一種克唑替尼中間體的合成方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及小分子化學(xué)藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種克唑替尼中間體的制備方法，所述的制備方法包括：(1)化合物1與化合物2經(jīng)流動(dòng)化學(xué)合成化合物3；(2)步驟(1)得到的化合物3與硼酸酯化合物4經(jīng)流動(dòng)化學(xué)合成克唑替尼中間體Ⅰ。本發(fā)明提供的克唑替尼中間體的制備方法，收率較高，可大幅降低克唑替尼制備過(guò)程中的能耗和成本，對(duì)環(huán)境友好，安全性好，自動(dòng)化程度高，適于工業(yè)化放大生產(chǎn)。反應(yīng)路線(xiàn)如下：其中，Y為離去基團(tuán)，Z為氨基保護(hù)基團(tuán)，X選自：F、Cl、Br、I。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種克唑替尼中間體的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及小分子化學(xué)藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種克唑替尼中間體的合成 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 克唑替尼（crizotinib)，化學(xué)名為3-[(lR)-1-(2,6-二氯-3-氟苯基）乙氧基]-5-[1-(4-哌啶基)-1Η-吡唑-4-基]-2-氨基吡啶(CAS:877399-52-5)，是由輝瑞公司研發(fā)的Aik 和c-Met雙重抑制劑，2011年8月26日獲得美國(guó)FDA批準(zhǔn)在美國(guó)上市，商品名為Xalkori，隨后 在韓國(guó)、日本和歐盟上市，2013年獲CFDA批準(zhǔn)在中國(guó)上市，中文商品名為賽瑞克。
[0003；
[0004] 克唑替尼是第一個(gè)對(duì)間變性淋巴瘤激酶(ALK)進(jìn)行靶向治療的藥品，用于治療通 過(guò)FDA批準(zhǔn)的檢測(cè)確認(rèn)為ALK陽(yáng)性的晚期或轉(zhuǎn)移性的非小細(xì)胞肺癌(NSCLChALK基因變異被 認(rèn)為是NSCLC等癌癥發(fā)生的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因素。ALK在非鱗狀細(xì)胞癌、無(wú)吸煙史或輕度吸煙史患 者中較為常見(jiàn)，但也在吸煙和鱗狀細(xì)胞癌組織患者中也有發(fā)現(xiàn)。
[0005] 目前已有報(bào)道的克唑替尼的合成方法有多種，如：
[0006] 以2,6-二氯-3-氟苯乙酮經(jīng)豬肝酯酶還原和Mitsunobu反應(yīng)，制得硝基化合物5,經(jīng) 鐵粉還原和NBS處理得到溴化物7，然后和硼酸酯進(jìn)行Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)得到化合物9，脫保護(hù) 后給出克唑替尼 l(de Koning P D，McAndrew D，Moore R,等.Fit-for-purpose development of the enabling route to crizotinib.Organic Process Research& Development ,2011,15(5): 1018-1026.)，其反應(yīng)路線(xiàn)如下：
[0007]
6： IS t[0008] 其中，化合物15的制備路線(xiàn)如下：
y
[0009]
[0010] 共屮，p」食觀哪酔測(cè)主乃：構(gòu)·開(kāi)卜」整錄u七扶梢·于四氫咲喃，與化 合物14反應(yīng)，將四氫呋喃加熱至20°C，將反應(yīng)得到的化合物15從乙醇水溶液中結(jié)晶得到，收 率為70-80%，反應(yīng)產(chǎn)生的三廢較多，副產(chǎn)物難控制。
[0011] 克唑替尼的合成路線(xiàn)較長(zhǎng)，各步的中間體的收率會(huì)影響整個(gè)合成過(guò)程中終產(chǎn)物克 唑替尼的收率。專(zhuān)利CN201210352349.2公開(kāi)了一種合成克唑替尼中間體的方法，以4-甲磺 酸酯哌啶-1-甲酸叔丁酯為原料與4-硝基吡唑反應(yīng)，再經(jīng)過(guò)還原，重氮化與硼酸酯反應(yīng)得到 克唑替尼中間體，其合成路線(xiàn)如下：
