醇/水中進行。^使用下面的縮寫DCM=二氯曱烷；DIPC1二^氯二異;f公蒎烯基硼烷O^chlorodiisopinocamphenylborane,DIP-ChlorideTM);DIPEA=7V'iV-二異丙基乙基胺；DMF=A^V-二曱基曱酰胺；DMSO=二曱亞砜；NCS=JV-氯琥珀酰亞胺；NMP=l-曱基-2-p比咯烷酮；THF=四氫吹喃；aq=水;容液；conc=濃。所使用的起始原料既可以商購得到，也可以按照文獻步驟制備得到，且它們具有與所報道相一致的試驗資料。下面是所制備起始原料的實例(15)-1-(2-氟苯基)乙醇Garrett,C.E.r"ra/zedra.'j^wwe^2002，",1347-1349;Doucet，H.C/zem.五w乂1999，5,1320-1330;(i)-7V-曱基亮氨醇Aitali,M.;Allaoud,S.;Karim,A.;Meliet,C.;Mortreux,A.Tfe/ra/^raw..A，we^y2000,"，1367-1374;(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇WO02/076990;5-(千硫基)-7-氯[l,3]p塞唑并[4,5-J]嘧啶-2-胺WO00/09511;3-(l-羥基乙基)苯曱酰胺Watson，C.Y;Whish，W丄D;Threadgill，M.D.所ow^.C7zem.19986「》721-34;l-[3-(曱磺?；?苯基]乙酮T.Fujita,J.IwasaandC.Hansch,/oMma/^wen'cawC7zem/ca/5b"'砂1964,<§<5，5175-5180;(l-氯丙基)苯Desai,V.R.;Nechvatal,A.;Tedder,J.M.J,CZem.SocY5)1969,30-32;3-[(l》陽l-羥基乙基]苯曱腈Belley,M.7kfed，1999，7,2697-2704;1_(3—曱氧基苯基)乙醇Handa,S./C/2ew.5bc戶ent/nTrara./1995,1623-1633;(2R)-2-氨基-4-氟-4-甲基戊烷-l-醇Tmong，V丄；Gauthier,J.Y;Boyd,M;Roy，B;Scheigetz,J.一/e"2005，8,1279-1280;followingtherouteforthe*Senantiomer:(15)-1-(3-氟苯基)乙醇:Pastor,I.M.C72em.乂2003，9，4031-4045.一般方法A在氮氣氣氛下，將硼氫化鈉(O.l當(dāng)量)、DIPEA(1.5當(dāng)量)和式(III)化合物(1.2當(dāng)量)加至式(II)化合物(l.O當(dāng)量)的DMSO〉容液中。所得反應(yīng)混合物在40。C攪拌，直到反應(yīng)完全(通過LC-MS、HPLC或TLC監(jiān)測)。將混合物倒入水水中，產(chǎn)物用DCM或EtOAc進行萃取。將合并的有機相干燥并真空濃縮。如果需要，使用制備型HPLC或者通過快速柱色譜純化粗產(chǎn)物。一般方法B在氬氣氣氛下，在0。C將Bl(l.O當(dāng)量)的THF溶液加至(+)-DIPCl(得到B2)或(-)-DIPCl(得到B3)(1.5當(dāng)量)的THF溶液中。使反應(yīng)混合物緩慢達到室溫過夜。蒸發(fā)出溶劑，然后加入Et20和二乙醇胺(2.2當(dāng)量)。攪拌混合物直至反應(yīng)完全(通過LC-MS、HPLC或TLC監(jiān)測)。將形成的沉淀過濾除去，用Et20洗滌，濾液真空濃縮。如果需要，使用制備型HPLC或通過快速柱色譜純化粗產(chǎn)物。一般方法C在氬氣氣氛下，在0。C將三苯基膦(1.3當(dāng)量)的THF溶液中加至NCS(1.3當(dāng)量)的THF溶液中。所得混合物在環(huán)境溫度攪拌30分鐘。在0。C加入Cl或C2(1當(dāng)量)，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌直至反應(yīng)完全(通過LC-MS、HPLC或TLC監(jiān)測)。蒸發(fā)出溶劑，然后加入己烷并通過過濾除去沉淀。濾液真空濃縮，如果需要，使用制備型HPLC或通過快速柱色語純化粗產(chǎn)物。實施例1(2RV2-「r2-氨基-54「n6Vl-(2-氟苯基)乙基l硫基UUl噻唑并「4，5-c/1嘧啶-7-基)氨基1戊烷畫1隱醇使用一般方法C,由(15>1-(2-氟苯基)乙醇(3.56g,25mmol開始，制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為65%,93%對映體過量。'H畫R(CDCl3)57.53(td,1H),7.28(m,1H),7.16(m，1H)，7.04(m,1H),5.42(q,1H),1.84(d,3H);MS(ESI+)m/z158[M+H]+。W0^-2-〃2-^差-5-廣芐孩差)〃,3/噻^;^^，5-^7^定-7-名/^差//^處-7-寧將5-(千硫基)-7-氯[l,3]p塞唑并[4,5-《嘧啶-2-胺(6.0g，19.4mmol)溶于固P(30mL)中。加入DIPEA(8.4mL,48.5mmol)和2-氨基-(2R)-l-戊醇(3.5g，33,9mmol),將混合物加熱至11CTC,持續(xù)4天。冷卻到環(huán)境溫度后，將混合物倒入水(200mL)中。過濾收集沉淀產(chǎn)物，用水洗滌，沒有進一步純化情況下用于下一步驟(7.0g,97%產(chǎn)率)。MS(ESI+)m/z376[M+H]+。c)0^)-2-/72-^差-5-375-d/7-差)扇差/zt'處-7-《#將裝備有干冰-乙醇冷凝器的圓底燒瓶浸于干冰-乙醇冷卻浴中。使氨(250mL)冷凝于燒瓶中，然后加入(2R)-2-([2-氨基-5-(千硫基)[l，3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基]氨基}戊烷-1-醇(6.8g,18.1mmol)。將所得混合物加熱至-33。C，加入小片鈉金屬，直至出現(xiàn)藍(lán)色并持續(xù)30秒。然后加入一勺量的固體氯化銨來淬滅反應(yīng)。蒸發(fā)出氨，向殘留物中加入水(250mL)。所得混合物用1MHC1(水溶液)中和。過濾收集沉淀產(chǎn)物，用水洗滌并真空干燥，得到標(biāo)題化合物，產(chǎn)量為4.15g(80。/。產(chǎn)率)。MS(ESI+)m/z286[M+H]+。d)a/)-^/^-^^jv/t^w-g-^^i)乙名/碗差/〃.J7^^#"5-fl7密定-7-差〗扇差7/t;嫁-7-殍使用一般方法A，由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]戊烷-l-醇(703mg，2.46mmol)和l-[(li)-l-氯乙基]-2-氟代苯(469mg,2.96mmol)開始，制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為96%。NMR(DMSO-d6)58.38(brs,2H)，7.55(td,1H)，7.32(m，1H)，7.20(m,1H),7.18(d,1H),5.26(q，1H)，4.19(brs,1H),3.43(dd，5.6Hz，1H),3.35(dd,1H),1.69(d,3H),1.66-1.42(m，2H),1.39畫1.21(m，2H),0.86(t,3H);MS(ESI+)w/z408[M+H]+。