3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物及其制備方法和用圖
【專利摘要】本發(fā)明屬于化學(xué)醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物及其制備方法和用途。本發(fā)明提供了一種3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物，其結(jié)構(gòu)如式Ⅰ所示。本發(fā)明還提供了3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物的制備方法和用途，包含該衍生物的藥物組合物，以及該化合物和藥物組合物用于治療和預(yù)防腫瘤的用途。
【專利說明】
3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物及其制備方法和用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于化學(xué)醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物及其制備方法 和用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 蛋白激酶是一類重要的磷酸轉(zhuǎn)移酶，其功能是催化腺苷三磷酸（ATP)末端的 Y -磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到特定底物蛋白質(zhì)的氨基酸殘基上，使蛋白質(zhì)磷酸化，從而發(fā)揮其生理生 化功能。蛋白激酶是細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)鍵組件。蛋白激酶參與調(diào)控多個細(xì)胞過程，包 括細(xì)胞的生長、能量代謝、細(xì)胞周期、轉(zhuǎn)錄、凋亡以及分化等。此外，蛋白激酶在維持細(xì)胞間 聯(lián)系、體內(nèi)平衡、免疫系統(tǒng)功能等方面也起到至關(guān)重要的作用。蛋白激酶的異常調(diào)節(jié)與多種 疾病特別是腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。蛋白激酶已成為重要的疾病治療靶標(biāo)，引起了廣泛的關(guān) 注。
[0003] 至2001年首個酪氨酸蛋白激酶藥物伊馬替尼（Imatinib)上市以來，蛋白激酶 藥物已成為全球藥物市場增長最快的單元，截止2014年已有20多個蛋白激酶藥物在全 球范圍批準(zhǔn)上市，其中包括十余種腫瘤治療藥物，例如伊馬替尼（Imatinib)，吉非替尼 (Gefitinib)，厄洛替尼（Erlotinib)，索拉非尼（Sorafenib)，舒尼替尼（Sunitinib)，達(dá)沙 替尼（Dasatinib)，尼洛替尼（Nilotinib)，拉帕替尼（Laptinib)，帕唑帕尼（Pazopanib)和 瑞格非尼（Regorafenib)等。蛋白激酶類藥物的高研發(fā)成功率，特別是多種蛋白激酶靶向 抗腫瘤藥物的研發(fā)成功，促使其成為科學(xué)及制藥工業(yè)界的熱點(diǎn)研究方向。
[0004] 當(dāng)前蛋白激酶藥物的研發(fā)雖然取得了巨大的成功，但仍然存在很大的發(fā)展空間和 潛力。特別是研發(fā)新型的蛋白激酶抑制劑用于難治性腫瘤、耐藥性腫瘤、高轉(zhuǎn)移性腫瘤的治 療，例如三陰性乳腺癌、耐藥性肺癌、肝癌、胰腺癌、黑色素瘤、多種白血病等，仍然是當(dāng)前的 研究熱點(diǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供了一種3-乙協(xié)某吡啤并嘧啶衍牛物，其結(jié)構(gòu)如式I所示：
[0006]
[0007] 其中，&為C4烷基、
[0008] 仏為_H、C廣C 8烷基、R8取代的C 3~C 8環(huán)烷基、^~^環(huán)氧 烷基、
· .、 '--' -V 1 · % w Λ ' ·Ρ^ ν--，. I
[0009] R3~1?7獨(dú)立地為_H、C廣Cs烷基、-〇H、C廣Cs烷氧基、鹵素
Η Η A-nyn'r14： Ο ;
[0010] Rs~R n獨(dú)立地為-η、C廣C s烷基、鹵素、-OH、
[0012] R15~R19獨(dú)立地為-H、（：廣Cs烷基、-OH、（：廣C s烷氧基、鹵素、-CF3、-0CF3、
[0013] R2。~R 3S獨(dú)立地為-Η、鹵素、C廣C s烷基、C廣C 8環(huán)烷基、-0CF 3或-CF 3;
[0014] R39~R 42獨(dú)立地為C C s烷基、C 3~C s環(huán)烷基或C C s羥基烷基；
[0015] η = 0 ~6。
[0016] 作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，&為-Η或 R2為-H、C廣 C4烷基、R8取代的C 3~C 8環(huán)烷基、友C3~C 8環(huán)氧烷基、
Η R3~R 7獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基、鹵素、&NYR12 〇 、
Rs~R η獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、鹵素、-OH、 R12~R 14獨(dú)立地為 i·
R15~R 19獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3、
~R 3S獨(dú)立地為-H、鹵素、 (；~C 4烷基、C C 4環(huán)烷基、-OCF 3或-CF 3;R 39~R 42獨(dú)立地為C C 4烷基、C 3~C s環(huán)烷 基或(；~C 4羥基烷基；n = 0~4。 〇
[0017] 優(yōu)選的，1^為-H 或 ，?. 1?2為_!1、（：1~（：4烷基、 Rs取代的c 3~c s環(huán)烷基、c3~c s環(huán)氧烷基、 R3~R 7獨(dú)立地 卜 -、 ' 1 、 ^ ^
s ^ 、' 1 '*-^ 為-Η、(；~C4烷基、-OHJf C4烷氧基、鹵素、
L~Rn獨(dú)立 υ w ΒΧ υ. > 地為-H、Ci~C4烷基、-0Η.
R12~R 14獨(dú)立地為

^ R 19獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基、鹵 素、-CF3、-0CF3
R2。~R38 獨(dú)立地 為-H、鹵素 、(；~C 4烷基、C C 4環(huán)烷基、-0CF 3或-CF 3;R 39~R 42獨(dú)立地為C C 4烷基、 C3~C s環(huán)烷基或C丨~C 4羥基烷基；n = 0~4。
[0018] 進(jìn)一步優(yōu)選的，心為-H或 ：?^.化為-Η、C廣C 4烷基、 ?。/仏取代的c 3~C 8環(huán)烷基、X~^ C3~C 8環(huán)氧烷基、 R3~R 7獨(dú) 立地為-Η、（；~C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基、鹵素
Rs~R n獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基、-OH、
R12~R 14 獨(dú)立地為
-K A R15~R 19獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3、 ^ ?^38' I
I。~R ；?獨(dú)立地為-Η、鹵素、 Ci~C 4烷基、C C 4環(huán)烷基、-0CF 3或-CF 3;R 39~R 42獨(dú)立地為C C 4烷基、C 3~C s環(huán)烷 基或(；~C 4羥基烷基；η = 0~4。 _9] 更進(jìn)一步優(yōu)選的，&為-Η或 R2為-Η、C廣C 4烷基、 '， Rs取代的C 3~C 8環(huán)烷基、分、.·^ C3~C 8環(huán)氧烷基、
~R 7獨(dú) 立地為-H、（：廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基、鹵素、
Rs~R n獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、
（12~R 14
獨(dú)立地> 或
~R 19獨(dú)立地為-H、C C 4烷基、-OH、C C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3、 ^ ?38 ：；
R38獨(dú)立地為-H、鹵素、（^~C 4烷基、（^~（：4環(huán)烷基、-0CF3 或-CF3;n = 0 ~2。
[0020]最優(yōu)的，Rj -H 或1?2為_11、（：1~（：4烷基、 ( R8取代的C 3~C 8環(huán)烷基、 C3~C 8環(huán)氧烷基、
R3~R 7獨(dú)立 地為-H、Ci~C 4烷基、-0H、C i~C 4烷氧基、-F、-C1.
3~ Rn獨(dú)立地為-H、C C 4烷基、-OH、
> R12~R 14獨(dú)立地為 *i a -V|iJ 、 、迎*以 ' '^0 、 " '?
^ Wk 'ao R19獨(dú)立地為-Η、(^~C4烷基、-(^、(^~C4烷氧基、_F、_
R2。~R 38獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基或-CF 3;n = 0或1。
[0021] 上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物，當(dāng)&為^Ιγβ?2:時，其結(jié)構(gòu)如式II所示： 〇
[0022]
0
[0023]其 中，RiS-H 或 \兒、R2 為 _^1、（：1~（：4烷基、 Rs取代的c 3~c 8環(huán)烷基、七^。，c3~c 8環(huán)氧烷基、
η = 0 ~4 ;R3~R 5、 尺7獨(dú)立地為-H、（^~C4烷基、-OH、（^~C4烷氧基或鹵素；R 8~Rn獨(dú)立地為-H、（^~ C4烷基、-OH、
' R15~R 19獨(dú)立地為-H、C C 4烷
B . 基、-0H、Ci~C 4烷氧基、鹵素 、_CF 3、-〇CF3、
《2。~R 38獨(dú)立地為-H、 (；~C4烷基或-cf3。
[0024] 優(yōu)選的，R j - H 或 1?2為_11、（：1~（：4烷基、 Rs取代的C 3~C 8環(huán)烷基、C3~C 8環(huán)氧烷基、
ι = 0 ~4 ;R3~R 5、 馬獨(dú)立地為-H、（^~C4烷基、-OH、（^~C4烷氧基或鹵素；RS~R n獨(dú)立地為-H、（^~ C4烷基、_〇Η、

~R 19獨(dú)立地為-Η、C C 4燒
基、-OH、(：廣C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-〇CF: w~R 38獨(dú)立地為-Η、C!~ C4烷基或-cf3。
[0025] 優(yōu)選的，&為-Η或私為C廣C 4烷基、R s取代的C 3~C 8環(huán)烷基、V、。/' C3~C 8環(huán)氧烷基、
- '-- 、' - 、 - ， η = 0~4 ;R8~R η獨(dú)立地為-Η、C C 4烷基、-OH、
R3~R 5、仏獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基或鹵素 ；R 12為 Rl5 ~R 19 R1S R1S 、
日30、~4 K33、K36 頭 Κ38 ; 獨(dú)立地為-Η、（^~C 4烷基、-〇H、C C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-〇C R20~R 38獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基或-CF 3。
[0026] 進(jìn)一步優(yōu)選的，&為-Η或；私為C廣C 4烷基、R s取代的C 3~ t 、 V 〇8環(huán)烷基、
=0~4 ;RS~R η獨(dú)立地為-H、C C 4烷基、-OH、
R3~R 5、馬獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基或鹵素 ；R 12為
Ris~ R19獨(dú)立地為-H、c廣C 4烷基、-〇H、C廣C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF
R2〇~R 38獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基或-CF 3。
[0027] 再進(jìn)一步優(yōu)選的，札為-Η或：^，馬為C廣C 4烷基、R s取代的C 3~ C 8環(huán)烷基、
=0~2 ;RS~R η獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH
R3~R 5、&獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基或鹵素 ；R 12為
Rl5~R 19 獨(dú)立地為-H、（^~C 4烷基、-OH、C C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-〇CF3、
R20~R 3S獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基或-CF 3。
[0028] 更進(jìn)一步優(yōu)選的，札為-Η或：^.馬為C C 4烷基、R s取代的C 3~C 8環(huán)烷基、
=0或1 ;R8~Rn獨(dú)立 〇 〇 地為-Η、(^~(：4烷基、-OH、廠|-§一 R3~1?5為獨(dú)立地為烷基、-OHXfC^ OH 或 〇 - 烷氧基或鹵素 ；RiJ

，R 19獨(dú)立地為-Η、C C 4烷基、-OH、C C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3、
2。~R 3S獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基或-CF 3〇 〇
[0029] 優(yōu)選的，R3~R5、馬獨(dú)立地為-Η、（：廣C4烷基或鹵素 ；RA -Η或R2為-Η、（；~C 4烷基、\1。七Rs取代的C 3~C 8環(huán)烷基、v、。，C3~C s環(huán)氧烷
基、 η = 0 ~4 ; '~~ Λ ' ' - ?
R8~R η獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基、-OH、 R12為
： R19獨(dú)立地為-H、c廣C 4烷基、-〇H、C廣C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3- R2〇~R 38獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基或-CF 3。
[0030] 進(jìn)一步優(yōu)選的，R3~R 5、馬獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基、-F或-Cl ;R A -Η或R2為I C 1~C 4烷基、\1。上、R8取代的C 3~C8環(huán)烷基、：^。' C3~C8環(huán)
11 氧烷基. n = 0~4; --- -v - 、 ? 9 Rs~R n獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、
R12為

R19獨(dú)立地為-H、c廣C 4烷基、-〇H、C廣C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3、 R2〇~R 38獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基或-CF 3。
[0031] 更進(jìn)一步優(yōu)選的，R3~R 5、馬獨(dú)立地為-η、甲基或-Cl ;R A -Η或 R2為-H、C廣C 4烷基、、Rs取代的C 3~C 8環(huán)烷基、.Vvf C3~C s環(huán)氧烷 基、
η = 0 ~4 ; Πrv A Rs~R n獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、
R12為
L5~ R19獨(dú)立地為_H、C廣C 4烷基、-〇H、C廣C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3
R2〇~R 38獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基或-CF 3。
[0032] 優(yōu)選的，R15~R 19獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、C廣C 4烷氧基、 鹵素、_CF3、-0CF3或 、Rl為-η 或 尺2為-η、C 1~C 4燒 基、馬取代的C 3~C 8環(huán)烷基、w、， C3~C 8環(huán)氧烷基、
η = 0 ~4 ;R3~R 5、 馬獨(dú)立地為-H、（^~C4烷基、-OH、（^~C4烷氧基或鹵素；RS~R n獨(dú)立地為-H、（^~ C4烷基、_〇H、

R2。~R 38獨(dú)立地為-Η、c c 4燒 基或-CF3。
[0033] 進(jìn)一步優(yōu)選的，R15~R 19獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基、甲氧 /\ 〇 基、-F、-Cl、-CF3、-0CF3或〉《―心為-Η 或 ，? 尺2為-Η、c 1~ C4烷基、R8取代的C 3~C 8環(huán)烷基、C3~C 8環(huán)氧烷基、 ?11
η = 0 ~4 ;R3~R 5、 尺7獨(dú)立地為-Η、（^~C4烷基、-OH、（^~C4烷氧基或鹵素；R 8~Rn獨(dú)立地為-Η、（^~ C4烷基、-0Η、

R2。~R 38獨(dú)立地為-H、c c 4焼 基或-CF3。
[0034] 最優(yōu)的，札為-Η或私為C廣C 4烷基、R s取代的C 3~C 8環(huán)烷基、
η = 0 或 1 ;R3~R 5、R?
