一種2-芳基-1,3-二氫苯并咪唑衍生物及其合成方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種2-芳基-1，3-二氫苯并咪唑衍生物及其 合成方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 慢性腎臟病以腎功能進(jìn)行性喪失、細(xì)胞外基質(zhì)（ECM)大量聚積所導(dǎo)致的腎纖維化 為特征，主要包括腎小球硬化和小管間質(zhì)纖維化。腎間質(zhì)纖維化幾乎是所有慢性腎臟疾病 發(fā)展的最終結(jié)果，與腎功能衰竭進(jìn)展密切相關(guān)，是導(dǎo)致終末期腎衰竭的主要病因。若早期對(duì) 腎臟纖維化進(jìn)行干預(yù)治療，將有助于延緩慢性腎臟病進(jìn)展，極大減少終末期腎病的發(fā)生率 及其并發(fā)癥，減輕其所造成的社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
[0003] 研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-MTGF-β )及其介導(dǎo)的Smad信號(hào)通路在腎間質(zhì)纖維化 中起重要作用，被認(rèn)為是最關(guān)鍵、最強(qiáng)的纖維化誘導(dǎo)因子，參與腎纖維化的各個(gè)環(huán)節(jié)中。它 的過(guò)度表達(dá)能夠刺激系膜細(xì)胞、間質(zhì)成纖維細(xì)胞合成大量膠原蛋白（Collagen)、纖連蛋白 (FN)和層粘連蛋白（LN)，刺激成纖維細(xì)胞增殖并活化成肌成纖維細(xì)胞，促進(jìn)ECM的分泌與 沉積。TGF-β還能介導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化（EMT)。目前臨床上尚無(wú)有效 的抗腎臟纖維化的治療方法。拮抗TGF-β及其介導(dǎo)的信號(hào)通路，抑制ECM合成或促進(jìn)其降 解，可能為尋找治療腎臟纖維化提供一個(gè)有效的途徑。
[0004] 苯并咪唑是一類重要的芳香雜環(huán)化合物，該類化合物常見(jiàn)于一些生物活性分子 中，例如：維生素Β12就包含有一個(gè)5, 6-二甲基苯并咪唑基團(tuán)。苯并咪唑類化合物具有 多種生物活性，因此多種含有苯并咪唑骨架的化合物已經(jīng)應(yīng)用于臨床，例如雷貝拉唑和奧 美拉唑可以用于治療胃潰瘍；阿苯達(dá)唑和奧苯達(dá)唑可用于抗寄生蟲(chóng)；替米沙坦和坎地沙坦 可用于抗高血壓。該類化合物有著良好的發(fā)展前景，但是目前還未見(jiàn)有2-(2, 4-二氯苯 基）-5-硝基-1，3-二氫苯并咪唑及其合成和應(yīng)用的相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種新的2-芳基-1，3-二氫苯并咪唑衍生物即 2-(2, 4-二氯苯基）-5-硝基-1，3-二氫苯并咪唑，以及它的合成方法和應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明涉及具有下述式（I)所示結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽：
[0007]
[0008] 上述式（I)所不化合物的化學(xué)名稱為2_(2, 4_二氣苯基）-5-硝基_1，3_二氛苯 并咪唑，分子量為：310. 1。
[0009] 上述式（I)所示化合物的合成方法為：取4-硝基鄰苯二胺和2, 4-二氯苯甲醛置 于有機(jī)溶劑中，于常溫或加熱條件下反應(yīng)，所得反應(yīng)物抽濾，即得目標(biāo)物粗品。在合成時(shí)，經(jīng) 歷縮合、環(huán)化等反應(yīng)，才得到目標(biāo)物。申請(qǐng)人采用"一鍋法"完成以上過(guò)程，無(wú)需分離中間產(chǎn) 物。合成路線如下：
[0010]
[0011] 本發(fā)明所述合成方法中，所用原料4-硝基鄰苯二胺的用量通常為另一原料 2, 4-二氯苯甲醛的物質(zhì)量的1~3倍。
[0012] 本發(fā)明所述合成方法中，所述的有機(jī)溶劑可以是選自無(wú)水甲醇、無(wú)水乙醇、丙酮、 氯仿和二氯甲烷中的一種或兩種以上的組合，當(dāng)有機(jī)溶劑的選擇為上述任意兩種以上的組 合時(shí)，它們之間的配比可以為任意配比。所述有機(jī)溶劑的用量可以根據(jù)需要確定，具體可以 按IOmmol的4-硝基-鄰苯二胺加入50~80ml有機(jī)溶劑為基準(zhǔn)來(lái)計(jì)算。