[0012]
[0013] 上述合成方法制備成本較低，在溫和條件下即可順利進(jìn)行，但反應(yīng)步驟較多，中間 體的收率不高。
[0014] 流動(dòng)化學(xué)技術(shù)是使反應(yīng)物以連續(xù)流動(dòng)方式在微通道內(nèi)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)的技術(shù)，作為 一種新興的合成反應(yīng)技術(shù)，其具有反應(yīng)快速、安全、溫度和壓力可控等優(yōu)點(diǎn)，由于反應(yīng)器尺 寸較小，如反應(yīng)中產(chǎn)生沉淀可能會(huì)造成整個(gè)管路的堵塞和反應(yīng)的失敗。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0015] 為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種克唑替尼中間體的制備方法，所述的制 備方法包括如下步驟：
[0016] (1)化合物1與化合物2經(jīng)流動(dòng)化學(xué)合成化合物3;
[0017] (2)步驟(1)得到的化合物3與硼酸酯化合物4經(jīng)流動(dòng)化學(xué)合成克唑替尼中間體I;
[0018] 所述制備方法的反應(yīng)路線(xiàn)如下：
[0019] 丄. u
iN- 2 ^
[0020] 其中，Y為離去基團(tuán)，優(yōu)選自：

F、I、Br或C1;進(jìn)一步優(yōu)選自：OMs、OTs、OBs、OTf;最 優(yōu)選為OMs;
[0021] Z為氨基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選自
"叔丁氧羰基，Boc)、
(節(jié)氧羰基，Cbz)
?甲氧羰基，F(xiàn)moc)
晞丙氧羰基，

H3 Alloc)、 （三甲基硅乙氧羰基，Teoc) (對(duì)甲苯磺酰 基，Ts)
(對(duì)硝基苯磺?；?，Ns)
祁硝基苯磺?；?，Nps)
(三苯甲基，Trt) 寺戊?；?，Pv)、 ：苯甲?；珺z)、 (三氟乙酰基，Tfa)、
(對(duì)甲氧基芐基，PMB)

(2，4_二甲氧基芐基，DMB) ?基，Bn);進(jìn)一步優(yōu)選自：Boc、Cbz、Alloc;最優(yōu)選 為 Boc;
[0022] X選自：？、(：1、8廣1，優(yōu)選為階或1，最優(yōu)選為階；
[0023] R!選自：H、Q-C10的烷氧基、C1-C10的硼酸酯、C4-C9的雜環(huán)基，優(yōu)選自：H、甲氧基、
乙氧基、異丙氧基 ^更優(yōu)選自：異丙 I * ，:
氧基 （2-啦啶基）；最優(yōu)選為異丙氧基； . \
[0024] R2、R3獨(dú)立地選自：Η、Q -c 10的烷基、C6-C12的芳基，或R2、R3與所連接的氧原子、硼 原子形成雜環(huán)基團(tuán)；R2、R3獨(dú)立地優(yōu)選自：H、甲基、乙基、異丙基、取代或未取代的苯基，或R 2、 R3與所連接的氧原子、硼原子形β
t-步優(yōu)選的，r2、r3同時(shí)為乙基或異丙基， 或R2、R3與所連接的氧原子、硼原子形
最優(yōu)選的，r2、r3同時(shí)為異丙基。
[0025] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述的制備方法的反應(yīng)路線(xiàn)如下：
[0026]
[0027] 優(yōu)選的，所述的步驟(1 )，其具體步驟為：
[0028] 使用溶劑1將化合物1配制為溶液1，使用溶劑2將化合物2和堿配制為溶液2,進(jìn)行 溶液1和溶液2的連續(xù)加料，發(fā)生親核取代反應(yīng)，反應(yīng)溫度為30~80°C，反應(yīng)停留時(shí)間為0.5 ~20min，連續(xù)反應(yīng)體系流出盤(pán)管后，終止反應(yīng)，分離濃縮得到化合物3。
[0029]優(yōu)選的，所述溶劑1和溶劑2獨(dú)立地選自：四氫呋喃、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、二氯甲 烷;更優(yōu)選為四氫呋喃；
[0030] 優(yōu)選的，所述堿選自：氫化納、氫氧化鈉、氫氧化鉀、叔丁醇鉀、叔丁醇鈉、甲醇鈉、 乙醇鈉，優(yōu)選自：叔丁醇鉀、叔丁醇鈉，更優(yōu)選為叔丁醇鉀；
[0031] 優(yōu)選的，化合物1的加入量為10~lOOOg;