獨(dú)立地為-H、甲基或-Cl ;RS~R n獨(dú)立地為-H、C C 4烷基、-OH. R12為 5
15 ~R 19 獨(dú)立地為-H、（：廣C4烷基、甲氧基、-F、-Cl、-CF3、-0CF3或. R2。~R38獨(dú)立地 1 ' * 為-^(^~(^烷基或乂？^ 〇
[0035] 上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物，當(dāng)&為?時，其結(jié)構(gòu)如式III所示： I η
[0036]
[0037] 其中，R 1為-Η或 尺2為-!1、（：1~（：4烷基、 *3iA〇J<\ Rs取代的c 3~c 8環(huán)烷基、c3~c 8環(huán)氧烷基、
η = 0 ~4 ; R3~R 5、馬獨(dú)立地為-Η、C C 4烷基、-OH、C C 4烷氧基或鹵素 ；R s~R η獨(dú)立地為-Η、 C!~C 4烷基、-OH、 ~ ^ -Λ ~ ：?·
…iy ' *'l& .、. ' 廣R 19獨(dú)立地為-H、C廣C 4燒 ?d ?υ 、 vm Λ. ~
00 Λ 一。 vu ; 基、-0!1、(：1~(：4烷氧基、鹵素、-0卩3、-(^卩 3、
1 R2。~R3S獨(dú)立地為-HXr c4烷基或-cf3。
[0038] 優(yōu)選的，R2為C廣C 4烷基、_ R8取代的C 3~C 8環(huán)烷基、友
C3~C s環(huán)氧烷基、 I. η = 0~4 ;RS、 > 馬獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基、-0Η、夕&為-H或 、. ------
、 ?. R3~R 5、R?獨(dú)立地為-H、c廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基或鹵素 ；R 13為 1. ；>· U蟲 i.o I。. 、 ^ ν ν
v __ v 9 立地為-Η、(；~C 4烷基、-〇H、C i~C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3
~ R38獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基或-CF 3。
[0039] 進(jìn)一步優(yōu)選的，R2為Ci~C4烷基、^ 1?8取代的C3~08環(huán)烷基、C3~ Cs環(huán)氧烷基、
Rs、馬獨(dú)立地為-H、C C 4燒 基、-OH. :1為_H或R3~R5、R7獨(dú)立地為_H、C丨~ C4烷基、烷氧基或鹵素；R13為 R 19獨(dú)立地為-H、C C 4烷基、-〇H、C C 4烷氧基、 '、：
9. 鹵素、-CF3、-OCF:
~R 38獨(dú)立地為-Η、C C 4烷基或-CF 3。
[0040] 再進(jìn)一步優(yōu)選的，1?2為C廣C 4烷基、R 8取代的C 3~C 8環(huán)烷基、 X-〇/ c3~C s環(huán)氧烷基、. Rs、R9獨(dú)立地為-H、 Ci~C 4烷基、-OH、
1為-H或 R3~R 5、仏獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基或鹵素 ；R 13為
~R 19 r
獨(dú)立地為-Η、（^~C 4烷基、-OH、C C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-〇CF3 R2〇~R 38獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基或-CF 3。
[0041] 更進(jìn)一步優(yōu)選的，私為c C 4烷基、R s取代的C 3~C 8環(huán)烷基、C3~C s 環(huán)氧烷基、
，R8、R9獨(dú)立地為 -H、C C 4烷基、
心 為-H或）^. R3~R 5、馬獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基或鹵素 ；R 13為 ?
R19獨(dú)立地為_H、C廣C 4烷基、-〇H、C廣C 4烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3、
R2〇~R 38獨(dú)立地為-Η、C廣C 4烷基或-CF 3。
[0042] 優(yōu)選的，R3~1?5、1?7獨(dú)立地為-Η、（^~（： 4烷基、-0Η或鹵素 Α為-Η或；^. 私為-!1、（：1~（：4烷基、\1^1<馬取代的（：3~（： 8環(huán)烷基、：}^#(：3~（：8環(huán)氧烷基、 > >

，
*2 >： ? R15~R 19獨(dú)立地為-H、C C 4烷基、-CF 3或. R2。~R 3S獨(dú)立地為-H或C C 4烷 基。
[0050] 上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物，當(dāng)&為
k時，其結(jié)構(gòu) 如式IV所示：
[0051]
IV
[0052] 其中，R 1為-Η或 尺2為-!1、（：1~（：4烷基、 仏取代的c 3~c 8環(huán)烷基、C3~C 8環(huán)氧烷基、
8
ο
[0058] 進(jìn)一步優(yōu)選的，R3~1?5為獨(dú)立地為烷基、-0Η或-Cl ;1為-!1或R2

￥
[0064]其中，R 1 為-Η 或 R2 為 _H、Ci~（：4烷基、
立地為-Η、(；~C4烷基、-OHXr C4烷氧基或鹵素；RS~Rn獨(dú)立地為-HXr C4烷基、-OH、


[0076] 最優(yōu)的，&為-H ;R 2為C廣C 4烷基或-丨<3-RS _ r3~r 5、馬獨(dú)立地為-η、C廣 c4烷基或-cl ;R 9為C C 4烷基；R 15~R 19獨(dú)立地為-Η或-CF 3。
[0077] 上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物，其結(jié)構(gòu)式為：
[0078]

r>c.
[0081] 本發(fā)明還提供了上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物的制備方法：
[0082] 當(dāng)R6為5^丫~時，式II所示化合物的合成路線為： 「 〇 1 ：t2
[0084] 當(dāng)Rj 時，式III所示化合物的合成路線為： 5 8 4 2
[0085]
[0086] 當(dāng)R6;
七時，式IV所示化合物的合成路線為：
[0087]
?17 8
[0088] 當(dāng)R6)
~時，式V所示化合物的合成路線為：
[0089] 5 6
3
[0090] 上述反應(yīng)式中的反應(yīng)條件為：
[0091] a、化合物1在通常的鹵代試劑（如NIS (N-碘代丁二酰亞胺）、NBS (N-溴代丁二酰 亞胺）、Br2、12、IC1、IBr)進(jìn)行鹵代反應(yīng)制備得到化合物2。
[0092] 13、私的鹵代烷（溴帶或者碘代）或相應(yīng)的磺酸酯（甲磺酸酯、對甲苯磺酸酯、對硝 基苯磺酸酯等）在堿性條件下（如KOH、NaOH、K2C03、Na2C0 3, Cs2C03、NaH)與化合物2取代 制得化合物3。
[0093] c、相應(yīng)的含羧基化合物在通常的縮合條件下（如縮合劑法、混合酸酐法、活化發(fā) 等）與相應(yīng)的含氨基化合物縮合得到對應(yīng)的以酰胺鍵連接的化合物7~10。
[0094] d、使相應(yīng)的中間體在過渡金屬催化下與一端帶保護(hù)基團(tuán)的炔試劑進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng) 得到相應(yīng)的中間體，然后再脫保護(hù)得到相應(yīng)的含有炔基的化合物4、化合物6、化合物7、化 合物10及化合物13。
[0095] e、相應(yīng)的含鹵素的中間體與含炔基的中間體在過渡金屬催化下進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)得 到通式II、111、IV、V所示化合物，偶聯(lián)反應(yīng)采用鈀催化劑（如Pd4 (PPh3) 4、PdAc2、Pd2 (dba) 3、 ?(^?1!3(：12等）、銅鹽（如氯化亞銅、溴化亞酮、碘化亞銅等），和適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)堿或者無機(jī)堿 (如三乙胺、DIPEA (二異丙基乙胺）、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉等）在適當(dāng)溶劑（如THF (四 氫呋喃）、甲苯、DMF(N，N-二甲基甲酰胺）、1，4_二氧六環(huán)等）中于20~150°C反應(yīng)得到。
[0096] f、化合物12在相應(yīng)的醇溶液（如甲醇、乙醇等）、濃硫酸催化下得到相應(yīng)的酯化中 間體。
[0097] g、化合物14在適當(dāng)?shù)膲A（如三乙胺、DIPEA等）和溶劑（如EA (乙酸乙酯）、THF、 二氯甲烷等）及溫度下（0-50度）與三光氣反應(yīng)得到化合物15。
[0098] h、化合物15與化合物6在適當(dāng)?shù)娜軇ㄈ鏓A(乙酸乙酯）、THF、二氯甲烷、甲苯、 DMF等）中于20~120°C反應(yīng)得到得到化合物16。
[0099] 其中，&為-H、C廣C 4烷基、&或^艾R2為-H、C廣C 8燒 基、R8取代的C 3~C 8環(huán)烷基、C3~C 8環(huán)氧烷基、 9
Η R3~R 7獨(dú)立地為-Η、C廣C s烷基、-OH、C廣C s烷氧基、鹵素、\NYR12 ο 、
Rs~R n獨(dú)立地為-H、C廣C 8烷基、鹵素、-OH、
分R12~R 14獨(dú)立地為
R15~R 19獨(dú)立地為-H、C廣C s烷基、-OH、C廣C s烷氧基、鹵素 、-CF 3、-0CF3、
R 3S獨(dú)立地為-Η、鹵素、 C s烷基、C C 8環(huán)烷基、-0CF 3或-CF 3;R 39~R 42獨(dú)立地為C C s烷基、C 3~C s環(huán)烷 基或(；~C s羥基烷基；η = 0~6。
[0100] 本發(fā)明上述的3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物，包括了它們的同位素化合物、外消旋 體、旋光活性異構(gòu)體、多晶型形式或其混合物。
[0101] 本發(fā)明還提供了上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物藥學(xué)上可接受的鹽。
[0102] 本發(fā)明還提供了本發(fā)明化合物的前藥，依據(jù)本發(fā)明，前藥是上述化合物的衍生物， 它們自身可能具有較弱的活性或甚至沒有活性，但是在給藥后，在生理?xiàng)l件下（例如通過 代謝、溶劑分解或另外的方式）被轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的生物活性形式。
[0103] 本發(fā)明還提供了上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物藥學(xué)上可接受的水合物。
[0104] 本發(fā)明還提供一種藥物組合物，是由本發(fā)明提供的上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍 生物添加藥學(xué)上可以接受的輔助性成分制備而成的。本發(fā)明提供的3-乙炔基吡唑并嘧啶 衍生物結(jié)構(gòu)如式I~V所示。
[0105] 本發(fā)明還提供了上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物、它的鹽或水合物在制備激酶 抑制劑中的用途。
[0106] 進(jìn)一步的，上述激酶抑制劑為抑制SRC家族絡(luò)氨酸蛋白激酶（Blk絡(luò)氨酸蛋白激 酶、Fgr絡(luò)氨酸蛋白激酶、Frk絡(luò)氨酸蛋白激酶、Fyn絡(luò)氨酸蛋白激酶、Hck絡(luò)氨酸蛋白激酶、 Lck絡(luò)氨酸蛋白激酶、Lyn絡(luò)氨酸蛋白激酶、c-SRC絡(luò)氨酸蛋白激酶、YES酪氨酸蛋白激酶）、 FLT3 (人FMS樣酪氨酸激酶3)、Abl (Abl絡(luò)氨酸蛋白激酶）、VEGFR1 (血管內(nèi)皮生長因子受體 1)、VEGFR2(血管內(nèi)皮生長因子受體2)、VEGFR3(血管內(nèi)皮生長因子受體3)、RET(RET受體酪 氨酸激酶）、c-RAF(c-RAF絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶）、B-RAF(B-RAF絲氨酸/蘇氨酸蛋白激 酶）、c_KIT (酪氨酸蛋白激酶KIT)、H)GF α (血小板衍生生長因子受體a )、TOGF Μ血小板 衍生生長因子受體β )、FGFR1 (成纖維細(xì)胞生長因子受體1)、FGFR2 (成纖維細(xì)胞生長因子 受體2)、FGFR3 (成纖維細(xì)胞生長因子受體3)、EphA2 (EphA2酪氨酸激酶）、EphB2 (EphB2酪 氨酸激酶）、EphB4 (EphB4酪氨酸激酶）、ALK (間變性淋巴瘤激酶）、Met (Met酪氨酸激酶） DDR1 (DDR1絡(luò)氨酸激酶）、DDR2 (DDR2絡(luò)氨酸激酶）、Btk (Btk絡(luò)氨酸激酶）、BMX (BMX絡(luò)氨酸 激酶）、TAK1 (轉(zhuǎn)化生長因子激酶1)中至少一種激酶的藥物。（請根據(jù)實(shí)際情況修改或刪 減上述激酶的種類）
[0107] 本發(fā)明還提供了上述3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物、它的鹽或水合物在制備抗腫 瘤藥物中的用途。
[0108] 進(jìn)一步的，上述腫瘤為白血病或?qū)嶓w瘤。
[0109] 進(jìn)一步的，上述實(shí)體腫瘤為肺癌、乳腺癌、胰腺癌、黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、肝癌、甲 狀腺瘤、宮頸癌、胃癌或結(jié)直腸癌中的至少一種。其中，上述的白血病為急性髓性白血病或 混合型白血病。
[0110] 本發(fā)明提供的3-乙炔基吡唑并嘧啶衍生物對人肺癌、人乳腺癌、人胰腺癌、人惡 性黑色素瘤、人白血病等腫瘤均表現(xiàn)出了良好的抑制效果。
【附圖說明】
[0111] 圖1化合物3對裸小鼠的體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。
[0112] 圖2化合物31對裸小鼠的體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。
[0113] 圖3化合物31在不同濃度下對FLK1轉(zhuǎn)基因斑馬魚的血管抑制情況。
【具體實(shí)施方式】
[0114] 實(shí)施例13-乙炔基-1-異丙基-1H-吡唑并[3,4_d]嘧啶-4-胺（中間體4-1)的 制備
[0115]
[0116] 第一步，制備3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺：
[0117] 1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺（20g，148. Ommol，1. Oeq)于三 口瓶中，加入 150mL DMF(N，N-二甲基甲酰胺），攪拌并氮?dú)庵脫Q3次，加入NIS (N-碘代丁二酰亞胺） (50g，222. 0mmol，1.5eq)后于80°C反應(yīng)，TLC監(jiān)控，22h后反應(yīng)完畢。停止反應(yīng)，減壓濃縮 DMF至剩一半，加入飽和Na203SyjC溶液150mL攪拌，減壓過濾，濾餅依次用飽和Na 203S2水 溶液及水洗滌至濾液無色，真空干燥得到目標(biāo)產(chǎn)物，淡黃色粉末（33. 9g，收率87.8%)。4 NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 8. 17 (s，1H)。MS m/z (ESI) : 262. 1 [M+H]。
[0118] 第二步，制備3-碘-1-異丙基-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺：