實施例2r2RV2-「r2-氨基-54「n5Vl-(2-氟苯基)乙基l硫基m,31噻唑并r4,5-《嘧啶-7-基)氨基1-4-曱基戊烷-1-醇使用一般方法A，由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l，3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇(800mg，2.67mmol)和l-[(l^)-l-氯乙基]-2-氟代苯(509mg，3.21mmol)制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為41%。'HNMR(DMSO-d6)57,97(s，2H),7.53(td，1H),7.29(m,1H),7.17(m,1H),7.15(d,1H),6.89(d,1H),5.22(q,1H),4.61(t,1H)，4.24(brs,1H)，3.38(dt,1H)，3.28(m,1H),1.65(d,3H),L59(m,1H),l唇1.32(m,2H),0.87(d，3H),0,84(d，3H);MS(ESI+)w/z422[M+H]+。實施例3(2RV2-(^2-氨基-5-「(l-苯基乙基)硫基l「Ul噻唑并「4,5-d嘧啶-7-基i氨基V4-曱基戊烷-l-醇根據(jù)一般方法A,由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l，3]噻唑并[4,5-J]嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇(320mg，1.01mmol)和(l-溴乙基)-苯(245mg,1.21mmol)開始，制備標(biāo)題化合物，得到兩種非對映異構(gòu)體的混合物，產(chǎn)率為67%。'H畫R(DMSO-A)S7.94(s，2H),7.16(m，2H),7.14(m,2H),6.97(m，1H),6.77(d,1H),4.74(m,1H),4.49(m,1H),4.03(m,1H),3.87(m,2H)，3.22(m，2H),1.72(dd,1H),1.61(m,1H),1.42(m，2H)，0.87(d，3H)，0.85(m,3H);MS卿+)w/z405[M+H]+。實施例4(2RV2-「(7-氨基-5-(「a"-l-苯基乙基l硫基Ul,31噻唑并「4,5-d嘧啶-7-基)氨基l-4-曱基戊烷-l-醇將(211)-2-({2-氨基-5-[(1-苯基乙基)硫基][1,3]噻唑并[4,5-^]嘧啶-7-基}氨基)_4-曱基戊烷-1—醇(實施例3)(500mg)進行HPLC純化，得到標(biāo)題的單純非對映異構(gòu)體(150mg)。'HNMR(DMSO畫4)57.98(s,2H),7.45(m,2H),7.32(m,2H),7.24(m,1H),6,87(d,1H),4.95(q，1H),4.24(brs,1H),3.45(m，1H),3,35(m,1H),1.68(d,3H),1.62(m,1H),l,42(m，2H),0.88(d,3H),0.82(d,3H);MS(ESI+)m/z405[M+H]+。實施例53-m5vi-「(7-氨基-74「nivi-(羥曱基)丁基i氨基m，3i口塞唑并「4,5-^i嘧啶-5-基)硫基1乙基}苯曱腈fl〕jw^)-7-歲乙差/苯fI根據(jù)一^L方法C,由3-[(15>1-羥基乙基]苯曱腈(3.35g,22.8mmol)開始，制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為79%。'HNMR(DMSO-d6):S7.97(s,1H),7.82(m,2H),7.60(t，1H)，5.40(q，1H)，1.80(d,3H);13CNMR(DMSO-d6):5144.1，131.2,131.6，130.3,129.9，118.4,111.6，57.41,25.5;MS(ESI+)w/z166[M+H]+。Wj-W^-7-AG-^差-7VA^^-7-r茌f差)7~差7我差/〃，J7^^并A《5-d/密定-5-差〗磁差/乙差/苯f#根據(jù)一般方法A,由2-氨基-7-{[(1"-1-(羥曱基)丁基]氨基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-5(6//)-硫酮(2.87g,10.0mmol)和3-[(17)-l-氯乙基]苯曱腈(2.31g,13.9mmol)開始，制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為75%。'HNMR(DMSO-d6):S8.00(s,2H)，7.91(s，1H),7.82(m，1H)，7,69(m，1H),7.52(t，1H),6.90(d，1H)，5.00(q,1H)，4.63(t,IH)，4.13(brs,IH),3.41(m,IH)，3.30(m，IH),l,66(d,3H),1.57(m,IH),1.43(m,IH)，1.29(m,2H),0.86(t，3H);13CNMR(DMSO-d6):5170.8，168.7,165,1，155.7,145.9，132,3,130.8,130.6,129.5,118.7,111.2,63.3，59.7，51.8,42.3,33.0，21.8，18.8，14.0;MS(ESI+)m/"15[M+H]+。實施例6(2R)-2-(「2-氨基-5-Wl"-l-「3-r曱磺?；?苯基l乙基i硫基)「Ul噻唑并K5-d嘧啶-7-基l氨基)-4-曱基戊烷-1-醇/3-廣^#瘋差)泉差7乙寧根據(jù)一般方法B，由l-[3-(曱磺酰基)苯基]乙酮(2.00g，10.1mmol)開始，制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為58%。MS(ESI+)m/z201[M+H]+。W7-廠〃^)-/-襲乙差7-3Yf^f瘋差)苯根據(jù)一般方法C,由(15)-l-[3-(曱磺?；?苯基]乙醇(100mg,0.50mmol)開始制備化合物，產(chǎn)率為21%。MS(ESI+)m/z219[M+H]+。c)qR)KA^處差-5-"〃S)-7-A^甲磺瘋差〗苯差7乙差/磁差)〃,3/噻一:^A《5-d/密定-7-差/瘋差/-^fj/t'i-/-#根據(jù)一般方法A，由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇(16.5g,55.3mmol)和l-[(li)-l-氯乙基]-3-(曱磺?；?笨(12.1g,55.3mmol)制備標(biāo)題化合物。NMR(600MHz,DMSO-d6):58.00(m，3H)7.81(m,2H)7.60(t,1H)6.91(d,1H)5.06(q,1H)4.66(t,1H)4.24(brs,1H)3.38(m,1H)3.28(m，lH)3.23(s,3H)1.69(d,3H)1.59(m,lH)1.34-1.46(m，2H)0.86(m,6H);MS(ESI+)m/z482[M+H]+。