[0032] 優(yōu)選的，所述的溶劑1的用量為l_20mL/g化合物1，更優(yōu)選為5-15mL/g化合物1，最 優(yōu)選為1 〇mL/g化合物1;
[0033]優(yōu)選的，所述的溶劑2的用量為l-30mL/g化合物1，更優(yōu)選為10-20mL/g化合物1，最 優(yōu)選為15mL/g化合物1;
[0034] 優(yōu)選的，所述堿與化合物1的摩爾比為1.0~3.0:1，更優(yōu)選為1.0~2.0:1，最優(yōu)選 為 1.5:1;
[0035] 優(yōu)選的，所述化合物2與化合物1的摩爾比為1~1.5:1，更優(yōu)選為1.2:1;
[0036] 優(yōu)選的，所述的終止反應(yīng)步驟為將反應(yīng)體系加入純化水中；
[0037]優(yōu)選的，所述的步驟(1)還包括用乙酸乙酯萃取水相；
[0038]在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，反應(yīng)器的規(guī)格為4*6mm，盤(pán)管長(zhǎng)5~8m。
[0039] 在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述的步驟(1)中，化合物1為4-甲磺酸酯哌啶-1-甲酸叔 丁酯，化合物2為4-溴吡唑，化合物3為4-[4_溴-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯。
[0040] 所述的步驟(2)為：以有機(jī)鋰化合物為催化劑，催化步驟(1)得到的化合物3與硼酸 酯化合物4經(jīng)流動(dòng)化學(xué)合成克唑替尼中間體I。
[0041] 優(yōu)選的，所述的步驟(2)，其具體步驟如下：
[0042]使用溶劑3將化合物3和化合物4配制為溶液3,使用溶劑4將有機(jī)鋰化合物配制為 溶液4，進(jìn)行溶液3和溶液4的連續(xù)加料，發(fā)生低溫鋰化反應(yīng)，反應(yīng)溫度-35~-25°C，反應(yīng)停留 時(shí)間0.5~50min，連續(xù)反應(yīng)體系流出盤(pán)管后，終止反應(yīng)，分離濃縮得到克唑替尼中間體I粗 品。
[0043]優(yōu)選的，所述溶劑3選自：四氫呋喃、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷;更優(yōu)選為四 氫呋喃；
[0044] 優(yōu)選的，所述的溶劑4選自：正己烷、環(huán)己烷、正庚烷、石油醚、苯、甲苯，更優(yōu)選為正 庚烷，
[0045] 優(yōu)選的，所述有機(jī)鋰化合物為烷基鋰，優(yōu)選自：正丁基鋰、甲基鋰、苯基鋰，更優(yōu)選 為正丁基鋰；
[0046]優(yōu)選的，化合物3的加入量為10~500g;
[0047]優(yōu)選的，所述的溶劑3的用量為l-30mL/g化合物3，更優(yōu)選為10-20mL/g化合物3，最 優(yōu)選為15mL/g化合物3;
[0048] 優(yōu)選的，所述溶液4的濃度為2.0~3.0M，更優(yōu)選為2.5M;
[0049] 優(yōu)選的，所述化合物4與化合物3的摩爾比為1.0~3.0:1，更優(yōu)選為1.0~2.0:1，更 優(yōu)選為1.5:1;
[0050] 優(yōu)選的，所述鋰化試劑與化合物3的摩爾比為1.0~3.0:1，更優(yōu)選為1.0~2.0:1， 最優(yōu)選為1.3:1;
[0051 ]優(yōu)選的，所述的終止反應(yīng)步驟為將反應(yīng)體系加入純化水中；
[0052]優(yōu)選的，所述的分離步驟為用鹽酸調(diào)節(jié)終止反應(yīng)后的體系pH為3~5,分液，用乙酸 乙酯萃取水相；
[0053]優(yōu)選的，所述的步驟(2)還包括純化步驟:將中間體I粗品用乙酸乙酯和甲基叔丁 基醚混合物溶解洗滌，得到中間體I產(chǎn)品；
[0054]優(yōu)選的，所述的混合物中乙酸乙酯和甲基叔丁基醚的體積比為1:5;
[0055]在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，反應(yīng)器的規(guī)格為4*6mm，盤(pán)管長(zhǎng)6~10m。
[0056]在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述的步驟（2)中，所述的化合物3為4-[4_溴-1H-吡唑 基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，化合物4為硼酸三異丙酯，中間體I為l-(N-Boc-4-哌啶基)吡唑-4-硼酸二異丙酯。