[0119] 3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺（5g，19. 2mmol，1. Oeq)于三口 瓶中， 加入40mL DMF及碳酸鉀（5.3g，38.4mmol，2.0eq)后，用氮?dú)庵脫Q3次，加入2-溴丙烷 (1.9mL，20. lmmol，1.05eq)后于80°C反應(yīng)，TLC監(jiān)控，4h后反應(yīng)完畢。停止反應(yīng)，減壓蒸去 DMF，用DCM(二氯甲烷）及水萃取3次，合并DCM層后蒸干，用體積比為EA (乙酸乙酯）： PE(石油醚）=1 : 3的混合溶劑重結(jié)晶得目標(biāo)產(chǎn)物，重結(jié)晶母液中目標(biāo)產(chǎn)物可經(jīng)柱層析分 離得到，淡黃色粉末（5. 4g,收率92.8%)。蟲匪1?(4001抱，0150-(16)5 8.19(8，1!1)，4.99- 4. 93 (m，1H)，1. 42 (d，J = 6. 7Hz，6H)。MS m/z (ESI) : 304. Ο [M+H]。
[0120] 第三步，制備1-異丙基-3-((三甲基甲硅烷基）乙炔基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧 陡_4_胺：
[0121] 3-碘-1-異丙基-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺（5. 4g, 17. 8mmol, 1. Oeq) 于三 口瓶中，加入 DMF40mL，CuI(339mg，l.78mmol，0.1eq)，Pd(PPh3) 4(lg，0.89mm 〇1，0· 05eq),氮?dú)庵脫Q3次后加入三乙胺（5mL, 35. 6mmol, 2. Oeq),三甲基娃乙炔 (2. 65mL, 18. 7mmol，L 05eq)，于80°C反應(yīng)2. 5h，TLC監(jiān)控反應(yīng)完畢后減壓蒸去DMF，余下殘 余物經(jīng)柱層析分離得目標(biāo)產(chǎn)物，直接用于下步反應(yīng)。MS m/z (ESI) :274. 2 [M+H]。
[0122] 第四步，制備3-乙炔基-1-異丙基-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺：
[0123] 1-異丙基-3-((三甲基甲硅烷基）乙炔基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺于 20mL MeOH(甲醇）中，加入碳酸鉀（4. 9g，35. 6mmol，2. Oeq)室溫攪拌10min，TLC監(jiān)控反應(yīng) 完畢，減壓蒸去MeOH后用水分散，DCM洗滌水層3次，合并DCM層，蒸干后經(jīng)柱層析分離得中 間體4-1，淡灰色粉末（L6g，收率44.7%)。蟲匪1?(4001抱，0150-(16)5 8.22(8，1!1)，5.02- 4. 98 (m，1H)，4. 62 (s，1H)，1. 44 (d，J = 6. 7Hz，6H)。MS m/z (ESI) : 202. 1 [M+H]。
[0124] 實(shí)施例2~10中間體4-2~4-10的制備
[0125] 采用不同鹵代烷烴與1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺反應(yīng)，添加碳酸銫、碳酸鉀、 DIPEA (二異丙基乙胺）或者其他無機(jī)或有機(jī)堿，PdCl2(PPh3)2或Pd(PPh 3)4等原料，通過與 制備中間體1所述類似的方法得到以下中間體4-2~4-10。
[0126]
[0128] 實(shí)施例113-碘-1-(1-(甲磺酰）哌啶-3-基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺 (中間體4-11)的制備
[0129]
[0130] 第一步，制備叔丁基-3-((甲磺酰）氧代）哌啶-1-羧酸酯：
[0131] N-Boc-3-羥基脈陡（2. lg, lOmmol, 1. Oeq), DIPEA (2. lmL, 15mmo 1, 1. 5eq)于 20mL DCM中，攪拌，降溫至0°C后緩慢滴加甲磺酰氯（1. OmL，13mmol，1. 3eq)加畢后自然反應(yīng)至 室溫。然后反應(yīng)液依次用1MHC1溶液，飽和碳酸氫鈉水溶液，飽和氯化鈉水溶液以及水洗 滌，DCM層經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾后蒸干得產(chǎn)品，黃色固體（2. 65g，收率95. 1% )。MS m/ z (ESI) :280. 1[M+H]。
[0132] 第二步，制備叔丁基-3-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-1-基）哌 啶-1-羧酸酯：
[0133] 3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺（2. 4g，9. 2mmol，L Oeq)，叔丁基-3-((甲 磺酰）氧代）哌陡-1-羧酸酯（3. lg, llmmol, 1. 2eq)，碳酸銫（6. 0g, 18. 4mmol, 2. Oeq)于 50mL DMF中，氮?dú)庵脫Q3次后80°C反應(yīng)，TLC監(jiān)控3h后反應(yīng)完畢。蒸干DMF，水分散，DCM 萃取至水層無產(chǎn)物，合并DCM層，蒸干后經(jīng)柱層析分離得目標(biāo)產(chǎn)物，淡黃色固體（2. 9g，收率 73.4%)。4匪1?(4001抱，0)(：13)38.31(8，1!1)，6.12(8,2!1)，4.78-4.70(111，1!1)，4.31〇^· s, 1H), 4. 12 (br. s, 1H), 3. 36 (br. s, 1H), 2. 83 (t, J = 12. 0Hz, 1H), 2. 30-1. 94 (m, 2H), L 87 ( d, J = 13. 0Hz, 1H)，1. 74-1. 54 (m, 1H)，1. 44 (s, 9H)。MS m/z (ESI) : 445. 1 [M+H]。
[0134] 第三步，制備3-碘-1-(哌啶-3-基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺：
[0135] 叔丁基-3-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-1-基）哌啶-1-羧酸酯 (2. 9g)于甲醇35mL中溶解，加入4MHC1二氧六環(huán)溶液35mL，室溫攪拌8h后析出固體，然 后將反應(yīng)液降溫至〇°C后減壓過濾，濾餅分散于水中，調(diào)PH至8后析出固體，減壓過濾，水 洗固體，固體于乙醇中，減壓蒸去乙醇后真空干燥得目標(biāo)產(chǎn)物（2. 2g，收率93. 1% )。MS m/ z (ESI) :345. 1 [M+H]。
[0136] 第四步，制備3-碘-1-(1-(甲磺酰）哌啶-3-基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧 陡_4_胺：
[0137] 3-碘-1-(哌啶-3-基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺 (172. lmg，0.5mmol，l.Oeq)于 4mL DCM 中，加入 DIPEA(129.24mg，1.0mmol，2.0eq)后于(TC 攪拌，緩慢滴加甲磺酰氯（57. 3mg，0. 5mmol，1. Oeq)，加畢后TLC，確認(rèn)反應(yīng)完畢后反應(yīng)液依 次用飽和碳酸氫鈉水溶液，飽和氯化鈉水溶液以及水洗滌，DCM層經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾 后蒸干得中間體4-11，白色粉末（197. 8mg，收率93.7%)。4匪1?(4001抱，0150-(16)5 8· 23 (s, 1H), 4. 83-4. 65 (m, 1H), 3. 69 (d, J = 7. 2Hz, 1H), 3. 59 (d, J = 11. 1Hz, 1H), 3. 07 (t, J =10.9Hz, 1H), 2.91 (s，3H), 2.80 (t，J = 10.9Hz, 1H), 2. 45-2. 00 (m，2H), 1.95 (d，J = 13. 6Hz, 1H)，1. 76-1. 59 (m, 1H)。MS m/z (ESI) : 423. 0 [M+H]。
[0138] 實(shí)施例12~19中間體4-12~4-19的制備
[0139] 以不同烷基醇或烷基磺酸酯與1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺反應(yīng)，添加碳酸銫、 碳酸鉀、其他無機(jī)或有機(jī)堿，甲磺酰氯或者對硝基甲磺酰氯，HC1乙醇溶液，HC1乙醚溶液， 三氟乙酸等原料，通過與制備中間體4-11所述類似的方法得到以下中間體4-12~4-19。
[0140]
[0141]
[0142] 實(shí)施例20 (R)-3-碘-1-(1-甲基哌啶-3-基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺 (中間體4-20)的制備
[0143]
[0144] (R)-3-碘-1-(哪哫-?-盎
吡卩生開L3, 4-d]嘧啶-4-胺 (750mg，2mmol，1.0eq)溶于18mL 1,2-二氯乙燒：甲醇=8 : 1(體積比）的混合溶劑 中，緩慢滴加甲醛水溶液（37 %，0. 82mL，lOmmol，5. Oeq)，加畢后室溫攪拌lOmin，分兩批 加入NaBH3CN (502. 7mg，8mmol，4. Oeq)，lOmin后TLC監(jiān)控反應(yīng)完畢，向反應(yīng)液中滴加水 3mL，加畢后減壓蒸干溶劑，殘余物分散于水中，調(diào)pH至堿性，過濾，水洗固體，然后固體 于乙醇中減壓蒸干，殘余物經(jīng)重結(jié)晶得中間體4-20,白色粉末（500mg，收率70. 0% )。4 NMR (400MHz, DMS〇-d6) δ 8. 20 (s, 1H), 4. 73 - 4. 66 (m, 1H), 4. 41 (t, J = 4. 8Hz, 1H), 3. 48-3. 4 l(m, 1H), 2.88 (dd，J= 11. 1,3.7Hz, 1H), 2.77 (d，J= 11. 1Hz, 1H), 2.21 (s，3H), 1.97-1.72( m，3H)，1. 71-1. 61 (m，1H)。MS m/z (ESI) : 359. 1 [M+H]。
[0145] 實(shí)施例21~24中間體4-21~4-24的制備
[0146] 以不同帶芳基的仲胺與1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺反應(yīng)，添加烷基醛或者芳 基醛等原料，通過與制備中間體4-20所述類似的方法得到以下中間體4-21~4-24。
[0147]
[0148] 實(shí)施例25〇?)-1-(〇?)-3-(4-氨基-3-碘-1!1-吡唑并[3,4-(1]嘧啶-1-基）哌 啶-1-基）-2-羥基丙烷-1-酮（中間體4-25)的制備
[0149]
[0150] 將 D-2-羥基閃酸 U57mg, 1. 74mmo 1, 1. 2eq), ΗΟβΤ U_ 羥基苯并三唑） (235. lmg, 1. 74mmol，1. 2eq)，EDCI (1-乙基-3-(3-二甲胺丙基）碳二亞胺鹽酸鹽） (417mg, 2. 2mmol, 1. 5eq)溶于 DMF 中，加入三乙胺（0· 61mL, 4. 35mmol, 3. Oeq),室溫 攪拌0. 5h后加入（R)-3-碘-1-(哌啶-3-基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺 (500mg, 1. 45mmol, 1. Oeq)室溫反應(yīng)約5h，完畢后蒸干DMF，用飽和碳酸氫鈉水溶液同二氯 甲烷萃取2次，合并有機(jī)層后蒸干，殘余物經(jīng)柱層析分離得中間體4-25,白色固體（442mg， 收率 73.3% )。
[0151] NMR (400MHz, DMS〇-d6) 58.22(s,1H),5.04- 4. 94 (m, 1H), 4. 77-4. 51 (m, 1H), 4. 50 - 4. 44 (m, 1H), 4. 40-4. 26 (m, 1H), 4. 19-4. 03 (m, 1H), 3. 13 - 2. 98 (m, 1H), 2. 76 (t, J = 12. 1Hz, 1H), 2. 25-2. 11 (m, 1H), 2. 06 - 2. 04 (m, 1H)，1. 86 (t, J = 13. 8Hz, 1H)，1. 62 - 1. 49 (m, 1H)，1. 24 - 1. 13 (m, 3H)。MS m/ z (ESI) :417. 1[M+H]。
[0152] 實(shí)施例26-31中間體4-26~4-31的制備
[0153] 以不同帶芳基的仲胺，不同構(gòu)型的乳酸等原料，采用與制備中間體4-25所述類似 的方法得到以下中間體4-26~4-31。
[0154]
[0155]
[0156] 實(shí)施例324-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-1-基）環(huán)己烷-1-醇（中 間體4-32)的制備
[0157]
[0158] 第一步：參照實(shí)施例11第一步所述的方法，以4-羥基環(huán)己酮乙二醇縮醛及甲基磺 酰氯為原料合成得目標(biāo)產(chǎn)物。MS m/z (ESI) : 236. 1 [M+H]。
[0159] 第二步，制備3-碘-1-(1,4-二氧雜螺[4. 5]癸烷-8-基）-1Η-吡唑并[3, 4-d] 嘧啶-4-胺：
[0160] 參照實(shí)施例11第二步所述方法以1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基甲磺酸酯及 3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺為原料合成得目標(biāo)產(chǎn)物。4 NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 8. 19(s，1H)，4· 79-4. 63(m，1H)，3· 98-3. 82(m，4H)，2· 19-2. 11 (m，2H)，1· 91-1. 64(m，6H)。 MS m/z(ESI):402. 2[M+H]〇
[0161] 第三步，制備4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-1-基）環(huán)己烷-1-酮：
[0162] 3-碘-1-(1, 4-二氧雜螺[4. 5]癸烷-8-基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺 (1. 94g，4. 84mmol)于40mL丙酮中，加入1MHC1 20mL，于70°C 3h后降至室溫反應(yīng)過 夜，完畢后減壓蒸去丙酮，余下水溶液調(diào)pH至10,析出大量固體，過濾，干燥得目標(biāo)產(chǎn) 物，白色固體（1. 68g，收率97.1%)。1!1匪1?(4001抱，0150-(16)58.27(8，1!1)，5.21- 5. 15 (m, 1H)，2. 75-2. 61 (m, 2H)，2. 37 - 2. 26 (m, 4H)，2. 20 - 2. 17 (m, 2H) 〇 MS m/ z(ESI):358. 1[M+H]。
[0163] 第四步，制備4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-1-基）環(huán)己烷-1-醇：
[0164] 4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-1-基）環(huán)己烷-1-酮 (1. 68g, 4. 7mmol, L Oeq)于甲醇中，降溫至0 °C后分批加入硼氫化鈉（183mg， 4. 7mmol, 1. Oeq)，加畢后自然升至室溫反應(yīng)，lh后反應(yīng)完畢，加入5mL水?dāng)嚢?min后蒸 干溶劑，殘余物經(jīng)二氯甲烷與飽和碳酸氫鈉水溶液萃取后柱層析得中間體4-32,白色固 體（844mg，收率 50. 1 % )。4 NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 8. 19(s，1H)，4. 68(d，J = 4. 3Hz ，1H)，4. 62-4. 50 (m，1H)，3. 56-3. 49 (m，1H)，2. 03-1. 79 (m，5H)，1. 46-1. 29 (m，3H)。MS m/ z(ESI) :360. 2 [M+H] 〇
[0165] 實(shí)施例33N-(3-碘-4-甲基苯基）-4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟甲 基）苯酰胺（中間體33)的制備
[0166] ?