實施例7r2RV2-f(2-氨基-54「a^SVl-苯基乙基l硫基m,31噻唑并f4,5-d嘧啶-7-基)氨基l戊烷-l-醇使用一般方法C,由(l^-l-苯基乙醇(25g,0.20mol)開始，制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為67%。&NMR(CDC")57.42(m,2H),7.36(m,2H),7.30(m,1H)，5.09(q,1H)，1.85(d,3H);MS(CI)m/z141[M+l]+。Wa)-2-,廣2-扇差-5-//^5)-7-哀差乙差7磁差/〃，37^^#/￥,5-^/^定-7-使用一般方法A，由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l,3]噻唑并[4,5-c/]嘧啶-7-基)氨基]戊烷-l-醇(100mg，0.35mmol)和[(l尺)-l-氯乙基]苯(54mg,0.38mmo1)開始，制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為23%。'HNMR(DMSO-d6)Spp印7.96(brs,1H),7.43(d,1H),7.31(m,2H),7.22(m,1H),6.86(d,1H),4.95(m,1H),4.64(t，1H),4.17(brs,1H),3.44(m,1H),3.35(m,1H),1,66(d,3H)，1.58(m，IH),l,44(m,1H),1.36-l,21(m,2H)，0.85(t，3H);MS卿十)m/z390[M+H]+。實施例83-m^-l-「(2-氨基-7-U(l們-l-(羥曱基V3-曱基丁基l氨基UUl噻唑并「4,5-J1嘧啶-5-基)硫基l乙基i苯曱腈根據(jù)一般方法A,由pR)-2-噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇(200mg，0.67mmol)和3-[(li)-l-氯乙基]苯曱腈(166mg,l.Ommol)開始，制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為31%。'HNMR(CD3OD)57.89-7.76(m，2H),7.57(d,1H),7.49(m，1H)，5.12(q,1H),4.42(brs,1H),3.53(m,1H),3.44(m,1H)，1.63-1.76(m，4H)，1.41-1,60(m，2H),0.96(t,6H);MS(ESI+)附/z429[M+H]+。實施例9(2RV2-(72-氨基-5-「(l-苯基丙基)硫基l「Ul噻唑并「4,5-《嘧啶-7-基l氨基V4-曱基戊烷-l-醇通過一般方法A，由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l，3]噻唑并[4,5-J]嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇(30mg，100^mol)與(l-氯丙基)苯(15.5juL,lOO拜ol)的反應(yīng)來合成標(biāo)題化合物，為兩種非對映異構(gòu)體的混合物，得到13mg的油狀物(31%產(chǎn)率)。NMR(CD3OD)57.39(t,2H),7.28(m,2H),7.20(t,1H),4,85(dd,1H),4.57-4.40(m，1H),3.62(m，1H),3.59-3.48(m,1H),2.25-2.1l(m，1H),2.01(m，1H),1.79-1.65(m，1H),1.63-1.53(m,1H)，1.53-1.42(m,1H),1.01-0.87(m,9H);MS(ESI+)附/z418[M+H]+。實施例103-m"-l-「(2-氨基-7-W17Vl-(羥曱基V3-甲基丁基l氨基Ul,31噻唑并「4,5-d嗜。定-5-基)硫基l乙基}苯曱酰胺fl)J-〈7-襲乙差)笨f魔發(fā)將二乙基苯胺(390nL,2.45mmol)加至于DCM(20mL)中漿化的3-(l-羥基乙基)苯曱酰胺(400mg,2.45mmol)中，并用冰浴冷卻反應(yīng)混合物。滴加亞硫酰氯(255jiL，2.47mmo1)，將反應(yīng)置于冷藏設(shè)備中過夜。加入水，用DCM萃取反應(yīng)混合物兩次，用100/。HC1溶液洗滌，用飽和碳酸氫鹽溶液進行中和，用鹽水、干燥(MgS04)處理，過濾并蒸發(fā)至干燥。粗產(chǎn)物從乙醚/己烷中重結(jié)晶，得到335mg(75。/。產(chǎn)率)白色固體的標(biāo)題化合物。'H畫R(氯仿-力57.90(s,1H),7.73(d,1H),7.62(d，1H),7.46(t，1H),5.14(q,1H)，1.88(d,3H),1.60(s，2H);MS(ESI+)m/z183，185[M+H]+。W3-/〃i)小〃2-^差-7-〃〃i)-7-廣羥^差)-J-^差7"差7扇差/〃,"^^#/￥，5^/7密定-5-差〗磁差7乙差/哀f^發(fā)通過一般方法A,由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l,3]噻唑并[4,5-^]嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇(30mg,100(amol)與3-(1-氯乙基)苯甲酰胺(20mg,100iLimol)的反應(yīng)來合成標(biāo)題化合物，為兩種非對映異構(gòu)體的混合物。通過制備型HPLC分離混合物，得到油狀物，為單純的非對映異構(gòu)體(6mg，13%產(chǎn)率)。NMR(CD3OD)57.99(s,1H),7.73(d,1H),7.69(d，1H),7.41(t,1H),5,15(q,1H)，4.43-4.52(m，1H),3.54(m,1H),3.47(m，1H)，1.74(d,3H)，1.70(m,1H)，1.59隱l,42(m,2H),0.96(t，6H);MS(ESI+)m/z447[M+H]+。實施例11(2RV2-"2-氨基-5-(n-「3-(三氟曱基)苯基l乙基l硫基)「Ul噻唑并「4,5-^1嘧啶-7-基1氨基}-4-曱基戊烷-1-醇通過一般方法A，由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l,3]噻唑并[4,5-J]嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇(30mg，0.1mmol)與3-(l-溴乙基)三氟曱基苯(15.5liL，0.1mmol)的反應(yīng)來合成標(biāo)題化合物，為兩種非對映異構(gòu)體的混合物，油狀物38mg(81%產(chǎn)率)。H雨R(600MHz,CD3OD)S7.81-7.71(m,2H),7.57-7.44(m,2H),5.16(q,1H),4.43(s,0.5H)，4.3l(s，0.5H),3.59(m，1H),3.55-3.40(m,1H),1.74(t,3H),1.69(m，0.5H),1.63(m，0.5H),1.54(m,1H),1,49-1.37(m，1H),0.96(dd，3H),0.86(dd,1.5H);MS(ESI+)w/z472[M+H]+。