[0013] 本發(fā)明所述合成方法中，4-硝基鄰苯二胺和2, 4-二氯苯甲醛在有機(jī)溶劑中的反 應(yīng)可以在常溫或加熱條件下進(jìn)行，優(yōu)選是在加熱條件下進(jìn)行，進(jìn)一步優(yōu)選在40°C至有機(jī)溶 劑的回流溫度下進(jìn)行。反應(yīng)是否完全可以可采用TLC跟蹤檢測(cè)。反應(yīng)的方式優(yōu)選采用回流 反應(yīng)，當(dāng)采用回流反應(yīng)時(shí)，反應(yīng)更優(yōu)選在有機(jī)溶劑的回流溫度下進(jìn)行，在上述限定條件下反 應(yīng)至完全大約需要6~12h的時(shí)間。反應(yīng)完成后，所得反應(yīng)物冷卻后抽濾，收集濾餅即為目 標(biāo)物粗品。
[0014] 上述合成方法制得的是式（I)化合物的粗品，可采用現(xiàn)有常規(guī)的純化方法對(duì)其進(jìn) 行純化以提高式（I)化合物的純度。通常采用硅膠柱層析或重結(jié)晶的方式來(lái)進(jìn)行純化。當(dāng) 采用硅膠柱層析的方式進(jìn)行純化時(shí)，用由體積比為100 :1〇~40的石油醚和二氯甲烷組成 的洗脫劑進(jìn)行洗脫，洗脫液蒸除溶劑，得到純化后的目標(biāo)物。當(dāng)采用重結(jié)晶的方式進(jìn)行純化 時(shí)，用由體積比為100 :1〇~30的無(wú)水甲醇和二氯甲烷組成的溶劑進(jìn)行重結(jié)晶。
[0015] 本發(fā)明還包括上述式（I)所述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗腎纖維化 藥物和/或抗慢性腎病藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明還包括以上述式（I)所述化合物作為活性成分制備的抗腎纖維化藥物和/ 或抗慢性腎病藥物。
[0017] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種2-芳基-1，3-二氫苯并咪唑衍生物即 2- (2, 4-二氯苯基）-5-硝基-1，3-二氫苯并咪唑及其合成方法和應(yīng)用。申請(qǐng)人對(duì)本發(fā)明所 述化合物的抗腎纖維化、抗慢性腎病活性研究表明，該化合物體外抗腎纖維化活性顯著，具 有較好的潛在藥用價(jià)值，有望用于各種抗腎纖維化、抗慢性腎病藥物的制備。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例1制得的最終產(chǎn)物的核磁共振氫譜圖；
[0019] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例1制得的最終產(chǎn)物的核磁共振碳譜圖；
[0020] 圖3為本發(fā)明實(shí)施例1制得的最終產(chǎn)物的蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0021] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳述，以更好地理解本發(fā)明的內(nèi)容，但 本發(fā)明并不限于以下實(shí)施例。
[0022] 實(shí)施例1
[0023] 1)將 I. 53g (IOmmol)的 4-硝基鄰苯二胺，I. 75g (IOmmol)的 2, 4-二氯苯甲 醛，50ml無(wú)水甲醇加入150ml圓底燒瓶，加熱至回流溫度回流反應(yīng)8h。待反應(yīng)結(jié)束，靜置冷 卻至室溫，抽濾得到橙色粗產(chǎn)物。
[0024] 2)粗產(chǎn)物以石油醚：二氯甲烷=100:20(體積比）組成的溶劑作為洗脫劑，硅膠 柱層析，得到橙色固體產(chǎn)物（2. 85g，產(chǎn)率92% )。
[0025] 對(duì)所得橙色固體產(chǎn)物進(jìn)行核磁表征，其核磁共振氫譜和碳譜分別如圖1和2所示。
[0026] 1H (500MHz，DMS0-d6) δ 8.96 (s，1H)，8.45 (d，J = 8.5Hz，1H)，8.00 (d，J = 2. 5Hz, 1H), 7. 95 (dd, J = 9. 0, 2. 5Hz, 1H), 7. 77 (d, J = 2. 0Hz, 1H), 7. 57 (dd, J = 8. 5, I. 7Hz ,1H), 6. 85 (s, 2H), 6. 79 (d, J = 9. 0Hz, 1H). 13C NMR(126MHz, DMS〇-d6) δ 153. 99, 151. 04, 13 6. 68, 135. 80, 135. 72, 133. 25, 131. 63, 130. 58, 129. 34, 127. 70, 124. 79, 113. 23, 112. 98.