[0167] 第一步，制備4-甲基-3-三氟甲基-苯甲酸甲酯：
[0168] 4_甲基_3_(三氣甲基）苯甲酸（2. 04g, lOmmol, 1. Oeq)于25mL MeOH中，攬泮下 加入2mL濃硫酸，回流反應(yīng)，TLC監(jiān)控，24h小時后反應(yīng)完畢，蒸干MeOH，DCM溶解，依次用飽 和碳酸氫鈉水溶液，飽和氯化鈉水溶液以及水洗滌，DCM層經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾后蒸干 得產(chǎn)品（1. 85g，收率84. 8% )用于下步。
[0169] 第二步，制備4-溴甲基-3-三氟甲基-苯甲酸甲酯：
[0170] 4-甲基-3-(三氟甲基）苯甲酸甲酯溶于1，2_二氯乙烷（DCE)中，攪拌下 加入 NBS (N-溴代丁二酰亞胺）（1. 81g，10. 18mmol，1. 2eq)，AIBN(偶氮二異 丁腈） (0. 139g，0. 848mmol，0. leq)后氮?dú)庵脫Q3次，80°C反應(yīng)30h后，反應(yīng)液依次用飽和碳酸氫鈉 水溶液，飽和氯化鈉水溶液以及水洗滌，DCE層經(jīng)硫酸鎂干燥后，蒸干得產(chǎn)物直接用于下步， 按收率80 %計。
[0171 ] 第三步，制備4- (4-甲基哌嗪-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯甲酸甲酯：
[0172] 4-溴甲基-3-三氟甲基苯甲酸甲酯（6. 78mmol, 1. Oeq),三乙胺 (1. 03g, 10. 2mmol, 1. 5eq),氮甲基哌嗪（0· 681g, 6. 8mmol, 1. Oeq)于氯仿中，80 °C 反應(yīng)， lh后反應(yīng)完畢。反應(yīng)液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液，飽和氯化鈉水溶液及水洗滌，氯仿 層蒸干后殘余物經(jīng)柱層析分離得目標(biāo)產(chǎn)物，淡黃色油狀物（1.72g，收率79. 9%)。MS m/ z (ESI) :317. 2 [M+H]。
[0173] 第四步，制備4-(4-甲基哌嗪-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯甲酸：
[0174] 4_ (4_甲基脈嚷-1-基甲基）_3_三氣甲基-苯甲酸甲醋（1. 72g，5. 4mmo 1)于20ml 乙醇中，加入5M NaOH水溶液3ml，室溫攪拌過夜后pH至6,減壓濃縮，濃縮液加入四氫呋喃 后減壓過濾，濾液蒸干得目標(biāo)產(chǎn)物，淡黃色粉末（1. 47g，收率89. 9 % )。
[0175] 第五步，制備N-(3-碘-4-甲基苯基）-4_ ((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟 甲基）苯酰胺：
[0176] 4_ (4_甲基脈嚷-1-基甲基）_3_三氣甲基-苯甲酸（0· 755g，2. 5mmol, 1. Oeq), HATU (0- (7-偶氮苯并三氮唑-1-氧）-Ν, Ν, Ν'，Ν' -四甲基脲鐺六氟磷酸鹽）（1. 14g，3mmol， 1.2eq)，DIPEA(L29g，10mmol，4.0eq)溶于二氯甲烷中室溫攪拌0.5h，加入3-碘-4-甲基 苯胺（582. 6mg，2. 5mmol，1.0eq)后于45°C反應(yīng)過夜，反應(yīng)完畢后蒸干反應(yīng)液，飽和碳酸氫 鈉水溶液與二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)層后減壓濃縮，殘余物經(jīng)柱層析分離得中間體33， 淡黃色固體（892mg，收率 69.0% )。蟲 NMR(400MHz，CDC13)8. 10(s, lH)，8.08(d, J = 2Hz, 1 Η), 8. 08-8. 05 (m, 1H), 8. 0 (s, 1H), 7. 95 (s, 1H), 7. 55 (dd, J = 4, 2Hz, 1H), 7. 20 (d, J = 8Hz, 1 H)，3. 75 (s, 2H) 2. 60-2. 41 (m, 8H)，2. 40 (s, 3H)，2. 30 (s, 3H)。MS m/z (ESI) : 518. 1 [M+H]。
[0177] 實(shí)施例34N-(3-碘-4-甲基苯基）-4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）苯酰胺（中 間體34)
[0178]
[0179] 按照中間體33所述第五步類似的縮合方法得到中間體34,淡黃色固體 (532mg，鹽酸鹽，收率 76. 7 % )。4 NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 10. 35(br. s，1H)，10. 26 (s, 1H), 8. 34(s, 1H), 7. 95(d, J = 7. 6Hz, 2H), 7. 72 (d, J = 8. 3Hz, 1H), 7. 47 (d, J = 7. 6Hz, 2H), 7. 30 (d, J = 8. 3Hz, 1H), 3. 64 (s, 2H), 3. 39 (br. s, 2H), 3. 01 (br. s, 2H), 2. 87 (br. s, 2H)，2. 73 (s, 3H)，2. 42 (br. s, 2H)，2. 34 (s, 3H)。MSm/z (ESI) : 450. 1 [M+H]。
[0180] 實(shí)施例35N-(3-乙炔基-4-甲基苯基）-4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三 氟甲基）苯酰胺（中間體35)的制備
[0181]
[0182] 第一步，制備3-三甲基硅乙炔基-4-甲基苯胺：
[0183] 將 3_ 鵬 _4_ 甲基苯胺（11. 65g，50mmol，1. Oeq)、鵬化亞銅（0· 9g，4. 7mmol， 0. leq)、雙三苯基膦二氯化鈀（1.75g，2. 5mmol，0. 05eq)溶于二氧六環(huán)中，氮?dú)庵脫Q三次， 加入 DIPEA(1. 29g，100mmol，2. Oeq)、三甲基石圭乙炔（6. 4g，65mmol，1. 3eq)。升溫至 75°C反 應(yīng)，17h后反應(yīng)完畢，減壓蒸干溶劑，殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)產(chǎn)品，直接用于下步反 應(yīng)。
[0184] 第二步，制備3_乙炔基-4-甲基苯胺：
[0185] 3-三甲基硅乙炔基-4-甲基苯胺用甲醇溶解，加入碳酸鉀（3.45g，25mmol， 0. 5eq)，常溫攪拌lOmin后反應(yīng)完畢。減壓蒸干溶劑，殘留物用DCM、水萃取3次，DCM層干燥 后蒸干，得到油狀物，經(jīng)柱層析分離得到產(chǎn)品3-乙炔基-4-甲基苯胺，黃棕色油狀物（4. Og， 收率 61.0% )。? NMR(400MHz，CDC13) S6.99(d，J = 8. 1Hz，lH)，6.81(s，lH)，6.61(d，J = 8. 1Hz，1H)，3. 44 (s，2H)，3. 23 (s，1H)，2. 34 (s，3H)。MS m/z (ESI) : 132. 2 [M+H]。
[0186] 第三步，制備N-(3-乙炔基-4-甲基苯基）-4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三 氟甲基）苯酰胺：
[0187] 按照中間體33第五步所述類似的縮合方法得到中間體35,淡黃色固體（1. 2g，鹽 酸鹽，收率 71. 7% )。蟲 NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 11. 24(br. s，1H)，10. 58(s，1H)，8. 33(d，J =6. 4Hz, 2H), 8. 14(s, 1H), 7. 92(s, 1H), 7. 72(d, J = 8. 3Hz, 1H), 7. 28 (d, J = 8. 3Hz ,1H), 4. 39 (s, 1H), 4. 06 (s, 2H), 3. 47 (d, J = 10. 9Hz, 2H), 3. 22 (br. s, 2H), 3. 13 (br. s, 2H)，2. 89 (br. s, 2H)，2. 77 (s, 3H)，2. 36 (s, 3H)。MS m/z (ESI) : 416. 3 [M+H]。
[0188] 實(shí)施例36N-(3-乙炔基-4-甲基苯基）-6-(三氟甲基）甲基吡啶酰胺（中間體 36)的制備
[0189]
[0190] 拘· 0-二風(fēng)〒舉-叩[4€ -Z-〒 K uzy. >?mg, 1. zmmol, 1. zeq;用一錄L亞砜溶解， 80°C回流3h，減壓蒸干二氯亞砜，得到6_(三氟甲基）吡啶-2-甲酰氯，無色油狀物，用 DCM溶解。將3-乙炔基-4-甲基苯胺（131. 17mg，1.0mmol，L0eq)和三乙胺（202.4mg， 2. Ommol，2. Oeq)用DCM溶解，冷卻至-5°C，將6-三氟甲基-吡啶-2-甲酰氯DCM溶液緩慢 滴加到其中。滴加完畢后，自然升溫至常溫，15min后反應(yīng)完畢。往反應(yīng)液中加入氫氧化鈉 水溶液，DCM萃取2次。合并DCM層，再依次用稀鹽酸、水萃取，DCM層用無水硫酸鎂干燥， 蒸干得中間體 36,白色固體（225mg，收率 73.9%)。4 NMR(400MHz，DMS0-d6) Sl0.47(s, 1H), 8. 08-8. 05 (m, 2H), 7. 93 (dd, J = 7. 3, 1. 4Hz, 1H), 7. 76 (d, J = 2. 2Hz, 1H), 7. 54 (dd, J =8.3,2.2Hz，lH)，7.06(d，J = 8.3Hz，lH)，4.16(s，lH),2.13(s，3H)。MS m/ z (ESI) :305. 1 [M+H]。
[0191] 實(shí)施例37-61中間體37-61的制備
[0192] 以含不同取代基的芳基甲酸、芳基酰氯、五元雜環(huán)酰氯及含不同取代基的苯胺為 原料，采用與制備中間體36所述類似的方法得到以下中間體37-61。
[0193]
[0194]
[0195]
[0196]
[0197] 實(shí)施例622-叔丁基-N-(3-乙炔基-4-甲基苯基）噻唑-5-甲酰胺（中間體62) 的制備 「01981 u - N， ' - 『
， Μ 一 f
[0199] 第一步，制備2-叔丁基-噻唑-5-羧酸乙酯：
[0200] 將3-溴丙酮酸乙酯（1.958，10臟〇1，1.(^)和2,2,2-三甲基硫代乙酰胺（1.17 8， 10mm〇l，l.〇eq)加入到20mL乙醇中，常溫攪拌48h。反應(yīng)完畢后，減壓蒸干溶劑，殘留物用 碳酸氫鈉水溶液與DCM萃取，DCM層用無水硫酸鎂干燥后蒸干，殘留物經(jīng)柱層析分離得到 2_叔丁基-噻唑-5-羧酸乙酯，無色油狀物（1. 15g，收率55. 0% )。蟲NMR(400MHz，CDC13) δ 8. 01 (s, 1H), 4. 38(q, J = 7. 1Hz, 2H), 1. 46 (s, 9H), 1. 37 (t, J = 7. 1Hz, 3H) 〇 MS m/ z (ESI) :214. 0[M+H]。
[0201] 第二步，制備2-叔丁基-噻唑-5-羧酸：
[0202] 將2-叔丁基-噻唑-5-羧酸乙酯溶于10mL THF，加入氫氧化鋰（0. 45g，10. 9mmol， 1. leq)水溶液5mL，常溫攪拌約16h。反應(yīng)完畢后，減壓蒸干溶劑，殘留物用5mL水溶解，用 2M HC1調(diào)節(jié)pH至約為3,析出大量白色絮狀固體，抽濾，用水（2X5mL)洗滌濾餅，得到2-叔 丁基-噻唑-5-羧酸，白色固體（0. 55g，收率 55. 0% )。MS m/z(ESI) :184. 0[Μ-Η]。
[0203] 第三步，制備2-叔丁基-噻唑-5-羰基氯化：
[0204] 將2-叔丁基-噻唑-5-羧酸（203. 7mg，1. lmmol)溶于3ml二氯亞砜中，80°C回流 2h后減壓蒸干溶劑，直接用于下一步。
[0205] 第四步，制備2-叔丁基-N-(3-乙炔基-4-甲基苯基）噻唑-5-甲酰胺：
[0206] 將3_乙炔基4_甲基-苯胺（131. 2mg，1. Ommol, 1. Oeq)溶于4mL DCM，加入三乙 胺（15L 8mg，L 5mmol，L 5eq)，降溫至0°C后緩慢滴加上步2-叔丁基-噻唑-5-羰基氯化 的二氯甲烷溶液（4mL)，加畢后自然升至室溫反應(yīng)10min，然后依次用飽和氯化銨水溶液， 飽和碳酸氫鈉水溶液，飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)液，有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后過濾，減 壓蒸干溶劑，3mL石油醚洗滌殘余物后得目標(biāo)產(chǎn)物，淡黃色粉末（253. 6mg，收率85. 1 % )。 NMR (400MHz, DMS〇-d6) δ 9. 95 (s, 1Η), 8. 30 (s, 1H), 7. 95 (d, J = 2. 0Hz, 1H), 7. 76 (dd, J =8. 3, 2. 0Hz, 1H)，7. 28 (d, J = 8. 3Hz, 1H)，4. 39 (s, 1H), 2. 37 (s, 3H), 1. 47 (s, 9H)。MS m/ z (ESI) :299. 1[M+H]。
[0207] 實(shí)施例63N- (4-氯-3-乙炔基苯基）-3-(三氟甲基）苯酰胺（中間體63)的制備
[0208]
[0209] 第一、二步，制備3-乙炔基-4-氯苯胺：
[0210] 以3-碘-4-氯苯胺為原料，按照中間體35第一、二步所述的方法，得目標(biāo) 產(chǎn)物，淡黃色油狀物（2. lg，收率 77. 8 % )。4 NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 7. 12 (d，J = 8. 7Hz, 1H), 6. 75 (d, J = 2. 8Hz, 1H), 6. 60 (dd, J = 8. 7, 2. 8Hz, 1H), 5. 39 (s, 2H), 4. 34 (s, 1H)。MS m/z(ESI):518. 3[M+H]。
[0211] 第二步，制備N-(4_氯-3-乙炔基苯基）-3-(二氟甲基）苯酰胺：
[0212] 采用中間體36所述的類似方法得到中間體63,淡黃色粉末（291mg，收率90. 1%)。 NMR (400MHz, DMS〇-d6) δ 10. 64 (s, 1H), 8. 30 (s, 1H), 8. 26 (d, J = 8. 0Hz, 1H), 8. 07 (d, J =2. 5Hz, 1H), 8. 00 (d, J = 8. 0Hz, 1H), 7. 89-7. 82 (m, 1H), 7. 82-7. 75 (m, 1H), 7. 57 (d, J = 8. 8Hz, 1H)，4. 61 (s, 1H)。MS m/z (ESI) : 324. 1 [M+H]。
[0213] 實(shí)施例643-碘-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟甲基）苯 基）苯酰胺（中間體64)的制備
[0214]
[0215] 第一步，制備I-漠甲基-4_硝基_2_二氣甲基-苯：
[0216] 將 1-甲基-4-硝基-2-三氟甲基-苯（5.62g，27.4mmol，1.0eq)溶于50ml 1,2-二 氯乙燒，然后依次加入N-溴代丁二酰亞胺（5. 85g，32. 8mmol，1. 2eq)和AIBN(450mg, 2. 7mmol,0. leq),加熱回流過夜。然后將反應(yīng)液冷卻至室溫，依次用飽和碳酸氫鈉溶液，飽 和氯化鈉溶液及水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾后減壓濃縮得目標(biāo)產(chǎn)物，直接用于下步反 應(yīng)。
[0217] 第二步，制備卜甲基-4-(4_硝基_2_(二氟甲基）苯甲基）哌嗪：