實施例12(2RV2-K2-氨基-5-「n-苯基乙基)硫基l「l,31噻唑并r4，5-d嘧啶-7-基K曱基)氨基l-4-甲基戊烷-l-醇^q^)-2-〃2-減差-5-廣卡《悉差)〃,j7#A《5-d/發(fā)定-7-差/廣f差J^存將5-(節(jié)硫基)-7-氯[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-2-胺(1.5g,4.86mmol)、DIPEA(691mg，5.35mmol)和(i)-7V-曱基亮氨醇(956mg,7.29mmol)混合于NMP(7.5mL)中。所得溶液在110。C于氮氣氣氛攪拌2天。冷卻到室溫后，將反應(yīng)混合物傾倒在冰上。過濾收集所得的黃色沉淀物，用水洗滌并真空干燥。粗產(chǎn)物通過硅膠快速柱色譜法(DCM:EtOAc50:50至0:100)進行純化，得到1.42g(72。/。產(chǎn)率)黃色固體的標(biāo)題化合物。NMR(DMSO-d6)57.97(brs,2H),7.40(m，2H)，7.28(m,2H),7.21(m,1H),4.73(dd，1H),4.64(brs，1H),4.32(brs,2H)，3.52-3.37(m，2H),3.00(s,3H)，1.55-1.35(m,2H)，1.27(m,1H)，0.88(d，3H),0.80(d，3H);MS(ESI+)m/z404[M+H]+。W0^-2-/72-我差-5-^差〃,^^^#",5^/^定-7-^V^^j^^Z-^-將三頸圓底燒瓶浸在干冰/乙醇冷卻浴中，并配備干冰/乙醇冷凝器。用氮氣吹掃該體系，并將氨(大約50mL)冷凝于燒瓶中。將(2R)-2-[[2-氨基-5-(千硫基)[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基](甲基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇(1g,2.5mmol)加入燒瓶中，得到澄清的黃色溶液。將小片鈉金屬(尺寸2-3mm)—片一片地加入反應(yīng)混合物中。當(dāng)出現(xiàn)持久的藍(lán)色(>20sec)時，加入一勺固體NH4C1來淬滅反應(yīng)。將氨蒸發(fā)出。加入水(50mL)，并用1MHC1(水溶液)將混合物中和到pH7。過濾收集沉淀的黃色固體，用水洗滌，并真空干燥，產(chǎn)生630mg標(biāo)題化合物(80%產(chǎn)率)。'HNMR(DMSO-d6)512.78(brs，1H)，8.43(brs，2H)，4.84(br，2H),3.52-3.38(m，2H)，3.01(s,3H),1.55-1.33(m,2H)，1.32-1.20(m,1H)，0.87(m,6H)5MS(ESI+)w/z314[M+H]+。c)q^-2-AG-瘋差-5-A廣7-苯差乙差〗^差/〃，并風(fēng)J-a7發(fā)^-7-差/廣^差J瘋差/羊f差/t'U-^通過一般方法A,由(2尺)-2-[(2-氨基-5-巰基[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)(甲基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇(31.4mg,O.lmmol)與1-溴乙基苯(13.5|LiL,0.1mmol)的反應(yīng)來合成標(biāo)題化合物，為兩種非對映異構(gòu)體的混合物，得到26mg(62%產(chǎn)率).'H畫R(DMSO-^)57.96(s,2H)，7.43(t，2H)，7.32(m,2H),7.23(t，1H)，5,02陽4.92(m,1H),4.83-4.71(m,1H),4.64(s,1H),3.53-3.38(m,2H)，3.01(d，3H),1.68(dd,3H)，1.52(m，1H),1.43(m,1H),1.35-1.24(m，1H),0.88(d,3H),0.83(d，3H);MS(ESI+)m/z418[M+H]+。實施例13(2R)-2-[(2-氨基-5-m-(2-氯苯基)乙基l硫基m,31噻唑并「4,5-fl^嘧啶-7-基)氨基l-4-甲基戊烷-l-醇fl)7-盧-2-^-歲乙差)苯將亞硫酰氯(1.49g,12.6mmol)加至l-(2-氯苯基)乙醇(1.0g,6.3mmol)的曱苯(50mL)溶液中，并在室溫曱苯該混合物達2h。向反應(yīng)混合物中加入10%HC1水溶液(20mL)。分離有機相，并用另一部分10%HC1水溶液、鹽水(20mL)進"f亍洗滌，然后分離，干燥并蒸發(fā)，得到72%產(chǎn)率的1-氯-2-(1-氯乙基)苯。'H麗R(DMSO-4)57.72(1H,d),7,48(1H，m),7.39(2H,m),5.59(1H,q),1.84(3H,d)。W^差-5-〃7-G-襲求差)乙名7磁差/〃,J7^^并"5-d/密定-7-差)瘋差7一-^差/t'處-7-,按照一般方法A,由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l,3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-基)氨基]_4-甲基戊烷-1-醇(20mg,0.047mmol)和1-氯-2-(l-氯乙基)笨(IOmg，0.057mmol)開始，'以24%產(chǎn)率獲得標(biāo)題化合物，為兩種非對映異構(gòu)體的混合物。"H畫R(DMS00S7.83(2H,m),7.48(1H,d)，7.32(1H，m)，7.15(1H,m),7.14(1H，m),6.79(1H，d),5.22(1H,m),4.13(1H，m),3.29-3.17(2H,m),L52(3H,dd),1.47(1H,m)，丄31(1H,m),1.25(1H,m),0.76(3H,dd)，0.73(3H,dd);13CNMR(DMSO-d6)5171.18，169.14,165.75,165.64,155.97，140.63,132.62,129.91,129.04,128.96,127.94,64.08,63.88，50.59,24.70，23.67，22.33，22.22,22.01;MS(ESI+)m/z438,440[M+H]+。實施例14〖2RV2-「(2-氨基-5-(「l-(3-曱氧基苯基)乙基l硫基Hl,31噻唑并「4,5-d嘧啶-7-基)氨基1-4-曱基戊烷-1-醇從1-(3-曱氧基苯基)乙醇(0.5g,3mmol)開始，使用實施例13(a)的方法，以59%產(chǎn)率獲得標(biāo)題化合物。&NMR(CDC13)57.22(1H,m),6.76(2H,m),6.62(1H,dd),4.81(1H,q)，3.57(3H,s),1.62(3H,d)。W0^)-2-〃2-^差-5-/〃-^-^褒差笨茗)乙差/磁差/〃,J7^^#A《5-fl7齊定-7-差〗扇差7-4-^差/t'處-7-寧按照一般方法A,由(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]_4-曱基戊烷-1-醇(20mg,0.07mmol)和l-(l-氯乙基)-3-甲氧基苯(9.7mg，0.06mmol)開始，以25%產(chǎn)率獲得標(biāo)題化合物，為兩種非對映異構(gòu)體的混合物。'H麗R(D1V[SCW6)57.89(2H,s),7.13(1H,m),6.87(2H,m),6.80(1H,m),6.71(1H,m)，4.86(1H,m),4.55(1H,brs)，4.17(1H,m),3.64(3H，s)，1.51(3H，d)，1.48(1H,m)，1.31(2H,m)，0.76(6H，m);MS(ESI+)m/z434[M+H]+。