[0057]優(yōu)選的，所述的克唑替尼中間體的制備方法還包括步驟（3):中間體I與中間體Π 催化偶聯(lián)反應(yīng)生成中間體m;
[0058] 所述的步驟(3)的反應(yīng)路線(xiàn)如下：
[0059]
[0060]優(yōu)選的，所述的催化劑選自Ni催化劑、Pd催化劑，優(yōu)選為Ni催化劑;進(jìn)一步優(yōu)選的， 所述Ni催化劑為NiCl2、鋅粉、三環(huán)己基磷、四氫呋喃的混合物；
[0061 ] 進(jìn)一步優(yōu)選的，所述的NiCl2與中間體Π 的摩爾比為0.01~0.10 :1，更優(yōu)選為 0.02-0.08:1；
[0062] 所述的鋅粉與中間體Π 的質(zhì)量比為0 · 01~0 · 5:1，更優(yōu)選為0 · 1-0 · 3:1;
[0063] 所述的三環(huán)己基膦與中間體Π 的摩爾比為0.01~0.5:1，更優(yōu)選為0.05-0.2:1; [0064] 所述的四氫呋喃的用量為l-30mL/g中間體Π ，更優(yōu)選為10-20mL/g中間體Π 。
[0065]優(yōu)選的，所述的鋅粉的規(guī)格為100~500目，優(yōu)選為200~400目；
[0066]在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述的步驟(3)其具體過(guò)程為：
[0067]向反應(yīng)瓶中加入Ni催化劑，體系用氮?dú)庵脫Q后加熱到50~60 °C攪拌1. Oh。體系降 溫到15~25°C，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加入中間體Π 、碳酸氫鉀和中間體I，體系氮?dú)庵脫Q后升溫至65 ~85°C反應(yīng)，中間體Π 轉(zhuǎn)化完全后，反應(yīng)體系冷卻到15~25°C，抽濾，濾餅用四氫呋喃浸泡 淋洗，合并濾液、過(guò)硅膠墊后濃縮得到中間體m粗品；
[0068] 其中，碳酸氫鉀與中間體Π 的摩爾比為1.0~10:1，優(yōu)選為3~6:1;中間體I與中間 體Π 的摩爾比為1.0~3.0:1，優(yōu)選為1.0~2.0:1。
[0069] 優(yōu)選的，所述的步驟(3)還包括純化步驟；
[0070] 所述的純化步驟為將中間體m粗品用甲苯和四氫呋喃的混合物重結(jié)晶，得到中間 體m純品；
[0071] 優(yōu)選的，所述的甲苯和四氫呋喃的混合物中，甲苯和四氫呋喃的體積比為1: 3。
[0072] 在本發(fā)明的一個(gè)【具體實(shí)施方式】中，所述的克唑替尼中間體的制備方法，其反應(yīng)路 線(xiàn)為：
[0073]
[0074] 所述的中間體Π 由S-l_(2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇(化合物6)與3-羥基-2-硝基吡 啶(化合物7)反應(yīng)連接得到R-3-(l-(2,6-二氯-3-氟苯基）乙氧基)-2-硝基吡啶(化合物8)， 然后依次經(jīng)過(guò)2位的硝基還原和5位溴化得到；
[0075] 所述的S-1-(2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇由2,6_二氯-5-氟-苯乙酮(化合物5)經(jīng)酶 催化還原得到；
[0076]優(yōu)選的，所述的酶為酮還原酶，其氨基酸序列與SEQ ID N0:1、2、3或4中所示的氨 基酸序列具有至少80%的序列同一性的氨基酸序列，更優(yōu)選為至少90%的序列同一性，進(jìn) 一步優(yōu)選為至少95%序列同一性，特別地，至少96%、97%、98%、99%或100%的序列同一 性；
[0077] 更優(yōu)選的，所述的酶具有如SEQ ID N0:1、2、3或4中所示的氨基酸序列；
[0078] SEQ ID NO: 1所示氨基酸序列的酶為來(lái)自白地霉（Geotrichum candidum)的APRD (Genebank登錄號(hào)AB294179)。
[0079] SEQIDN0:2所示氨基酸序列的酶為魯氏酵母（Zygosaccharomycesrouxii)的 KRD(Genebank登錄號(hào)AF178079)。
[0080] SEQIDN0:3所示氨基酸序列的酶為核黃素德沃斯氏菌(Devosiariboflavina KNK10702)的DADH(Genebank登錄號(hào)BD450088)。