[0218] 將上步1-溴甲基-4-硝基-2-三氟甲基-苯（20. 55mmol)溶于50mL DCM中， 加入三乙胺（3. lg，30. 8mmol，1. 5eq)和 N-甲基哌嗪（4. 12g，41. lmmol，2. Oeq),室溫反 應(yīng)，反應(yīng)完畢后減壓濃縮，DCM溶解，依次用飽和碳酸氫鈉溶液，飽和氯化鈉溶液及水洗滌， 無水硫酸鎂干燥，過濾后減壓濃縮，殘余物經(jīng)柱層析分離得目標(biāo)產(chǎn)物，黃色固體。MS m/ z(ESI) :304. 2 [M+H]
[0219] 第三步，制備4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟甲基）苯胺：
[0220] 1-甲基-4-(4-硝基-2-(三氟甲基）苯甲基）哌嗪（5g)溶于65mL 75 %乙醇中， 加入0. 5g 10%鈀碳，氮?dú)庵脫Q后，反應(yīng)液在氫氣下室溫攪拌5h，反應(yīng)完畢后減壓過濾，濾 液蒸干后得目標(biāo)產(chǎn)物，淡黃色固體。MS m/z (ESI) :274. 2 [M+H]。
[0221] 第四步，制備3-碘-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟甲基） 苯基）苯酰胺：
[0222] 按照中間體33第五步所述類似的縮合方法得到中間體64，淡黃色固體 (2. 2g，收率 74. 3 % )。4 NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 10. 49 (s，1H)，8. 43 (s，1H)，8. 18 (d，J =1. 5Hz, 1H), 8. 04 (d, J = 8. 5Hz, 1H), 7. 92 (d, J = 8. 0Hz, 1H), 7. 70 (d, J = 8. 5Hz, 1H) , 7. 50 (d, J = 8. 0Hz, 1H) , 3. 56 (s, 2H) , 2. 45 (s, 3H) , 2. 36 (d, J = 20. 7Hz, 8H)，2. 16 (s, 3H)。MS m/z (ESI) : 518. 3 [M+H]。
[0223] 實(shí)施例65中間體65-70的制備
[0224] 以含不同取代基的苯甲酸與含不同取代基的苯胺為原料，采用中間體64或中間 體36所述類似方法得到以下中間體65-70。
[0225]
[0227] 實(shí)施例713-乙炔基-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟甲 基）苯基）苯酰胺（中間體71)的制備
[0228]
[0229] 第一步，制備3-碘-4-甲基苯甲酸甲酯：
[0230] 將3-碘-4-甲基苯甲酸（15g，57. 14mmol)用甲醇溶解，將濃硫酸緩慢滴入其中， 反應(yīng)液放熱，滴加完畢后升溫至70°C反應(yīng)。TLC監(jiān)測，48h后反應(yīng)完全，停止反應(yīng)，減壓蒸干 甲醇，得到棕色油狀物，將油狀物緩慢倒入200mL水中，呈白色乳濁狀，且放熱，水用DCM萃 取2次，DCM層再依次用碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液、水萃取一次，DCM層用無水硫 酸鈉干燥，減壓蒸干DCM后得目標(biāo)產(chǎn)物，黃棕色油狀物。
[0231] 第二步，制備3-三甲基硅乙炔基-4-甲基苯甲酸甲酯：
[0232] 將上步油狀物用THF溶解，加入碘化亞銅（1. lg，5. 74mmol，0. leq)和四三苯基膦 鈀（3.38,2.86臟〇1，0.0569)，氮?dú)庵脫Q三次，加入三乙胺（11.578，114.28臟〇1，2.069)和 三甲基娃乙炔（8. 4g，85. 71mmol，1.5eq)，常溫攪拌，24h后反應(yīng)完畢。減壓蒸干溶劑，柱層 析分離得目標(biāo)產(chǎn)品，黃色油狀物。
[0233] 第三步，制備3-乙炔基-4-甲基苯甲酸甲酯：
[0234] 將上步油狀物用甲醇溶解，加入碳酸鉀（3. 95g，28. 57mmol，0. 5eq)，常溫攪拌 lOmin后反應(yīng)完畢，減壓蒸干溶劑，DCM溶解，再依次用碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶 液、水萃取一次，DCM層用無水硫酸鈉干燥，經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)產(chǎn)品，淡黃色油狀物。
[0235] 第四步，制備3-乙炔基-4-甲基苯甲酸：
[0236] 將上步得到的產(chǎn)品用甲醇溶解，加入飽和氫氧化鈉水溶液10mL，常溫攪拌過 夜。反應(yīng)完畢后，減壓蒸干溶劑，加入水約20mL，用鹽酸將pH調(diào)成約為3,析出大量白色 固體，用DCM萃取3次，合并DCM層，用水洗滌DCM層一次，無水硫酸鈉干燥后，減壓蒸干 溶劑得到產(chǎn)品3-乙炔基-4-甲基苯甲酸，淡黃色固體粉末（8. Og，總收率87.2% )。4 NMR (400MHz, DMS〇-d6) δ 13. 04 (br. s, 1H), 7. 93 (s, 1H), 7. 85 (d, J = 8. 0Hz, 1H), 7. 43 (d, J = 8. 0Hz, 1H)，4. 48 (s, 1H)，2. 45 (s, 3H)。MS m/z (ESI) : 159. 0 [M-H]。
[0237] 第五步，制備3-乙炔基-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟 甲基）苯基）苯酰胺：
[0238] 將3-乙炔基-4-甲基苯甲酸（500mg，3. 12mmol，1. 05eq)用DCM溶解，加入 HATU(1. 42g，3. 74mmol，1. 2eq)、DIPEA(806mg，6. 24mmol，2. Oeq)，常溫攪拌約 30min 后， 加入3-三氟甲基-4_[(4-甲基哌嗪-1-基）甲基]苯胺（812mg，2. 97mmol，1. Oeq),升 溫至45°C回流，20h后反應(yīng)完畢。減壓蒸干溶劑，用DCM和飽和碳酸氫鈉水溶液萃取2 次，DCM層蒸干后得到黃色油狀物，經(jīng)柱層析分離得到中間體71，黃棕色固體（807mg， 收率約 65.4 % )。4 NMR(400MHz，CDCl3)S8.33(s，lH)，7.91(s，lH)，7.86(d，J = 13. 7Hz, 2H), 7. 73 (t, J = 7. 1Hz, 2H), 7. 28 (s, 1H), 3. 60 (s, 2H), 3. 32 (s, 1H), 2. 48 (br. s, 11H)，2. 30 (s, 3H)。MS m/z (ESI) : 416. 3 [M+H]。
[0239] 實(shí)施例72-76中間體72-76的制備
[0240] 以含不同取代基的苯胺或者芳基胺為原料，采用中間體71或中間體36所述類似 的方法得到以下中間體72-76。
[0241]
[0242] 實(shí)施例773-乙炔基-4-甲基-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基）-5-(三氟甲基） 苯基）苯酰胺（中間體77)的制備
[0243]
[0244] 第一步，制備3-(4-甲基-咪唑-1-基）-5_三氟甲基-苯胺：
[0245] 將 3_ 漠-5-三氣甲基-苯胺（500mg，2. lmmol, 1. Oeq)，4_ 甲基 _1H_ 咪唑（20. 5mg， 2. 5mmol, 1. 2eq),鵬化亞銅（60mg，0· 3mmol，0· 14eq)和 8-羥基唾琳（44mg，0· 3mmol, 0. 14eq)溶解在3mL二甲亞砜中，氮?dú)庵脫Q3次后升溫至120°C反應(yīng)過夜，反應(yīng)完畢后 加水稀釋，DCM萃取，有機(jī)層依次用稀氨水溶液，飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鎂干 燥，過濾，減壓濃縮后殘余物經(jīng)柱層析分離得目標(biāo)產(chǎn)物，黃色固體（392mg，收率77. 3 % )。 4匪1?(4001抱，〇)(：13)3 7.73(8，1!1)，6.98(8，1!1)，6.92(8，1!1)，6.83(8，1!1)，6.77(8，1!1)，4· 14 (s，2H)，2· 27 (s，3H)。MSm/z (ESI) : 242. 1 [M+H]。
[0246] 第二步，制備3-乙炔基-4-甲基-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基）-5-(三氟甲 基）苯基）苯酰胺：
[0247] 采用中間體33第五步所述類似的縮合方法得到中間體77,淡黃色固體（350mg，收 率 65. 7 % )。蟲 NMR (400MHz, DMS0-d6) δ 10. 68 (s, 1H)，8. 29 (s, 1H)，8. 22 (s, 1H)，8. 16 (s，1 Η), 8. 12 (s, 1Η), 7. 93 (d, J = 8. 0Hz, 1H), 7. 74 (s, 1H), 7. 51 (d, J = 9. 0Hz, 2H), 4. 56 (s, 1H), 2. 48 (s，3H)，2. 19 (s，3H)。MS m/z (ESI) : 384. 1 [M+H]。
[0248] 實(shí)施例783-乙炔基-4-甲基-N-(3-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-5-(三氟甲 基）苯基）苯酰胺（中間體78)的制備
[0249]
[0250] 第一步，制備3-硝基-5-三氟甲基苯甲酰氯：
[0251] 3_硝基_5_三氟甲基苯甲酸（3. 52g，14. 97mmol，1. Oeq)溶于20mL二氯亞砜中， 80°C回流2h，反應(yīng)完畢后減壓蒸干溶劑，余下殘余物為目標(biāo)產(chǎn)物，直接用于下步反應(yīng)。
[0252] 第二步，制備（4-甲基哌嗪-1-基）（3_硝基-5-(三氟甲基）苯基）甲酮：
[0253] N-甲基脈嚷（1. 5g，15mmo 1,1. 05eq),三乙胺（2. 2g，22. 4mmo1 ,1. 5mmol)溶于 20ml DCM中，上步產(chǎn)物3-硝基-5-三氟甲基苯甲酰氯溶于6mL DCM中，緩慢滴加至反應(yīng)液中，加 畢后室溫反應(yīng)0. 5h，反應(yīng)完畢后依次用飽和碳酸氫鈉溶液，飽和氯化鈉溶液及水洗滌，無水 硫酸鎂干燥，過濾，減壓蒸干后直接用于下步反應(yīng)。MS m/z(ESI):318. 1[M+H]
[0254] 第三步，制備1-甲基-4-(3-硝基-5-(三氟甲基）苯甲基）哌嗪：
[0255] 將（4-甲基哌嗪-1-基）（3-硝基_5_(三氟甲基）苯基）甲酮（14. 97mmol)于無 水四氫呋喃中，氮?dú)獗Ｗo(hù)，降溫至0°c。用無水四氫呋喃將2mol/L的硼烷二甲硫醚（22. 5mL， 45mmol，3. Oeq)稀釋至50mL，然后緩慢滴加至反應(yīng)液中，加畢后升溫至65°C反應(yīng)過夜，反應(yīng) 完畢后降溫至〇°C，緩慢滴加6M HC1 22. 5mL，加畢后升溫至65°C反應(yīng)lh，然后降溫至0°C， 緩慢滴加4MNaOH水溶液調(diào)pH至9,反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)層，無水硫酸鎂 干燥，減壓過濾，濾液蒸干后殘余物經(jīng)柱層析分離得目標(biāo)產(chǎn)物，淡黃色油狀物（2. 4g，收率 53. 2 % )。MS m/z (ESI) : 304. 1 [M+H]
[0256] 第四步，制備3-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-5-(三氟甲基）苯胺：
[0257] 1-甲基-4-(3-硝基_5_(三氟甲基）苯甲基）哌嗪（2. 4g，7. 96mmol)溶于75% 乙醇中，加入10%鈀碳（240mg，10%eq)，氮?dú)庵脫Q后通氫氣于50°C下反應(yīng)，反應(yīng)完畢后，減 壓過濾，濾液蒸干得目標(biāo)產(chǎn)物，白色固體（2. lg，收率96. 1% )。MS m/z (ESI) :274. 1[M+H]
[0258] 第五步，制備3-乙炔基-4-甲基-N-(3-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-5-(三氟 甲基）苯基）苯酰胺：
[0259] 采用中間體33第五步所述類似的縮合方法得到中間體78,淡黃色固體 (260mg，鹽酸鹽，收率61.7%)。1!1匪1?(4001抱，015〇-(16)31〇.55(8，1!1)，9.28〇^· s, 1H), 8. 10 (s, 3H), 7. 91 (d, J = 8. 1Hz, 1H), 7. 49 (d, J = 8. 1Hz, 1H), 7. 41 (s, 1H), 4. 56 (s, 1 H), 3. 66 (s, 2H), 3. 39 (d, J = 11. 1Hz, 2H), 3. 14-2. 99 (m, 2H), 2. 94 (d, J = 12. 5Hz, 2H), 2. 80 (s, 3H), 2. 47 (s, 3H)，2. 33 (t, J = 11. 9Hz, 2H)。MS m/z (ESI) : 416. 3 [M+H]。
[0260] 實(shí)施例793-乙炔基-N- (3-(三氟甲基）苯基）苯酰胺（中間體79)的制備
[0261]
[0262] 第一步，制備3-碘-N-(3-(三氟甲基）苯基）苯酰胺：
[0263] 將間碘苯甲酸（1. 29g，5. 2mmol，1. 05eq)、TBTU(〇-(苯并三 唑-1-氧）-N，N，Ν'，Ν' -四甲基脲鐺六氟硼酸鹽）（1. 93g，6. Ommol，1. 2eq)、三乙胺（1. Olg， 10mmol，2. Oeq)加入DCM中，常溫攪拌0· 5h，加入間三氟甲基苯胺（805mg，5. Ommol，1. Oeq)， 升溫至45°C回流。12h后反應(yīng)完畢。減壓蒸干溶劑，用飽和碳酸氫鈉水溶液、DCM萃取一 次，DCM層蒸干，經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)產(chǎn)物。蟲匪1?(4001抱，0130-(16)5 10.60(8，1!1)，8· 33 (s, 1H), 8. 22 (s, 1H), 8. 05 (d, J = 8. 0Hz, 1H), 7. 99 (dd, J = 7. 8, 1. 2Hz, 2H), 7. 61 (t, J = 8. 0Hz, 1H)，7. 47 (d, J = 7. 8Hz, 1H)，7. 37 (t, J = 8. 0Hz, 1H)。MS m/z (ESI) : 392. 0 [M+H]。
[0264] 第二步，制備N-(3_(三氟甲基）苯基）-3-((三甲基甲硅烷基）乙炔基）苯酰胺：
[0265] 將上步產(chǎn)物溶于THF (四氫呋喃），加入碘化亞銅（95.23mg，0.5mmol，0. leq)、雙 三苯基膦二氯化鈀（175. 5mg，0. 25mmol，0. 05eq)，氮?dú)庵脫Q三次，再加入DIPEA(1. 29g， lOmmol，2. Oeq)、三甲基娃乙炔（737mg，7. 5mmol，1. 5eq)，常溫攪拌，4h后反應(yīng)完畢。停止反 應(yīng)，經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)產(chǎn)物，直接用于下步反應(yīng)。MS m/z (ESI) :362. 2 [M+H]。
[0266] 第二步，制備3_乙炔基-N-(3-(二氟甲基）苯基）苯酰胺：
[0267] 將上步產(chǎn)物用甲醇溶解，加入碳酸鉀（345. 5mg，2. 5mmol，0. 5eq)，常溫攪拌，10min 后反應(yīng)完畢。蒸干溶劑，殘留物經(jīng)柱層析分離得到中間體79,淡黃色固體（875. Omg，收率約 60. 5% )〇 NMR(400MHz, DMS0-d6) δ 10. 61(s, 1Η), 8. 25 (s, 1H), 8. 10 (s, 1H), 8. 06 (d, J = 8. 3Hz, 1H), 8. 00 (d, J = 7. 9Hz, 1H), 7. 72 (d, J = 7. 7Hz, 1H), 7. 63 - 7. 56 (m, 2H), 7. 47 (d, J =7. 9Hz, 1H)，4. 35 (s, 1H)。MS m/z (ESI) :290. 1 [M+H]。