實施例15(2R)-2-「(2-氨基-5-mi6Vl-苯基乙基l硫基m,31噻唑并r4,5-^1嘧啶-7-基)氨基l-4-曱基戊烷-l-醇i)使用方法(a)(2R)-2-「(2-氨基-5-(「n5Vl-苯基乙基l硫基UUl噻唑并「4，5-^1嘧啶-7-基)氨基l-4-曱基戊烷-l-醇使用一般方法A,從(2R)J-噻唑并[+5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇(27g,90mmol)和[(li)-l-氯乙基]苯(19g,135mmol)開始，以42。/。產(chǎn)率獲得標(biāo)題化合物。!HNMR(DMSO-d6)57.95(brs,2H),7.43(m,2H)，7.3l(m，2H)，7.22(m，1H),6.85(d,1H),4,96(q,1H),4.64(t,1H),4.27(brs,1H),3.44-3.30(m,2H),L66(d，3H),L59(m,1H),1.41(m，2H),0.87(d,3H),0.84(d,3H);MS(ESI+)Wz404[M+H]+。ii)使用方法(b)a)2-^^S9-7-哀基乙差/磁差；^定-^舉將NaH(600/。，油分散液)(0.5g,12.5mmol),然后將NaBH4(40mg,1mmol)加至6-氨基-2-巰基嘧啶-4-醇一水合物(1.6g,10mmol)的DMF(20mL)溶液中。30分鐘后,加入[(li)-l-氯乙基]苯(1.4g,lOmmol),并攪拌反應(yīng)混合物達16h。將反應(yīng)真空濃縮到約10mL體積，然后傾倒入水(約50mL)中。過濾出沉淀的固體物質(zhì)，并用水和乙醚洗滌，得到標(biāo)題化合物(U5g,46%產(chǎn)率)。*HNMR(DMSO-d6)57.46隱7.22(m,5H),6.53(brs,2H),4.99(q,1H),4,92(s,1H)，1.67(d,3H)。W2-羞差-5-〃/M)-乙差/磁差/A厶J7^^并M5-d/。,定-7-^將吡啶(0.6g,7.6mmol)加至6-氨基-2-{[(15>1-苯基乙基]硫基}嘧啶-4-醇(lg,4mmol)和KSCN(1,7g,16mmol)的DMF(20mL》容液中。將反應(yīng)混合物冷卻到0。C,然后一次性地加入溴(0.65g,4.0mmo1)。在2h后，將反應(yīng)混合物傾倒入水中，過濾出橙色沉淀物，并用水洗滌。將固體懸浮于DMF(6mL)和水(2mL)的混合物中，并加熱至110。C。在30h后，將反應(yīng)混合物傾倒入水中，過濾出微黃色沉淀物，并用水和乙醚洗滌。固體在4crc真空干燥，得到標(biāo)題化合物(0.8g,65%產(chǎn)率)。'HNMR(DMSO-d6)S8,16(brs,1H),7.47-7.24(m,5H)，5.05(q，1H),1.71(d，3H)。7-處-5-/廠〃>$>)-7-^:差乙差7磁差/廠厶"^^#/￥,5-^齊定-2陽應(yīng)將P0C13(1mL)加至二噁烷(6mL)的DMF(lmL)溶液中。將2-氨基-5-{[(15>1-笨基乙基]硫基}[1，3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-醇(1g，3.3mmol)—批性加入反應(yīng)中。加入P0Cl3(1mL),并將反應(yīng)混合物加熱至80。C,持續(xù)約30分鐘。將反應(yīng)冷卻到室溫，并傾倒在冰上。將所得的混合物回流加熱約5h。使混合物達到室溫，然后用EtOAc進行萃取。有機層通過硅膠層，并濃縮到干燥，得到標(biāo)題化合物(lg,95%產(chǎn)率)。'HNMR(DMSO-d6)S8.91(brs，2H),7.47-7.20(m，5H)，4.95(q，1H),1.69(d3H)。d)0^)-2-〃2-^差-5-〃//》-/-末差乙差7磁差/A厶J/^^^^.U/密定-7-差)羞差7-冬f差/t'處小獰將DIPEA(400mg，3mmol)和D-亮氨醇(400mg，3.4mmol)加至7-氯-5-{[(11^-1-苯基乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-2-胺(300mg，0.9mmol)的NMP(6mL)溶液中，將混合物加熱至120。C,持續(xù)24h。將混合物傾倒入水中，并用乙酸乙酯進行萃取。經(jīng)MgS04有機相，蒸發(fā)，殘留物通過快速柱色譜法(EtOAc)進行純化，得到標(biāo)題化合物(200mg，54%產(chǎn)率)。NMR(DMSO-d6)S7.95(brs,2H),7.43(m,2H),7.3l(m，2H),7.22(m,1H),6.85(d,1H),4.96(q,1H),4.64(t,1H),4.27(brs，1H),3.44-3.30(m,2H)，1.66(d,3H),1.59(m,1H),l,41(m，2H),0.87(d,3H),0.84(d，3H);MS(ESI+)w/z404[M+H]+。實施例16(7RV2-「(2-氨基-54「n5Vl-苯基乙基l硫基m,31噻唑并「4,5-^]嘧啶-7-基)氨基l-4-氟-4-曱基戊烷-l-醇將DIPEA(0.83mL,4.75mmol)加入7-氯-5-{[(15>1-苯基乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-2-胺(0.49g，1.52mmol)和(2R)-2-氨基-4-氟-4-曱基戊烷-l-醇(2mmol)在NMP(2mL)中的溶液中，反應(yīng)混合物在U0。C攪拌22h。HPLC純化得到標(biāo)題化合物(0.22g,17%產(chǎn)率)。'H畫R(400MHz,CD3OD):57.48(m,2H)，7.32(m,2H)，7.23(m,1H)，5,09(q，1H)，4.66(brs,1H),3.61-3.47(m，2H),2.12-1.89(m,2H),1.75(d，3H)，1,40(m,6H);MS(ESI+)m/z422[M+H]+。實施例17(2R)-2-[(2-氨基-5-([(lQ-l-(2-氟苯基)乙基]硫基)[l,3]噻唑并[4,5-J]嘧啶-7-基)氨基]-4-氟-4-曱基戊烷-1-醇fl)2-〃〃59-/-0-處笨差)乙差/孩差/密定一-^分批地將NaH(60%,油分散體，1.05g,26.3mmol),然后將NaBH4(0.099g,2.7mmol)加至6-氨基-2-巰基嘧啶-4-醇一水合物(4.23g，26.3mmol)的DMF(40mL)溶液中。在30分鐘后，加至l-[(l^)-l-氯乙基]-2-氟代苯(5.0g,31.5mmol)的DMF(10mL)溶液中，并攪拌反應(yīng)混合物達24h。濃縮反應(yīng)混合物，并分配在水和DCM之間，有才幾相經(jīng)MgS04干燥，蒸發(fā)。殘留物通過快速柱色譜法(階式梯度為5-10。/。MeOH/CHCl3)進行純化，得到標(biāo)題化合物(5.20g，75%產(chǎn)率)。iH薩R(400MHz,DMSO陽^j):57,35(m，1H),7.13(m,1H),6.99(m,2H)，6.29(s，2H)，5.00(q,1H),4.76(brs,1H)，1.49(d，3H);MS(ESI+)w/z266[M+H]+。