[0081] SEQ ID N0:4所示氨基酸序列的酶為嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillus stearothermophilus)的adh_ht(Genebank登錄號(hào)Z27089) 〇
[0082] 本發(fā)明所涉及到的酮還原酶還可以通過(guò)基因重組表達(dá)獲得含有酮還原酶基因的 基因工程菌來(lái)生產(chǎn)得到。用于基因重組表達(dá)的方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是熟知的。含 有酮還原酶基因的基因工程菌可以通過(guò)分批發(fā)酵法、分批補(bǔ)料發(fā)酵法或連續(xù)發(fā)酵法進(jìn)行擴(kuò) 大培養(yǎng)，并通過(guò)超聲破碎或高壓均質(zhì)破碎的方法制備細(xì)胞濃度為10%~20%的粗酶液?；?因工程菌的發(fā)酵方法和細(xì)胞破碎方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是熟知的。
[0083] 優(yōu)選的，所述的酶的用量為5~50mL/g化合物5;
[0084] 優(yōu)選的，所述的酶催化體系還包括甲酸胺和NAD+，其中甲酸胺與化合物5的摩爾比 為1.0~10.0:1，更優(yōu)選為1.0~5.0:1 ;NAD+與化合物5的摩爾比為0.01~1.0:1，更優(yōu)選為 0.01 ~0.05:1;
[0085] 優(yōu)選的，所述的酶催化還原的溫度為20~40°(：，優(yōu)選為25~35°(：，？!1為5.0-7.0，優(yōu) 選為6.0~6.5;
[0086]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述的酶催化還原過(guò)程為：
[0087]向反應(yīng)瓶中加入純化水和2，6_二氯-5-氟-苯乙酮，攪拌均勻后加入酮還原酶液、 甲酸胺、NAD+，調(diào)節(jié)pH=5.0~7.0,然后將體系升溫至20~30°C，保溫5~48h。反應(yīng)結(jié)束后將 體系升溫至65~70°C破壞酶蛋白，加入乙酸乙酯，過(guò)硅膠墊，分液，水相用乙酸乙酯反萃，合 并有機(jī)相，濃縮，得到S-1 -(2，6-二氯-3-氟苯基)乙醇(化合物6);
[0088]其中，純化水與化合物5的體積質(zhì)量比為2~10mL/g，酮還原酶液的用量為5~ 50mL/g化合物5,甲酸胺與化合物5的摩爾比為1.0-10.0:1，NAD+與化合物5的摩爾比為 0.01-10.0:1〇
[0089] 在本發(fā)明的一個(gè)【具體實(shí)施方式】中，所述的克唑替尼中間體的制備方法，其反應(yīng)路 線(xiàn)如下：
[0090]
[0091] 由本發(fā)明的中間體m經(jīng)吡唑基團(tuán)的N位脫保護(hù)生成胺基即得到克唑替尼分子
丨氨基保護(hù)基團(tuán)脫保護(hù)的方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知，本 發(fā)明對(duì)此不作限定。
[0092] 本發(fā)明的制備方法中所用的化合物1可購(gòu)自市售產(chǎn)品，也可由4-羥基哌啶經(jīng)過(guò)氨 基保護(hù)和羥基取代得到或由4-哌啶酮經(jīng)過(guò)氨基保護(hù)和酮羰基還原后取代得到，等等，本發(fā) 明對(duì)此不做限定。
[0093] 本發(fā)明提供的克唑替尼中間體的合成方法，采用了流動(dòng)化學(xué)合成技術(shù)，具有收率 較高、反應(yīng)時(shí)間短、安全性好、自動(dòng)化程度高、適于工業(yè)化放大生產(chǎn)的特點(diǎn)，有利于提高克唑 替尼生產(chǎn)的效率和降低能耗及成本;采用有機(jī)鋰化合物作為催化劑催化制備中間體I，與格 氏試劑相比，具有反應(yīng)活性更強(qiáng)、產(chǎn)率高、產(chǎn)物容易分離和還原傾向較小等特點(diǎn)，同時(shí)由于 其較高的反應(yīng)活性，間歇式反應(yīng)中一般控制溫度較低（<_50°C )，而采用流動(dòng)化學(xué)技術(shù)可提 高反應(yīng)的溫度，降低能耗的同時(shí)還可進(jìn)一步提高反應(yīng)收率。另外，本發(fā)明提供的克唑替尼中 間體的合成方法中，還包括不對(duì)稱(chēng)酶催化還原制備S-l_(2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇的步驟， 反應(yīng)條件溫和，反應(yīng)收率和產(chǎn)物光學(xué)純度都較高，有助于簡(jiǎn)化制備步驟和降低化學(xué)拆分的 成本;所述的克唑替尼中間體的合成方法中還包括Ni催化劑催化中間體I和Π 偶聯(lián)生成中 間體m的步驟，反應(yīng)收率較高。