[0268] 實(shí)施例80中間體80的制備
[0269]
[0270] 以含不同取代基的鹵代苯甲酸同含不同取代基的苯胺為原料，采 用中間體79所述類似的方法得到以下中間體80。4 NMR (400MHz，⑶Cl3) δ 7. 98 (s, 1H), 7. 91 (s, 1H), 7. 85 (d, J = 7. 6Hz, 1H), 7. 77 (d, J = 7. 2Hz, 1H), 7. 46 (d, J = 8. 4Hz, 2H)，7. 44-7. 39 (m, 2H)，3. 43 (s, 1H)。MSm/z (ESI) :324. 1 [M+H]。
[0271] 實(shí)施例811-(3-乙炔基苯基）-3-(3-(三氟甲基）苯基）脲（中間體81)的制備
[0272]
[0273] 將三光氣（1. 79g，6. Ommol，1. 5eq)溶于EA，常溫攪拌。將間三氟甲基苯胺（967mg， 6. Ommol，1. 5eq)溶于EA，置于滴液漏斗中，緩慢滴加到三光氣的EA溶液中，30min后滴 加完畢。然后緩慢加入三乙胺（1.28，12臟〇1，2.0叫)，析出大量白色固體，常溫反應(yīng)。211 后，減壓蒸干溶劑，加入EA，濾去不溶物，收集濾液。向?yàn)V液中加入間乙炔基苯胺（469mg， 4.0mmol，l.Oeq)，有固體產(chǎn)生。TLC監(jiān)測反應(yīng)完畢后，減壓蒸干溶劑，用體積比乙醚：石油醚 =1 :1重結(jié)晶得到中間體81，白色固體（543mg，收率約44. 6% )。蟲NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 9. 35 (s, 1H), 9. 15 (s, 1H), 8. 01 (s, 1H), 7. 68 (s, 1H), 7. 59 (d, J = 8. 4Hz, 1H), 7. 52 (t, J =7. 9Hz, 1H), 7. 44 (d, J = 8. 2Hz, 1H), 7. 3 1 (d, J = 7. 8Hz, 2H), 7. 10 (d, J = 7. 6Hz, 1H)，4. 17 (s, 1H)。MSm/z (ESI) : 304. 2 [M+H]。
[0274] 實(shí)施例82-83中間體82-83的制備
[0275] 以含不同取代基的苯胺為原料，采用中間體81所述類似的方法得到以下中間體 82-83〇
[0276]
[0277] 實(shí)施例84N-(3-((4_氨基-1-異丙基-1H-吡唑并[3,4_d]嘧啶-3-基）乙炔 基）-4-甲基苯基）-4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）苯酰胺（化合物1)的制備
[0278?
[0279] Ν-(3-碘-4-甲基苯基）-4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）苯酰胺 (118mg，0· 263mmol，1. Oeq)，3-乙炔基-1-異丙基-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-4-胺 (55. 57mg，0· 276mmol，1. 05eq) , Cul (5. 7mg，0· 03mmol，0· leq)，PdCl2(PPh3)2(21. 06 mg，0. 03mmol，0. leq)于三口瓶中，加入2mL DMF溶解后氮?dú)庵脫Q三次，加入三乙胺 (53. 23mg，0. 526mmol，2. Oeq)于80°C反應(yīng)過夜，TLC監(jiān)控反應(yīng)完畢后，減壓蒸去DMF，殘余 物經(jīng)柱層析分離得化合物1，淡黃色固體（62mg，收率45. 1 % )。4 NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 10. 33(s, 1H), 8. 27(s, 1H), 8. 10(s, 1H), 7. 94(d, J = 7. 6Hz, 2H), 7. 75 (d, J = 8. 2Hz, 1H), 7. 47 (d, J = 7. 6Hz, 2H), 7. 34 (d, J = 8. 2Hz, 1H), 5. 20-4. 93 (m, 1H), 3. 56 (s, 2H), 2. 58 (br. s, 8H), 2. 47 (s, 3H), 2. 34 (s, 3H), 1. 49 (d, J = 6. 4Hz, 6H). MSm/ z (ESI):523. 2930[M+H]。
[0280] 實(shí)施例85-175化合物2-92的制備
[0281] 以含不同取代基的芳基乙炔與鹵代物為原料，采用實(shí)施例84所述類似的方法得 到化合物2-92。
[0282]
[0283]
[0284]
[0285]
[0286]
[0287]
[0288]
[0289]
[0290]
[(
[0292]
[0293]
[0294]
[0295]
[0296]
[0297
[0298:
[0299]
[0300] 實(shí)施例933- ((4-氨基-1-(哌啶-4-基）-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-3-基）乙炔 基）-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟甲基）苯基）苯酰胺（化合物 93)的制備
[0301]
[0302] 叔-丁基-4-(4-氨基-3-((2-甲基-5-((4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三 氟甲基）苯基）氨基甲酰）苯基）乙炔基）-1Η-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-1-基）哌啶-1-羧 酸酯（1. 46g，2mmol)溶于20mL DCM中，降溫至0°C后加入10ml三氟乙酸，自然升至室溫反 應(yīng)，〇.5h后反應(yīng)完畢，減壓蒸干溶劑，殘余物用水溶解后調(diào)PH至8,析出大量固體，減壓過 濾，水洗濾餅，固體經(jīng)真空干燥后得化合物93,淡黃色粉末（1. 2g，收率94. 9% )。
[0303] 4 NMR (400MHz，DMS0-d6) δ 10. 56 (s，1H)，8. 35 (s，1H)，8. 28 (s，1H)，8. 22 (s，1H)，8 .08 (d, J = 7. 9Hz, 1H), 7. 98 (d, J = 7. 9Hz, 1H), 7. 72 (d, J = 8. 2Hz, 1H), 7. 55 (d, J = 8. 2Hz ,1H), 5. 09-4. 98 (m, 1H), 4. 36-4. 32 (m, 1H), 3. 58 (s, 2H), 3. 21-3. 08 (m, 2H), 2. 99 (d, J = 7. 0Hz, 2H), 2. 58 (s, 3H), 2. 42 (br. s, 8H), 2. 31 (d, J = 11. 7Hz, 2H), 2. 22 (s, 3H), 2. 12 (d, J =11.6Hz,2H)。MSm/z(ESI):632. 3071[M+H]。
[0304] 實(shí)施例943- ((1- (1-丙烯酰哌啶-4-基）-4-氨基-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧 啶-3-基）乙炔基）-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟甲基）苯基） 苯酰胺（化合物94)的制備
[0305]
[0306] 3- ((4-氨基-1-(哌啶-4-基）-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶-3-基）乙炔基）-4-甲 基-N-(4_((4-甲基哌嗪-1-基）甲基）-3-(三氟甲基）苯基）苯酰胺（510mg，0. 807mmol， 1. 〇eq)溶于10mL DCM中，加入三乙胺（163mg，1. 6mmol，2. Oeq)，降溫至0°C，緩慢滴加丙烯 酰氯（72yL，0. 888mmol，l. leq)的二氯甲烷液（4mL)，加畢后反應(yīng)完全。然后依次用飽和 氯化銨水溶液，飽和碳酸氫鈉水溶液，飽和氯化鈉水溶液洗滌反應(yīng)液，余下有機(jī)層用無水硫 酸鎂干燥，過濾，濾液減壓蒸干，殘余物經(jīng)丙酮：乙醚（1:1)洗滌得化合物94,淡黃色粉末 (440. lmg，收率 72.3% )。
[0307] 4 MMR(400MHz，DMS0-d6) δ 10. 54(s，1H)，8. 33(s，1H)，8. 27(s，1H)，8. 21(s，1H) ，8.06(d，J = 7.7Hz，lH)，7.96(d，J = 7.7Hz，lH)，7.71(d，J = 7.8Hz，lH)，7.54(d，J = 7. 8Hz, 1H), 6. 88 (dd, J = 17. 7, 10. 2Hz, 1H), 6. 14 (d, J = 17. 7Hz, 1H), 5. 71 (d, J = 10. 2Hz ,1H), 5. 08-4. 94 (m, 1H), 4. 56 (d, J = 10. 5Hz, 1H), 4. 21 (d, J = 10. 9Hz, 1H), 3. 57 (s, 2H), 2. 97-2. 84 (m, 1H), 2. 73-2. 62 (m, 1H), 2. 57 (s, 3H), 2. 39 (br. s, 8H), 2. 19 (s, 3H), 2. 01 (br. s，4H)。MS m/z (ESI) :686. 3181 [M+H]。
[0308] 實(shí)施例95激酶抑制實(shí)驗(yàn)
[0309] 本實(shí)驗(yàn)的目的是檢測本發(fā)明化合物對體外激酶的抑制活性，采用的方法為同位素 標(biāo)記法（標(biāo)記ATP上的γ磷酸基團(tuán)）。本實(shí)驗(yàn)分別對Abl (T315I) (h)、ALK(h)、ARK5 (h)、 Axl (h)、Blk (h)、Bmx (h)、BTK (h)、B-Raf (h)、cKit (h)、cSRC (h)、CDK7、CHK1 (h)、c-RAF (h)、 DDR2 (h)、EGFR (h)、EphAl (h)、EphA2 (h)、EphA8 (h)、EphB2 (h)、EphB4 (h)、ErbB2 (h)、 FAK (h)、Fer (h)、FGFR1 (h)、Flt3 (h)、Fms (h)、Fyn (h)、Hck (h)、GSK3 β (h)、IKK a (h)、 IKK β (h)、Itk (h)、JAK3 (h)、JNK1 a 1 (h)、KDR (h)、Lyn (h)、MAPK1 (h)、MEK1 (h)、Met (h)、 mTOR(h)、PAKl(h)、PDGFRa (h)、Pim-l(h)、PKA(h)、PKBa 〇〇、ΡΚΒβ (h)、PKCa (h)、Ret(h)、 RIPK2 (h)、Src (1-530) (h)、TAK1 (h)、TBK1 (h)、Tec (h) activated、Tie2 (h)、TrkA (h)、 ULK3(h)、Yes(h)、PI3KinaSe a(h)等激酶進(jìn)行體外活性抑制測試。受試化合物的激酶抑制 活性用IC5。（半數(shù)抑制濃度）或受試化合物在10 μ Μ濃度下對激酶活性的抑制率來表示。 IC5。值可通過受試化合物在一系列不同濃度下對激酶活性的抑制率計算而獲得。實(shí)驗(yàn)方法 如下：在一個反應(yīng)管中，依次加入緩沖液（8mM MOPS, pH 7. 0, 0· 2mM EDTA，10mM MnCl2)，待測 激酶（5-10mU)、待測激酶的底物，lOmM的醋酸鎂和γ 33P-ATP溶液，以及不同濃度的受試化 合物。然后向反應(yīng)中加入MgATP以啟動酶反應(yīng)過程，并在室溫下孵育40分鐘。最終用5μ 1 的3%磷酸鹽緩沖液終止反應(yīng)，并把10 μ L的反應(yīng)液滴定到Filtermat A膜上，用75mM的磷 酸鹽溶液洗三次，每次5分鐘，再用甲醇洗一次。最后干燥Filtermat A膜并對其進(jìn)行閃爍 計數(shù)，閃爍計數(shù)值的大小反映了底物被磷酸化的程度，從而可以表征激酶活性被抑制情況。
[0310] 表1給出了部分受試化合物對部分激酶抑制活性的IC50值。（以下各表中的"一" 均表示未進(jìn)行測試。）
[0311] 表1部分受試化合物對各種激酶的抑制活性（IC5。:nM)
[0312]

[0313] 結(jié)果表明，部分受試化合物對激酶如Abl、Abl (T315I)、c-Src (1-530)、 c-Src (T341M)、B-Raf(V600E)、B-Raf、c-RAF、Yes、Fyn、Blk、Bcr-Abl、KDR、FGFR1、EphA2、 EphB2、EphB4、ErbB2 (h)、DDR1、DDR2、TAK1、TrkA、Btk、Bmx 有較好的抑制活性，對部分激酶 如ΙΚΚα、ΙΚΚβ、Axl、H)GFRa有中等的抑制活性。
[0314] 表2給出了部分受試化合物對c-Src (1-530)激酶抑制活性的IC5。值。
[0315] 表2部分受試化合物對c-Src激酶的抑制活性（IC5。:nM)
[0316] 1
[0318] 結(jié)果表明，部分受試化合物對Src激酶有較好的抑制活性。
[0319] 表3給出了部分受試化合物在101^的濃度下分別對六131〇'3151)〇1)、八1^〇1)、 ARK5 (h)、Axl (h)、Blk (h)、Bmx (h)、BTK (h)、B-Raf (h)、cKit (h)、cSRC (h)、CDK7、CHK1 (h)、 c-RAF (h), DDR2 (h), EGFR (h), EphAl (h) , EphA2 (h), EphA8 (h), EphB2 (h) , EphB4 (h), ErbB2 (h)、FAK (h)、Fer (h)、FGFR1 (h)、Flt3 (h)、Fms (h)、Fyn (h)、Hck (h)、GSK3 β (h)、 IKK a (h)、IKK β (h)、Itk (h)、JAK3 (h)、JNK1 α 1 (h)、KDR (h)、Lyn (h)、MAPK1 (h)、MEK1 (h)、 Met(h)、mTOR(h)、PAKl(h)、PDGFRa (h)、Pim-l(h)、PKA(h)、PKBa 〇〇、ΡΚΒβ (h)、PKCa (h)、 Ret (h)、RIPK2 (h)、Src a-530) (h)、TAK1 (h)、TBK1 (h)、Tec (h) activated、Tie2 (h)、 TrkA(h)、ULK3(h)、Yes(h)、PI3KinaSe a(h)激酶活性的抑制率（數(shù)值表示相對活性蛋白百 分比）。
[0320] 表3部分受試化合物在10 μ Μ的濃度下對部分激酶的抑制率
[0321]
[0322]
[0323]
[0324] 結(jié)果表明，部分受試化合物對 Ab 1 (T3151)、Αχ 1、B1 k、Bmx、BTK、B-Raf、cSRC、c-RAF、 DDR2、EphAl、EphA2、EphA8、EphB2、EphB4、ErbB2、FGFR1、FIt3、Fms、Fyn、Hck、IKK a、IKK β、 Itk、JAK3、KDR、Lyn、PDGFR a、Ret、RIPK2、Src (1-530)、TAK1、Tec、Tie2、TrkA、ULK3、Yes 有 較好的抑制活性。部分受試化合物對ALK、cKit、EGFR、FAK、Fer、JNK1 a 1、PKA、PKB β有中 等的抑制活性。
[0325] 實(shí)施例96細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn)
[0326] 本實(shí)驗(yàn)的目的是檢測本發(fā)明化合物對體外人腫瘤細(xì)胞增殖抑制活性，采用的方法 為ΜΤΤ (四甲基偶氮唑鹽）比色法。
[0327] 1)實(shí)驗(yàn)材料：