W2-凌差-5-^Y^)-J-d乙差7磁差/〃,37噻^并A/,5"n定-7-《#將KSCN(10.76g,110.7mmol)和吡啶(3.9mL，49.2mmol)加至6-氨基-2-{[(15>1-(2-氟苯基)乙基]硫基}嘧啶-4-醇(6.53§,24.6mmol)的DMF(70mL)溶液中。將混合物冷卻到0。C，并滴力。Br2。3.5h后，將反應(yīng)混合物傾倒入水中，并過濾收集所形成的沉淀物。將固體懸浮于DMF(75mL)和水(15mL)的混合物中，并加熱至120。C,持續(xù)8h。將反應(yīng)混合物傾倒入水中，過濾收集固體并在4(TC真空干燥，得到標(biāo)題化合物(6.42g,81%產(chǎn)率)。MS(ESI+)m/z323[M+H]+。c)7-^-5-/77^)-7-G-處末差)乙差/磁差/〃，J7^^并A《5-^^定-2-展將POCl3(2.77mL,29.7mmol)加至DMF(3.07mL,39.6mmol)的二口惡烷(30mL)溶液中。30分鐘后，將該混合物加入2-氨基-5-{[(15>1-(2-氟苯基)乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-醇(6.38g,19.8mmol)在二。惡烷(100mL)中的溶液中。30分鐘后，加入POCl3(2.77mL，29,7mmol),將反應(yīng)混合物加熱至80。C，」持續(xù)2h。冷卻到室溫后，小心地加入水(20mL)，所得的混合物在80。C攪拌30分鐘，并在室溫攪拌2h。將反應(yīng)混合物傾倒入水中，并收集所形成的沉淀物。通過快速柱色譜法(5。/。MeOH/CHCl3)純化固體，得到標(biāo)題化合物(5.91g,88%產(chǎn)率)。'H雨R(400MHz,DMSO-^):58.94(s，2H),7.58(m,1H)，7,32(m，1H),7.20(m,2H),5.22(q,1H),1.71(d，3H);MS(ESI+)m/z341[M+H]+。d)2-l72-桌差-5-^Y^W-r2-處笨差)乙差7磁差/〃，"噻^并R5-^齊愛-7-差〗扇差/-4-歲羊f差/t'處-7-寧將DIPEA(2.09mL,12.0mmol)加至7-氯-5-{[(15>1-(2-氟笨基)乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-2-胺(1.36g,4.0mmol)和(2R)-2-氨基-4-氟-4-曱基戊烷-1-醇(4mmol)的NMP(3mL)溶液中。在120。C攪拌反應(yīng)混合物22h后，將其傾倒入水中，并過濾收集沉淀物。固體通過快速柱色語法(階式梯度為5。/o-10。/。MeOH/CHCl3)和制備型HPLC進行純化，得到標(biāo)題化合物(0.22g，13%產(chǎn)率)。薩R(400MHz,CD3OD):57.35(m,1H)，7.03(m,1H),6.91(m，2H),5.15(q,1H)，4.40(m,1H),3.35-3-21(m,2H),1.82-l,72(m,2H)，1.50(d，3H),1.17(m,6H);MS(ESI+)m/z440[M+H]+。實施例18(2R)-2-[(2-氨基-5-([(15)-l-(3-氟苯基)乙基]硫基〉[l,3]噻唑并[4,5-J]嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇使用一關(guān)殳方法C,從(15>1-(3-氟苯基)乙醇(4.20g,30mmol)開始，以49%產(chǎn)率獲得標(biāo)題化合物，94.5%對映體過量。'H麗R(300MHz,DMSO-^)S7,47-7.30(m,3H);7,16(t,1H);5.36(q,1H);1.78(d,3H)。Wa^-^A^-^^JVAG^-iYJ-^^^)乙差/碗差/〃，_5/^^#/￥，5-齊定-7-差〗桌差7-一^差/t'處-7-^使用一般方法A,從(2R)-2-[(2-氨基-5-巰基[l，3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-基)氨基]—4-曱基戊烷-1-醇(0.30g,1.0mmol)，l-[(li)-1-氯乙基]-3-氟代苯(0.17g,1.1mmol)和NaBH4(0.019g,0.5mmol)開始，以61%產(chǎn)率獲得標(biāo)題化合物。NMR(400MHz，CD3OD):57.23(m,2H)，7.13(m，1H),6.86(m,1H)，5.01(q，1H),4.38(m，1H),3.43(m,2H),1.63(d,3H)，1.44(m,2H),0.88(m,6H);MS(ESI+)m々422[M+H]十。藥理學(xué)篩選材料重組人fractalkine(hCX3CLl)和重組人白介素-8(IL-8或hCXCL8)購自PeproTechInc.,UK。比活性為2200Ci/mmo1的重組[1251]-fractalkine(人)和[1251]ML-8購自NENLifeScienceProducts,Inc.,UK。Fluo4-AM購自MolecularProbes,US。其它所有化學(xué)試劑都是分析純級的。細(xì)胞完全的人CX3CR1cDNA(GenBank登錄號U20350)由人腦mRNA(Superscript,LifeTechnologies)提取得到，與pCR-BluntIITOPO載體(InVitrogen)相連。相應(yīng)的插入片,殳hCX3CRl分離后，進一步亞克隆到pcDNA3.1zeo中。質(zhì)粒DNA使用PlasmidMidiKit(Qiagen)制備。然后4吏用SuperfectTransfectionReagent(Qiagen)按照制造商的方案，將hCX3CRl的表達質(zhì)粒引入至人胚腎懸浮液(HEKS)293細(xì)胞系中，后者含有穩(wěn)定表達嵌合G-蛋白質(zhì)Gaqi5的載體。使用zeocin(500嗎/mL)和潮霉素(100嗎/mL)生成穩(wěn)定的克隆。為了進一步應(yīng)用，將細(xì)胞保持在Dulbecco改進的Eagle培養(yǎng)基/Ham營養(yǎng)混合物F12(DMEM/F12)中，后者含有維生素B6,補充有10%(v/v)胎牛血清、2mML-谷氨酰胺、100U/ml青霉素和100mg/ml鏈霉素、250嗎/mLzeocin和100嗎/mL潮霉素。培養(yǎng)，后者含有Glutamax，補充有10%FBS(來自PAA，Austria)、1%非必需氨基酸(NEAA)、100U/mL青霉素和100嗎/mL鏈霉素(PEST)和500[ig/mL遺傳霉素/G418。膜制備使細(xì)胞在37°C和5%C02下生長，在含有10mMTris-HClpH7.4、5mMEDTA、0.1mg/mL桿菌肽的緩沖液中以60-80%融合率收集。細(xì)胞在300xg下離心10min,將沉淀再次懸浮于收集緩沖液(IOmMTris-HCl,pH7.4、5mM乙二胺四乙酸(EDTA)和0.1mg/mL桿菌肽)中，匯集后使用Dounce勻漿器勻化處理。勻漿在48000xg下離心10min，使用Ultra-TurraxT8再次懸浮于收集緩沖液中。將膜等分儲存于-8CTC。按照Harrington(1990,Anal.Biochem.186,285-287)所述，測量孩史孔滴定板中的蛋白質(zhì)濃度。