【具體實(shí)施方式】
[0094] 在本發(fā)明中，停留時(shí)間=反應(yīng)器容積/流量。
[0095] 在本發(fā)明中，對(duì)于硼酸酯化合物中心選自C4-C9的雜環(huán)基的技術(shù)方案，除非另有說(shuō) 明，硼原子可與雜環(huán)基的任意碳原子連接形成硼酸酯化合物，如對(duì)于吡啶基，可為2-吡啶基
[0096] 下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施 例僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技 術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范 圍。
[0097]實(shí)施例1 S-l_(2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇的合成 [0098]
[0099]向反應(yīng)瓶中加入純化水(828mL)和2，6-二氯-5-氟-苯乙酮（1. Omol)，攪拌均勻后 加入酮還原酶液(9136mL)、甲酸胺(2.0111〇1)、祖0+(0.03111〇1)，調(diào)節(jié)體系?!1 = 6.2~6.4，然后 將體系升溫至27~33°C，保溫17~24h。反應(yīng)結(jié)束后將體系升溫至65~70°C破壞酶蛋白，加 入乙酸乙酯，過(guò)硅膠墊，分液，水相用乙酸乙酯反萃，合并有機(jī)相，濃縮，得到產(chǎn)品S-1-(2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇，純度為93~98%，反應(yīng)收率85~95%，對(duì)映體過(guò)量百分率（％e.e.)值 大于98%。
[0100] = = (q ,J = 7.2Hz,lH),1.48(d ,J = 7.6Hz,3H)〇
[0101 ] 實(shí)施例2 R-5-溴-3-(卜(2，6-二氯-3-氟苯基）乙氧基)-吡啶- 2-胺（中間體π )的 合成
[0102]
[UIUJ」 穸丐乂瞅力法〈5幻粑，竽鵬程，XUSE及，寺·兄至哩哲/BtfJ甘肷丄乙期·冗·屮國(guó)約 物化學(xué)雜志，2014,24(6):445-449)，使3-1-(2,6-二氯-3-氟苯基）乙醇與2-硝基-3-羥基吡 啶反應(yīng)生成R-3_( 1-(2，6-二氯-3-氣苯基）乙氧基）-2_硝基吡啶，將其硝基還原得到1?-3_ (1_(2，6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)吡啶-2-胺，然后將該芳香胺化合物進(jìn)行溴取代得到1?-5_ 溴_3_( 1_(2，6_二氯-3-氣苯基）乙氧基)-吡啶-2-胺。
[0104] 實(shí)施例3 4-(4-溴-1H-吡唑基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(化合物3)的合成
[0105]
[0106]采用規(guī)格為4*6mm的反應(yīng)器進(jìn)行400g4-甲磺酸酯哌啶-1-甲酸叔丁酯(化合物1)的 四氫呋喃溶液(4000mL)、250.8g 4-溴吡唑(化合物2)和叔丁醇鉀(240.9g的四氫呋喃溶液 (6000mL)連續(xù)加料親核取代反應(yīng)，盤(pán)管長(zhǎng)5~8m，反應(yīng)溫度為50~60°C，反應(yīng)停留時(shí)間1~ lOmin，連續(xù)投料反應(yīng)收率為80~90% ;連續(xù)反應(yīng)體系流出盤(pán)管后，直接加到純化水中終止 反應(yīng)，反應(yīng)完畢體系直接用乙酸乙酯萃取水相，濃縮得到產(chǎn)物4-(4-溴-1H-吡唑基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(化合物3 )，純度93.2 %，可直接投下一步反應(yīng)。
[0107] 4 NMR(400MHz，CDC13):S:8.37(s，lH)，8.05(s，lH)，3.89(m，lH)，3.12(br，4H)， 2.01(br,4H),1.40(s,9H)〇
[0108] 實(shí)施例4 l-(N-Boc-4-哌啶基)-1Η-吡唑-4-硼酸二異丙酯（中間體I)的合成