[0328] 主要試劑：RPMI-1640、胎牛血清、胰酶等購自Gibco BRL公司（Invitrogen Corporation，USA)，DMEM 培養(yǎng)基購自 ATCC(American Type Culture Collection)。四甲基 偶氮唑鹽（ΜΤΤ)、二甲基亞砜（DMSO)為Sigma公司（USA)產(chǎn)品?；衔?和化合物31由發(fā) 明人合成，體外實(shí)驗(yàn)時用100% DMS0配制成10mM儲存液，置-20°C冰箱避光保存?zhèn)溆?，臨用 時用完全培養(yǎng)液稀釋至所需濃度。
[0329] 細(xì)胞系及培養(yǎng)：本實(shí)驗(yàn)所用的人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231、MCF-7、SKBR-3、 BT474、MDA-MB-468、MDA-MB-453、MDA-MB-435,大 B 細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株 LY-10、HBL-1，人胰 腺癌細(xì)胞株P(guān)anc-1、Miapaca-2,人肺癌細(xì)胞株A549、H358,人白血病細(xì)胞株THP-1，人肝 癌細(xì)胞株Hepg2,人黑色素瘤細(xì)胞株A2058等均購于美國ATCC(American type culture collection)，由本實(shí)驗(yàn)室保存。以上所有人淋巴瘤細(xì)胞株、大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株、T細(xì)胞 淋巴瘤細(xì)胞株用含10%胎牛血清、1001]/1^青霉素、10(^8/1^鏈霉素的1?^1-1640完全培 養(yǎng)基在5% C02、37°C條件下培養(yǎng)。其余細(xì)胞株使用含10%胎牛血清（MV4-11細(xì)胞為20% )、 100U/ml青霉素、100 μ g/mL鏈霉素的DMEM完全培養(yǎng)基在5% C02、37°C條件下培養(yǎng)。
[0330] 2)實(shí)驗(yàn)方法：
[0331] 用完全細(xì)胞培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為1~2X 104個/mL的細(xì)胞懸液，接種于96孔 板，每孔200 μ L細(xì)胞懸液，培養(yǎng)過夜。次日，吸棄上清（懸浮細(xì)胞離心后吸取上清），然后分 別用梯度濃度的受試化合物處理細(xì)胞。同時設(shè)不含藥物的陰性對照組和等體積的溶劑對照 組，DMS0濃度為0. 1%，每個劑量組設(shè)3個復(fù)孔，在37°C，5% C02條件下培養(yǎng)。72小時后，每 孔加入濃度為5mg/mL的MTT試劑20 μ L，再培養(yǎng)2-4h后，棄上清，每孔再加入DMS0 150 μ L， 振蕩混勻15min，用酶標(biāo)儀（λ = 570nm)測定吸光度（Α)值（Α值與活細(xì)胞數(shù)成正比），取其 平均值。相對細(xì)胞增殖抑制率=(對照組A570-實(shí)驗(yàn)組A570) X 100% /對照組A570。實(shí) 驗(yàn)至少重復(fù)3次。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)表示，數(shù)據(jù)統(tǒng)計資料采用t檢驗(yàn)，P〈0. 05為差異有統(tǒng)計 學(xué)意義。以下各化合物對細(xì)胞增殖抑制作用均用IC5?；蛞种坡时硎尽?br>[0332] 3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0333] 采用以上方法，對人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231、MCF-7、SKBR-3、BT474、 MDA-MB-468、MDA-MB-453、MDA-MB-435,大 B 細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株 LY-10、HBL-1，人胰腺癌細(xì) 胞株P(guān)anc-1、Miapaca-2,人肺癌細(xì)胞株A549、H358,人白血病細(xì)胞株THP-1，人肝癌細(xì)胞株 Η印g2,人黑色素瘤細(xì)胞株A2058等進(jìn)行了增殖抑制活性測試，結(jié)果見表4。
[0334] 表4部分受試化合物對各種細(xì)胞株的增殖抑制活性（IC5。： μ M)
[0335]
[0336] 結(jié)果表明，受試化合物3和化合物31對MV4-11、Miapaca-2、MDA-MB-231、 MDA-MB-435、A375細(xì)胞具有較強(qiáng)的抑制活性；受試化合物3和化合物31對其它腫瘤細(xì)胞株 包括CFPAC、U87、MM. 1S、HCT116、HT29、A549等也具有中等的抑制活性。
[0337] 部分受試化合物對MDA-MB-231和MDA-MB-435細(xì)胞的增殖抑制活性見表5。其中， IC5(]〈100nM 用符號 ++++ 表示，100nM〈IC5Q〈500nM 用符號 +++ 表示，500nM〈IC5Q〈1000nM 用符 號++表不，IC5Q>1000nM用符號+表不。
[0338] 表5化合物對MDA-MB-231和MDA-MB-435細(xì)胞的增殖抑制活性
[0339]
[0341] 結(jié)果表明，部分受試化合物對MDA-MB-231和MDA-MB-435細(xì)胞較強(qiáng)的增殖抑制活 性。
[0342] 實(shí)施例97化合物3和化合物31對SCID裸鼠的體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
[0343] 本實(shí)驗(yàn)的目的是檢測本發(fā)明化合物的體內(nèi)抗腫瘤效果。本實(shí)驗(yàn)使用SCID小鼠皮 下腫瘤模型，測試發(fā)明化合物3和化合物31的體內(nèi)抗腫瘤活性。所用細(xì)胞株為乳腺癌細(xì)胞 株MDA-MB-231。以正在使用的抗乳腺癌藥物紫杉醇和乳腺癌臨床在研的上市藥物達(dá)沙替尼 為陽性對照。
[0344] 1)實(shí)驗(yàn)材料：
[0345] 胎牛血清、膜酶等購自 Gibco BRL 公司（Invitrogen Corporation，USA)，DMEM 培 養(yǎng)基購自 ATCC(American Type Culture Collection)，人乳腺癌細(xì)胞株 MDA-MB-231 購于美 國ATCC公司，SCID小鼠購于中國北京華阜康生物科技股份有限公司。紫杉醇購自中國上 海瀚香生物技術(shù)有限公司。達(dá)沙替尼購自中國南京康滿林化工實(shí)業(yè)有限公司。
[0346] 2)實(shí)驗(yàn)方法：
[0347] 使用6~8周齡SCID小鼠，按照約5 X 106個/0. lmL/只MDA-MB-231細(xì)胞濃度接 種于小鼠皮下后肋部，待腫瘤長到200mm3后（約15天），小鼠分組（η = 6)并開始給藥。各 組藥物溶解于 5 % DMS0+25 % PEG-400+70 % 水。
[0348] 實(shí)驗(yàn)分組一：
[0349] 藥物溶劑對照組，每天口服灌胃空白溶劑200uL ;
[0350] 化合物3按劑量30mg/kg每天口服灌胃給藥；
[0351 ] 化合物3按劑量15mg/kg每天口服灌胃給藥.；
[0352] 化合物3按劑量7. 5mg/kg每天口服灌胃給藥；
[0353] 陽性對照紫杉醇按劑量10mg/kg每周尾靜脈注射給藥；
[0354] 實(shí)驗(yàn)分組二：
[0355] 藥物溶劑對照組，每天口服灌胃給藥空白溶劑200uL ;
[0356] 化合物31按劑量40mg/kg每天口服灌胃給藥；
[0357] 化合物31按劑量20mg/kg每天口服灌胃給藥；
[0358] 化合物31按劑量10mg/kg每天口服灌胃給藥；
[0359] 陽性對照紫杉醇按劑量10mg/kg每周尾靜脈注射給藥；
[0360] 陽性對照達(dá)沙替尼按劑量40mg/kg每天口服灌胃給藥。
[0361] 觀察指標(biāo)：每三天測量一次小鼠體重及腫瘤長徑、短徑并計算腫瘤體積 (lengthXWidth2X0. 5)。每天觀察各組小鼠有無腹瀉，抽搐，皮瘆，體重明顯降低等反應(yīng)。
[0362] 3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0363] 實(shí)驗(yàn)測得的實(shí)驗(yàn)分組一的腫瘤生長曲線見圖1，實(shí)驗(yàn)測得的實(shí)驗(yàn)分組二的腫瘤生 長曲線見圖圖2。
[0364] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，受試化合物3對乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231具有明顯的體內(nèi)生長抑 制作用，在每天30mg/kg的劑量下，可以明顯抑制腫瘤生長，并表現(xiàn)出優(yōu)于陽性對照（紫杉 醇）的抑制效果?；衔?1對乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231具有明顯的體內(nèi)生長抑制作用， 在每天20mg/kg的劑量下，可以明顯抑制腫瘤生長，并表現(xiàn)出優(yōu)于陽性對照（紫杉醇及達(dá)沙 替尼）的抑制效果。給藥過程中未發(fā)現(xiàn)小鼠出現(xiàn)體重降低、皮疹、腹瀉等不良反應(yīng)，表明在 測試劑量下，受試化合物3及化合物31在給藥劑量范圍內(nèi)毒性較低。
[0365] 實(shí)施例98化合物31的轉(zhuǎn)基因斑馬魚血管生成的抑制活性測試
[0366] 本實(shí)驗(yàn)的目的是檢測發(fā)明化合物對體內(nèi)新生血管的抑制活性，采用的方法是考察 多個濃度下本發(fā)明化合物對轉(zhuǎn)基因熒光斑馬魚FLK1-GFP體節(jié)間血管的抑制情況。受試化 合物的新生血管抑制活性用受試化合物在10ug/mL、5ug/mL、2. 5ug/mL濃度下對斑馬魚體 節(jié)間血管的抑制程度來表示。以乳腺癌臨床在研的上市藥物達(dá)沙替尼為陽性對照。
[0367] 1)實(shí)驗(yàn)材料：
[0368] 轉(zhuǎn)基因斑馬魚（FLK1-GFP):本實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖
[0369] 實(shí)驗(yàn)試劑：二甲基亞砜（DMS0);受試化合物；達(dá)沙替尼
[0370] 主要實(shí)驗(yàn)儀器：熒光顯微鏡；體視顯微鏡；C⑶相機(jī)等。
[0371] 2)實(shí)驗(yàn)方法：
[0372] 斑馬魚胚胎的獲得：實(shí)驗(yàn)室所用的斑馬魚為血管熒光轉(zhuǎn)基因斑馬魚（FLK1 :GFP)。 斑馬魚的養(yǎng)殖和培育參照Westerfield的方法。在取卵的前一天，將雌雄斑馬魚按1:1比 例配對。第二天在28°C左右的溫度和充足的光照下使其自然交配產(chǎn)卵。采集足夠的斑馬魚 胚胎，清洗后放于胚胎培養(yǎng)液中，并放入28°C培養(yǎng)箱培養(yǎng)。利用形態(tài)和發(fā)育學(xué)標(biāo)準(zhǔn)來隨時鑒 定存活情況，已死的胚胎呈白色，應(yīng)及時取出以防止水質(zhì)變壞。
[0373] 藥物處理：在斑馬魚胚胎受精后10h (顯微鏡下觀察斑馬魚胚胎發(fā)育至bud期） 后，隨機(jī)選取健康的胚胎分組，加入24孔板，每孔10個斑馬魚胚胎，吸凈培養(yǎng)液，再加入不 同濃度化合物溶液。化合物31濃度設(shè)置分別為10ug/mL、5ug/mL、2. 5ug/mL。達(dá)沙替尼濃度 設(shè)置分別為10ug/mL。同時設(shè)空白對照，不加入任何化合物。然后將其放入28°C培養(yǎng)箱培 養(yǎng)。結(jié)果觀察：在斑馬魚胚胎受精31h后，取出斑馬魚并剝卵。然后將其放于載玻片上，加入 1%。三卡因溶液麻醉魚體并用1. 5%甲基纖維素固定魚體，接著在熒光顯微鏡下對體節(jié)間血 管（Inter segmental vessel, ISV)進(jìn)行觀察計數(shù)拍照。
[0374] 3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0375] 圖3反映的是化合物31在不同濃度下對FLK1轉(zhuǎn)基因斑馬魚的血管抑制情況。結(jié) 果表明，和對照組相比，化合物31能很好地抑制斑馬魚的血管生成。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā) 明實(shí)施例中制得的化合物31對FLK1轉(zhuǎn)基因斑馬魚的新生血管很好的抑制活性，這一結(jié)果 反映了化合物31對VEGFR2具有很好的抑制活性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其結(jié)構(gòu)如式I所示：其中，Ri為-H、Ci~〇4烷基-Rz為-H、Ci~Cs烷基、Rs取代的C3~Cs環(huán)烷基、C3~Cs環(huán)氧烷基、尺3~R 7獨(dú)立地為-H、C 1~C S烷基、-OH、C 1~C S烷氧基、因素、 ^ 或咕~R11獨(dú)立地為-H、C 1~C S烷基、因素、-OH、Ri2~R 14獨(dú)立地為Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C S烷基、-OH、C 1~C S烷氧基、因素 、-CF 3、-OCF3尺2。~R 38獨(dú)立地為-H、因素 、C 1~C S烷基、C 1~C S環(huán)烷基、-OCF 3或-CF 3; Rsg~R 42獨(dú)立地為C 1~C S烷基、C 3~C S環(huán)烷基或C 1~C S居基烷基； η 二 0 ~6。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于： Ri為-Η或Rz為-H、Ci~C4烷基、Cs~Cs環(huán)氧烷基、Rs~R 7獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、-OH、C 1~C 4烷氧基、因素、 或Rs~Rii獨(dú)立地為-H、C 1~C4烷基、因素、-OH、Ri2~R 14獨(dú)立地為Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH、C 1~C 4烷氧基、因素 、-CF 3、-OCF3、尺2。~R 38獨(dú)立地為-H、因素 、C 1~C 4烷基、C 1~C 4環(huán)烷基、-0CF 3或-CF 3; Rse~R 42獨(dú)立地為C 1~C 4烷基、C 3~C S環(huán)烷基或C 1~C 4居基烷基； η = 0 ~4 ; 優(yōu)選的，Ri為-Η或I t > R2為-H、Ci~C4烷基、Rs取代的C3~Cs環(huán)烷基、C3~Cs環(huán)氧烷基、尺3~R 7獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH、C 1~C 4烷氧基、因素、 擊 或Rs~R 11獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、-OH、Ri5~R 19獨(dú)立地為-Η、c 1~C 4烷基、-OH、C 1~C 4烷氧基、因素 、-CF 3、-OCF3、R2。~R 38獨(dú)立地為-Η、因素 、c 1~C 4烷基、c 1~C 4環(huán)烷基、-OCF 3或-CF 3; Rse~R 42獨(dú)立地為C 1~C 4烷基、C 3~C S環(huán)烷基或C 1~C 4居基烷基； η = 0 ~4 ; 進(jìn)一步優(yōu)選的，Ri為-Η或R2為-H、C 1~C 4烷基、Rs取代的C 3~C S環(huán)烷基、女/\0/〔3~C S環(huán)氧烷基、尺3~R 7獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基、因素、 f 或：Rs~R 11獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OHRi2~R 14獨(dú)立地為Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基、因素 、-CF 3、-0燈尺2。