體外受體結(jié)合測定-fractalkine的竟?fàn)幮越Y(jié)合研究在總體積為1000jiL/孔的2mL96-深孔板(Beckman,Germany)中進行。每孔含有10pM[125I]-fractalkine和相當(dāng)于在測定緩沖液(50mMHepes-KOH，pH7.4、10mMMgCl2、lmMEDTA、0.1%(w/v)明膠)中受體濃度為1pM的膜。將10種濃度(2點/對數(shù)單位)的測試化合物預(yù)先溶解于DMSO中，加入使得最終濃度為1%(v/v)DMSO。加入膜開始啟動測定，在25。C培養(yǎng)24h。使用WhatmanGF/B玻璃纖維濾器進行快速過濾，從而終止反應(yīng)，濾器預(yù)先使用0.3%聚乙烯亞胺處理，接下來使用水冷的緩沖液(10mMHepes-KOHpH7.4,500mMNaCl)洗滌，同時使用Brandel受體結(jié)合捕獲器。加入閃爍雞尾酒，放射活性用Packard25OOTR液體閃爍計數(shù)器(PerkinElmer,USA)測量。-hIL-8竟?fàn)幮越Y(jié)合研究以單份在最終體積為200jiL的白色透明底部96-孔板中進行，每孔含有150pM[125I]-hIL-8(比活性2200Ci/mmol)、相當(dāng)于在測定緩沖液[50mMHEPES-KOHpH7.4、10mMMgCl2、1mMEDTA、0.5%(w/v)明膠]中為20pM受體和1.5mgSPA-珠的膜-SPA制品。對測試化合物進行上述處理。非特異性結(jié)合在500nM未標(biāo)記的hIL-8存在下測量。每次測試時，使用激動劑hlL-8(濃度響應(yīng)曲線由3pM至30nM)作為對照化合物。肽曲線中不含DMSO。加入140膜-SPA制品啟動結(jié)合反應(yīng)，樣品在室溫避光培養(yǎng)4h。測定板用液體閃爍計數(shù)器(WallacMicroBetaTriLux1450fromPerkinElmer，USA)計數(shù)。產(chǎn)S7G7731^潛合GTPyS結(jié)合研究在透明底部的微孔滴定板中以雙份用稀釋在DMSO(最終濃度1%)中的10種濃度的抑制劑(2濃度/對數(shù)單位)在室溫進行。加入表達hCX3CRl受體的膜(最終濃度20嗎蛋白質(zhì)/孔)連同懸浮于GTPyS結(jié)合緩沖液(50mMTris-HCl、100mMNaCl、0.1%明膠、15嗎急戒/mL和3GDP,pH7.4,室溫)的所有SPA-珠(最終濃度1mg/孔)。膜、SPA珠和藥物預(yù)先培養(yǎng)30min,然后力。入310pMfractalkine進行最大刺激。將基礎(chǔ)活性定義為在沒有fractalkine刺激下測得的活性(GTPyS結(jié)合緩沖液)。再過30min，加入[35S]GTPyS至最終濃度為0.1nM、最終測試體積為0.2mL啟動反應(yīng)。30分鐘后，試—瞼通過在2000rpm下離心2x5分鐘(不同方向)終止，放射活性用液體閃爍計數(shù)器(WallacMicroBetaTriLux1450)測量。結(jié)果所選的本發(fā)明化合物的受體結(jié)合數(shù)據(jù)表示在表1中。對照化合物的相應(yīng)凄t據(jù)表示在表2中。表1和表2中數(shù)據(jù)的比較清楚表明，相比于其中R"表示H的相應(yīng)對照化合物，其中R'表示Me或Et的本發(fā)明化合物對CX3CRl受體而言是較強的拮抗劑，而對CXCR2受體而言則是較弱的拮抗劑。針對cx3cr1受體的拮抗作用具有如此高的選擇性，本發(fā)明化合物具有顯著的治療優(yōu)勢。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>表2<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>本申請，實施例1(b)權(quán)利要求1.式(I)化合物或其可藥用鹽R1表示CH3或CH3CH2；R2表示H、2-F、2-Cl、3-F、3-OCH3、3-CN、3-CF3、3-CONH2或3-SO2CH3；R3表示H或CH3；R4表示H或CH3；和R5表示H；或者，當(dāng)R4是CH3時，R5表示H或F。2.權(quán)利要求1的化合物，其中W表示H。3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中R1表示CH3。4.權(quán)利要求1至3任一項的化合物，其中112表示H、2-F或3-CN。5.權(quán)利要求1至4任一項的化合物，其中114表示H。6.權(quán)利要求1至4任一項的化合物，其中R"表示CH3。7.權(quán)利要求6的化合物，其中RS表示F。8.權(quán)利要求6的化合物，其中rS表示H。9.權(quán)利要求l的化合物，其中Ri表示CH3;R2表示H、2-F或3-CN;R3表示H;R4表示H或CH3;r5表示H。10.權(quán)利要求1的式(I)化合物，其為(211)-2-[(2-氨基-5-{[(15>1-(2-氟苯基)乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]戊烷-1-醇；(210-2-[(2-氨基-5-{[(15>1-(2-氟苯基)乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇；(2R)-2-((2-氨基-5-[(l-苯基乙基)硫基][l,3]噻唑并[4，5-《嘧啶-7-基〉氨基)-4-曱基戊烷-l-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-U(lA)-l-苯基乙基]硫基丌l,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇；3-{(15>1-[(2-氨基-7-{[(17)-1-(羥曱基)丁基]氨基}[1,3]噻唑并[4，5-《嘧啶-5-基)硫基]乙基}苯曱腈；(2R)-2-([2-氨基-5-({(15>1-[3-(曱磺酰基)苯基]乙基}硫基)[1,3]噻唑并[4,5-，密啶-7-基]氨基}-4-甲基戊烷-1-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-([(15)-l-苯基乙基]硫基)[l,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]戊烷-l-醇；3-{(1^-1-[(2-氨基-7-{[(17)-1-(羥曱基)-3-曱基丁基]氨基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-5-基)硫基]乙基}苯曱腈；(2R)-2-({2-氨基-5-[(1-苯基丙基)硫基][1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基}氨基)-4-曱基戊烷-l-醇；3-{1-[(2-氨基-7-{[(1"-1-(羥曱基)-3-曱基丁基]氨基}[1，3]噻唑并[4，5-《嘧啶-5-基)硫基]乙基}苯曱酰胺；(211)-2-{[2-氨基-5-({1-[3-(三氟曱基)苯基]乙基}硫基)[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