[0109]
[0110] 采用規(guī)格為4*6mm的反應(yīng)器進(jìn)行了 200g化合物3和硼酸異丙酯（與化合物3的摩爾 比為1.5:1)的四氫呋喃溶液(3000mL)，正丁基鋰(與化合物3的摩爾比為1.3:1)的正庚烷溶 液(2.5M)連續(xù)加料低溫鋰化反應(yīng)，盤(pán)管長(zhǎng)6~1 Om，反應(yīng)溫度-35~-25 °C，反應(yīng)停留時(shí)間1~ lOmin，連續(xù)投料反應(yīng)收率為85~95% ;連續(xù)反應(yīng)體系流出盤(pán)管后，直接加到純化水中終止 反應(yīng)，反應(yīng)完畢體系用600~lOOOg鹽酸（2M)調(diào)節(jié)體系pH為3~5,分液后水相直接用乙酸乙 酯萃取水相，合并有機(jī)相濃縮得到產(chǎn)物l-(N-B 〇c-4-哌啶基)-1Η-吡唑-4-硼酸二異丙酯（中 間體I)粗品，純度93.2%。粗品用乙酸乙酯和甲基叔丁基醚（1:5)打漿洗料一次得到中間體 I純品，純度99.1 %，收率82.9 %。
[0111] 4 NMR(400MHz，CDC13):S:8.11(s，lH)，7.59(s，lH)，3.71(m，lH)，3.17(br，4H)， 2.05(br,4H),1.38(s,9H)〇
[0112] 實(shí)施例5 3-[R-1-(2,6-二氯-3-氟苯基）乙氧基]-5-[l-(N-Boc-4-哌啶基)-1Η-吡 唑-4-基]-2-吡啶胺（中間體m)的合成
[0113]
[0114] 向1L四口反應(yīng)瓶中加入NiCl2(與中間體Π 的摩爾比為0.05:1)、鋅粉（200~400 目，與中間體Π 的質(zhì)量比為0.2:1)、三環(huán)己基膦(與中間體Π 的摩爾比為0.1:1)和四氫呋喃 (450mL)體系用氮?dú)庵脫Q5次后加熱到在50~60°C攪拌l.Oh。體系降溫到15~25°C，氮?dú)獗?護(hù)下加入中間體Π (實(shí)施例2制備）、碳酸氫鉀(與中間體Π 的摩爾比為5.0:1)和中間體1(實(shí) 施例4制備，與中間體Π 的摩爾比為1.5:1)，體系氮?dú)庵脫Q5次后升溫至65~85°C反應(yīng)，TLC 跟蹤至中間體Π 轉(zhuǎn)化完畢后，將反應(yīng)體系冷卻到15~25°C，抽濾，濾餅用四氫呋喃浸泡淋洗 兩次，合并濾液、過(guò)硅膠墊后濃縮得到3-[R-l_(2,6-二氯-3-氟苯基）乙氧基]-5-[1-(Ν-Boc-4-哌啶基)-1 Η-吡唑-4-基]-2-吡啶胺（中間體ΙΠ )粗品，純度87.3 %。將中間體ΙΠ 粗品 用甲苯/四氫呋喃（1:3)重結(jié)晶一次，得到中間體ΙΠ 純品，純度99.4 %，收率82.9 %。
[0115] ΧΗ NMR(400MHz,DMS0-d6)：5：8.11(s,lH) ,8.05-7.95(m, 3H), 7.31 (d ,J = 7.8Hz , lH),7.08(d ,J = 8.0Hz,lH),5.17(q ,J = 7.2Hz,lH),3.73(m,lH),3.15(br,4H),2.10(br, 4H)，1.68(d，J = 7.5Hz，3H)，1.39(s，9H)。
[0116] 以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精 神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種克挫替尼中間體的制備方法，包括如下步驟： (1) 化合物1與化合物2經(jīng)流動(dòng)化學(xué)合成化合物3; (2) 步驟(1)得到的化合物3與棚酸醋化合物4經(jīng)流動(dòng)化學(xué)合成克挫替尼中間體I; 所述制備方法的反應(yīng)路線(xiàn)如下： 真Y為離去基團(tuán)； Z為氨基保護(hù)基團(tuán)； X 選自：F、C1、化、I; 化選自：H、C1-C10的烷氧基、Cl-ClO的棚酸醋、C4-C9的雜環(huán)基； R2、R3獨(dú)立地選自：HXl-ClO的烷基、C6-C12的芳基，或R2、R3與所連接的氧原子、棚原子 形成雜環(huán)基團(tuán)。2. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的步驟(1)為： 使用溶劑1將化合物1配制為溶液1，使用溶劑2將化合物2和堿配制為溶液2,進(jìn)行溶液1 和溶液2的連續(xù)加料，發(fā)生親核取代反應(yīng)，反應(yīng)溫度為30~80°C，反應(yīng)停留時(shí)間為0.5~ 20min，連續(xù)反應(yīng)體系流出盤(pán)管后，終止反應(yīng)，分離濃縮得到化合物3。