~R 38獨(dú)立地為-Η、因素 、C 1~C 4烷基、c 1~C 4環(huán)烷基、-OCF 3或-CF 3; Rse~R 42獨(dú)立地為C 1~C 4烷基、C 3~C S環(huán)烷基或C 1~C 4居基烷基； η = 0 ~4 ; 更進(jìn)一步優(yōu)選的，Ri為-Η或R2為-H、C 1~C 4烷基、取代的C 3~C S環(huán)烷基、究~0/、C3~C S環(huán)氧烷基、尺3~R 7獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-OH、C廣C 4烷氧基、因素、 ^ 或Rs~R 11獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH、Ri2~R 14獨(dú)立地為Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-〇H、C 1~C 4烷氧基、因素 、-CF 3、-0CF3或尺2。~R 38獨(dú)立地為-H、因素 、C 1~C 4烷基、C 1~C 4環(huán)烷基、-0CF 3或-CF 3; η 二 0 ~2 ; 最優(yōu)的，Ri為-Η或R2為-H、c廣C 4烷基、Rs取代的C 3~C S環(huán)烷基、C3~C巧氧烷基、尺3~R 7獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-〇H、C 1~C 4烷氧基、-F 或9.. Rs~R 11獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、-OH、Ri2~R 14獨(dú)立地為Ri5~R19獨(dú)立地為-Η、c 1 ~C 4烷基、-OH、C1 ~C 4烷氧基、-F、-Cl、-CF 3、-OCFs'或Rw~R 3孤立地為-H、C廣C 4烷基或-CF 3;n = 0或1。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于：當(dāng)Re為時，其結(jié)構(gòu)如式II所示：其中，Ri為-H或R2為-H、C廣C 4烷基、咕取代的C 3~C S環(huán)烷基、或~0:/、C3~C S環(huán)氧烷基、η 二 0 ~4 ; 尺3~R 5、Rr獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、-0Η、C 1~C 4烷氧基或因素； 咕~R 11獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OHR。為Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-〇H、C 1~C 4烷氧基、因素 、-CF 3、-0CF3.或尺2。~R 38獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基或-CF 3。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于；R 1為-Η或優(yōu)選的，R2為Cl~〇4烷基、Rs取代的~C巧烷基、~C3~C巧氧烷基、η = 0~4 ;Rs~R U獨(dú)立 地為-H、Ci~C4烷基、-OH、進(jìn)一步優(yōu)選的，R2為C廣C 4烷基、R S取代的C 3~C S環(huán)烷基、1 = 0~4 ;Rs~Rn獨(dú)立 地為-H、Ci~C4烷基、-OH再進(jìn)一步優(yōu)選的，Rz為C 1~C 4烷基、R 8取代的C 3~C巧烷基、1 = 0~2;咕~1?11獨(dú)立地 為-H、Ci~C4烷基、-OH、更進(jìn)一步優(yōu)選的，R2為C 1~C 4烷基、R S取代的C 3~C S環(huán)烷基、 n = 0或1 ;Rs~Rii獨(dú)立地 '-' 、 -甘、·' 為-H、Ci~C4烷基、-OH、優(yōu)選的，Rs~R 5、Rr獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基或因素； 進(jìn)一步優(yōu)選的，Rs~R 5、Rr獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-F或-C1 ; 更進(jìn)一步優(yōu)選的，Rs~R 5、Rr獨(dú)立地為-H、甲基或-C1 ; 優(yōu)選的，Ri5~Ri9獨(dú)立地為-Η、Cl~〇4烷基、Cl~〇4烷氧基、因素、-CFs、-OCFs或進(jìn)一步優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、甲氧基、-F、-Cl、-CF 3、-OCF3或最優(yōu)的，Ri為-H或R2為C 1~C 4烷基、R S取代的C 3~C S環(huán)烷基、η = 0或1斯~R 5、咕獨(dú)立地為-H、甲基或-C1 ;R S~R η獨(dú)立地 為-Η、Cl~C 4烷基、-OH、Ri5~R 1迦立地為-H、C 1~C 4焼 基、甲氧基、-F、-C1、-CFs、-OCF3或.R2。~R 3孤立地為-H、C 1~C 4烷基或-CF 3。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于：當(dāng)Re為時，其結(jié)構(gòu)如式III所示：其中，Ri為-H或R2為-H、C 1~C 4烷基、Rs取代的C 3~C S環(huán)烷基、表、C3~C S環(huán)氧烷基、 D .η 二 0 ~4 ; 尺3~R 5、Rr獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、-0Η、C 1~C 4烷氧基或因素； Rs~R 11獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、-OH、R。為Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C廣C 4烷基、-〇H、C 1~C 4烷氧基、因素 、-CF 3、-0化或尺2。~R 38獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基或-CF 3。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于： R2為Cl~〇4烷基、Rs取代的C3~Cs環(huán)烷基、C3~Cs環(huán)氧烷基、η = 0~4 ;而、Rs獨(dú)立地為-H、C 1~C 4焼 基、-OH、進(jìn)一步優(yōu)選的，R2為C 1~C 4烷基、咕取代的C 3~C S環(huán)烷基、〔3~ Cs環(huán)氧烷基咕、1?9獨(dú)立地為-山(：1~〇4焼 基-再進(jìn)一步優(yōu)選的，Rz為C 1~C 4烷基、R 8取代的C 3~C S環(huán)烷基-〔3~C S環(huán)氧焼 基、或更進(jìn)一步優(yōu)選的，R2為C 1~C 4烷基、R班X代的C 3~C S環(huán)烷基C3~C S環(huán)氧焼 基、咕、Rs獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基優(yōu)選的，Rs~R 5、而獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH或因素； 進(jìn)一步優(yōu)選的，Rs~R 5、Rr獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH或-C1 ; 優(yōu)選的，R。為優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、C 1~C 4烷氧基、因素 、-CF 3或進(jìn)一步優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、因素 、-CF 3或更進(jìn)一步優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-CF 3或優(yōu)選的，R2。~R 38獨(dú)立地為-H或C 1~C 4烷基；最優(yōu)的，Ri為-H或,： . .R2為Cl~〇4烷基、Rs取代的C3~ t" ? Cs環(huán)烷基、文~0/〔3~C S環(huán)氧烷基、；Rs~R 5、咕獨(dú)立地為-H、C 1~ C4烷基、-OH或-C1 ;R s、R9獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、Ri5~R 1迦立地為-H、C廣C 4烷基、-CF 3或尺2。~R 3孤 立地為-H或。~〇4烷基。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于：當(dāng)Ri3為時，其結(jié)構(gòu)如式IV所示：其中，Ri為-H或R2為-H、Ci~C4烷基、Rs取代的C3~Cs環(huán)烷基、C3~Cs環(huán)氧烷基、 η 二 ο ~4 ;Rs~R 5、咕獨(dú)立地為-Η、c 1~C 4烷基、-OH、C 1~C 4烷氧基或因素； Rs~R 11獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、-OH、Ri5~R 1迦立地為-H、C 1~C 4烷基、-〇H、C 1~C 4烷氧基、因素 、-CF 3、-0CF3或8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于：R2為Cl~〇4烷基 Rs取代的C3~Cs環(huán)烷基、 C3~Cs環(huán)氧烷基、 Vη = 0~4 ;馬、R9獨(dú)立地為-H、C 1~C 4焼 ， 基、-0Η、進(jìn)一步優(yōu)選的，R2為Cl~C 4烷基、Rs取代的C3~Cs環(huán)烷基、C3~ Cs環(huán)氧烷基、枯、39獨(dú)立地為寸、(：1~〇4焼 基、-OH、再進(jìn)一步優(yōu)選的，Rz為C 1~C 4烷基、R 8取代的C 3~C S環(huán)烷基、〔3~C巧氧 烷基、Rs、R9獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、或更進(jìn)一步優(yōu)選的，Rz為C 1~C 4烷基、R 8取代的C 3~C S環(huán)烷基、〔3~C S環(huán)氧焼 基、優(yōu)選的，Rs~R 5、Rr獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH或因素； 進(jìn)一步優(yōu)選的，Rs~R 5、R7獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH或-C1 ; 優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、c 1~C 4烷氧基、因素 、-CF 3或進(jìn)一步優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、因素 、-CF 3或9更進(jìn)一步優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-CF 3或 -. i ; 最優(yōu)的，Rl為-Η或R2為Cl~〇4烷基、Rs取代的C3~Cs環(huán)烷基.C3~ Cs環(huán)氧烷基、Rs~Rs、Rr獨(dú)立地為-H、C廣〇4烷基、-OH或-C1 ; 馬、R迦立地為-H、C 1~C 4烷基、；15~R 19獨(dú)立地為-H、C廣C 4焼 基、-CFa或9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于：當(dāng)Re為才，其結(jié)構(gòu)如式V所示：其中，Rl為-H或尺2為-H、Ci~C4烷基、C3~Cs環(huán)氧烷基、η 二 0 ~4 ; 尺3~R 5、咕獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、-0Η、C 1~C 4烷氧基或因素； 咕~R 11獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基、-0Η、Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-〇H、C 1~C 4烷氧基、因素 、-CF 3、-0CF3、威尺2。~R 38獨(dú)立地為-Η、C 1~C 4烷基或-CF 3。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于；R1為-Η或優(yōu)選的，Rz為C廣C 4烷基、〔3~C巧氧烷基、,. ， η = 0 或 1 ;R9為 C 1~C 4烷基、-OH、進(jìn)一步優(yōu)選的，R2為Cl~C 4烷基、R9為Cl~C4 烷基、-OH或再進(jìn)一步優(yōu)選的，R2為C 1~C 4烷基或R9為C廣C 4烷基； 優(yōu)選的，Rs~R 5、咕獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH或因素； 進(jìn)一步優(yōu)選的，Rs~R 5、Rr獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基或因素； 更進(jìn)一步優(yōu)選的，Rs~R 5、Rr獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基或-C1 ; 優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、-OH、C 1~C 4烷氧基、因素或-CF 3; 進(jìn)一步優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-H、C 1~C 4烷基、因素或-CF 3; 更進(jìn)一步優(yōu)選的，Ri5~R 19獨(dú)立地為-H或-CF 3; 最優(yōu)的，Ri為-H ;R 2為C 1~C 4烷基或Rs~R 5、Rr獨(dú)立地為-H、C 1~C 4焼 基或-C1恥為C 1~C 4烷基；R 15~R 19獨(dú)立地為-H或-CF 3。 11. 3-己快基化哇并嚼巧衍生物，其特征在于：其結(jié)構(gòu)式為12. 權(quán)利要求1~11任一項(xiàng)所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物藥學(xué)上可接受的鹽。13. 權(quán)利要求1~11任一項(xiàng)所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物藥學(xué)上可接受的水合 物。14. 一種藥物組合物，是由1~11任一項(xiàng)所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物、權(quán)利要 求12所述的鹽或權(quán)利要求13所述的水合物添加藥學(xué)上可W接受的輔助性成分制備而成 的。15. 權(quán)利要求1~11任一項(xiàng)所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物、權(quán)利要求12所述的 鹽或權(quán)利要求13所述的水合物在制備激酶抑制劑中的用途。16. 權(quán)利要求1~11任一項(xiàng)所述的3-己快基化哇并嚼巧衍生物、權(quán)利要求12所述的 鹽或權(quán)利要求13所述的水合物在制備治療腫瘤藥物中的用途。
【文檔編號】C07D487/04GK105837575SQ201510016197
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2015年1月13日
【發(fā)明人】楊勝勇, 魏于全
【申請人】四川大學(xué)