基]氨基}-4-曱基戊烷-1-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-[(l-苯基乙基)硫基][l,3]噻唑并[4,5-J]嘧啶-7-基)(曱基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-([l-(2-氯苯基)乙基]硫基}[1，3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-l-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-([l-(3-曱氧基苯基)乙基]硫基)[l，3]噻唑并[4，5-c/]嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇；(211)-2-[(2-氨基-5-{[(15>1-苯基乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-《嘧啶-7-基)氨基]-4-甲基戊烷-l-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-([(lQ-l-苯基乙基]硫基Hl,3]噻唑并[4,5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-氟-4-曱基戊烷-1-醇；(211)-2-[(2-氨基-5-{[(15>1-(2-氟苯基)乙基]硫基}[1,3]噻唑并[4,5-化密啶-7-基)氨基]-4-氟-4-曱基戊烷-1-醇；(2R)-2-[(2-氨基-5-([(15)-l-(3-氟苯基)乙基]硫基ni，3]噻唑并[4，5-d]嘧啶-7-基)氨基]-4-曱基戊烷-1-醇；或其可藥用鹽。11.權(quán)利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其可藥用鹽，其用作藥物。12.藥物組合物，其包括權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽，以及混合有可藥用稀釋劑或載體。13.治療下述人類疾病或病癥或者降低所述疾病或病癥危險的方法，在所述疾病或病癥中對CX3CR1受體的拮抗作用是有益的，所述方法包括向患有或易患所述疾病或病癥的人給藥治療有效量的權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽。14.治療神經(jīng)變性疾病、脫髓鞘疾病、心腦血管動脈粥樣^更化癥、外周動脈疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肺部疾病例如COPD、哮喘或疼痛或者降低其危險的方法，所述方法包括向患有或易患所述疾病或病癥的人給藥治療有效量的權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽。15.治療多發(fā)性硬化或者降低其危險的方法，所述方法包括向患有或易患所述疾病或病癥的人給藥治療有效量的權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽。16.治療或預(yù)防動脈粥樣硬化的方法，所述方法通過改變斑塊組成以降低斑塊破裂和動脈粥樣血栓形成事件的危險來治療或預(yù)防動脈粥樣硬化。17.治療或預(yù)防動脈粥樣硬化的方法，所述方法通過預(yù)防和/或減少新動脈粥樣硬化損傷或斑塊的形成和/或通過預(yù)防或減緩現(xiàn)有損傷和斑塊的進展來治療或預(yù)防動脈粥樣硬化。18.權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防下述人類疾病或病癥的藥物中的用途，在所述疾病或病癥中，對CX3CR1受體的拮抗作用是有益的。19.權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防神經(jīng)變性疾病、脫髓鞘疾病、心腦血管動脈粥樣硬化癥、外周動脈疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肺部疾病例如COPD、哮喘或疼痛的藥物中的用途。20.權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防多發(fā)性硬化的藥物中的用途。21.權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防動脈粥樣硬化的藥物中的用途，所述藥物通過改變斑塊組成以降低斑塊破裂和動脈粥樣血栓形成事件的危險來治療或預(yù)防動脈粥樣硬22.權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預(yù)防動脈粥樣硬化的藥物中的用途，所述藥物通過預(yù)防和/或減少新動脈粥樣硬化損傷或斑塊形成和/或通過預(yù)防或減纟爰現(xiàn)有損傷和斑塊進展來治療或預(yù)防動脈粥樣硬化。23.制備權(quán)利要求1-10中任一項所述的式(I)化合物或其可藥用鹽的方法，所述方法包括a)使式(n)化合物與式(m)化合物反應(yīng)，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(II)其中R3、R4和115如式(1)中所定義;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(III)其中R1和R"如式(I)中所定義，并且lJ表示離去基團；或者b)使式(IV)化合物與式(V)化合物反應(yīng)，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(IV)其中R1和R"如式(I)中所定義，并且I表示離去基團;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(v)其中R3、R"和RS如式(I)中所定義；以及如果需要的話，將所得到的式(I)化合物或其其它鹽轉(zhuǎn)化為其可藥用鹽；或者將所得到的式(I)化合物轉(zhuǎn)化為其它式(I)化合物；以及如果需要的話，將所得到的式(I)化合物轉(zhuǎn)化為其旋光異構(gòu)體。全文摘要本發(fā)明披露了式(I)的新穎的5-取代的7-氨基-[1，3]噻唑并[4，5-d]嘧啶衍生物或其可藥用鹽，其中R¹，R²，R³，R⁴和R⁵如說明書中所定義，以及它們的制備方法，含有它們的藥物組合物和它們在治療中的用途。式(I)化合物是CX₃CR1受體拮抗劑，因此尤其可用于治療或預(yù)防神經(jīng)變性疾病、脫髓鞘疾病、心腦血管動脈粥樣硬化癥、外周動脈疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肺部疾病例如COPD、哮喘或疼痛。文檔編號C07D513/04GK101193897SQ200680020072公開日2008年6月4日申請日期2006年4月3日優(yōu)先權(quán)日2005年4月6日發(fā)明者丹尼爾·索恩,岡納·諾得瓦爾,托拜厄斯·賴因,科林·雷申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司