3. 如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述溶劑1和溶劑2獨(dú)立地選自：四氨巧 喃、甲醇、乙醇、乙酸乙醋、二氯甲燒;和/或， 所述堿選自：氨化納、氨氧化鋼、氨氧化鐘、叔下醇鐘、叔下醇鋼、甲醇鋼、乙醇鋼；和/ 或， 化合物1的加入量為10~1000 g;和/或， 所述的溶劑1的用量為l-20mL/g化合物1;和/或， 所述的溶劑2的用量為l-30mL/g化合物1;和/或， 所述堿與化合物1的摩爾比為1.0~3.0:1;和/或， 所述化合物2與化合物1的摩爾比為1~1.5:1。4. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的步驟(2)為： 使用溶劑3將化合物3和化合物4配制為溶液3,使用溶劑4將裡化試劑配制為溶液4,進(jìn) 行溶液3和溶液4的連續(xù)加料，發(fā)生反應(yīng)，反應(yīng)溫度-35~-25°C，反應(yīng)停留時(shí)間0.5~50min， 連續(xù)反應(yīng)體系流出盤(pán)管后，終止反應(yīng)，分離濃縮得到克挫替尼中間體I粗品。5. 如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述溶劑3選自：四氨巧喃、甲醇、乙醇、 乙酸乙醋、二氯甲燒;和/或， 所述的溶劑4選自：正己燒、環(huán)己燒、正庚燒、石油酸、苯、甲苯;和/或， 所述有機(jī)裡化合物為烷基裡，選自：正下基裡、甲基裡、苯基裡;和/或， 化合物3的加入量為10~500g;和/或， 所述的溶劑3的用量為l-30mL/g化合物3;和/或， 所述溶液4的濃度為2.0~3. OM;和/或， 所述化合物4與化合物3的摩爾比為1.0~3.0:1;和/或， 優(yōu)選的，所述裡化試劑與化合物3的摩爾比為1.0~3.0:1。6. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的克挫替尼中間體的制備方法還包 括步驟(3):中間體I與中間體n催化偶聯(lián)反應(yīng)生成中間體m;所述的步驟(3)的反應(yīng)路線(xiàn)如 下：O7. 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述的催化劑選自Ni催化劑、Pd催化劑。8. 如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述Ni催化劑為NiCh、鋒粉、=環(huán)己基 憐、四氨巧喃的混合物;所述的Ni催化劑中，NiCb與中間體n的摩爾比為0 . Ol~0.10 :1， 和/或，鋒粉與中間體n的質(zhì)量比為0.01~0.5:1，和/或，S環(huán)己基麟與中間體n的摩爾比 為0.01~0.5:l，和/或，四氨巧喃的用量為l~30mL/g中間體^。9. 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述的中間體n由S-1-(2,6-二氯-3-氣 苯基）乙醇與3-徑基-2-硝基[I比晚反應(yīng)連接得到R-3-( 1-(2,6-二氯-3-氣苯基）乙氧基)-2- 硝基化晚，然后依次經(jīng)過(guò)2位的硝基還原和5位漠化得到； 所述的S-1-(2,6-二氯-3-氣苯基）乙醇由2,6-二氯-5-氣-苯乙酬經(jīng)酶催化還原得到。10. 如權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于，所述的酶與SEQ ID NO:l、2、3或4中所 示的氨基酸序列具有至少80%的序列同一性的氨基酸序列;和/或， 所述的酶的用量為5~50mL/g 2，6-二氯-5-氣-苯乙酬;和/或， 所述的酶催化還包括甲酸胺和NAD+;和/或， 所述的酶催化的溫度為20~40°C，和/或， 所述的酶催化的pH為5.0-7.0。
【文檔編號(hào)】C12P7/22GK105906656SQ201610325753
【公開(kāi)日】2016年8月31日
【申請(qǐng)日】2016年5月17日
【發(fā)明人】洪浩, 詹姆斯·蓋吉, 盧江平, 李九遠(yuǎn), 申理滔
【申請(qǐng)人】凱萊英醫(yī)藥集團(tuán)（天津）股份有限公司, 凱萊英生命科學(xué)技術(shù)(天津)有限公司, 天津凱萊英制藥有限公司, 凱萊英醫(yī)藥化學(xué)（阜新）技術(shù)有限公司, 吉林凱萊英醫(yī)藥化學(xué)有限公司