[0027] 因此，可確定上述澄色固體廣物為：2-(2, 4_二氣苯基）_5_硝基-I, 3_二氛苯并 咪唑，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下式（I)所示：
[0028]
[0029] 實(shí)施例2
[0030] 1)將1.538(10臟〇1)的4-硝基鄰苯二胺，0.888(5臟〇1)的2,4-二氯苯甲醛，501111 無(wú)水乙醇加入150ml圓底燒瓶，加熱至回流溫度回流反應(yīng)8h。待反應(yīng)結(jié)束，靜置冷卻至室 溫，抽濾得到橙色粗產(chǎn)物。
[0031] 2)粗產(chǎn)物以石油醚：二氯甲烷=100:15(體積比）組成的溶劑作為洗脫劑，柱層 析，得到橙色固體產(chǎn)物（I. 36g，產(chǎn)率88% )。
[0032] 所得橙色固體產(chǎn)物經(jīng)過(guò)核磁表征，確定為本發(fā)明所述的2- (2, 4-二氯苯基）-5-硝 基-1，3-二氫苯并咪唑。
[0033] 實(shí)施例3
[0034] 1)將 I. 53g (IOmmol)的 4-硝基鄰苯二胺，I. 75g (IOmmol)的 2, 4-二氯苯甲 醛，25ml甲無(wú)水醇和25ml無(wú)水乙醇加入150ml圓底燒瓶，加熱至回流溫度回流反應(yīng)6h。待 反應(yīng)結(jié)束，靜置冷卻至室溫，抽濾得到橙色粗產(chǎn)物。
[0035] 2)粗產(chǎn)物以體積比石油醚：二氯甲烷=100:15 (體積比）組成的溶劑作為洗脫 劑，柱層析，得到橙色固體產(chǎn)物（2. 48g，產(chǎn)率80% )。
[0036] 所得橙色固體產(chǎn)物經(jīng)過(guò)核磁表征，確定為本發(fā)明所述的2- (2, 4-二氯苯基）-5-硝 基-1，3-二氫苯并咪唑。
[0037] 實(shí)施例4
[0038] 1)將1.538(10臟〇1)的4-硝基鄰苯二胺，0.888(5臟〇1)的2,4-二氯苯甲醛，501111 二氯甲烷和IOml氯仿加入150ml圓底燒瓶，加熱至回流溫度回流反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束，靜 置冷卻至室溫，抽濾得到橙色粗產(chǎn)物。
[0039] 2)粗產(chǎn)物以無(wú)水甲醇：二氯甲烷=100:10(體積比）組成的溶劑重結(jié)晶，得到橙 色固體產(chǎn)物（0. 93g，產(chǎn)率60% )。
[0040] 所得橙色固體產(chǎn)物經(jīng)過(guò)核磁表征，確定為本發(fā)明所述的2- (2, 4-二氯苯基）-5-硝 基-1，3-二氫苯并咪唑。
[0041] 實(shí)施例5
[0042] 1)將1.538(10臟〇1)的4-硝基鄰苯二胺，0.888(5臟〇1)的2,4-二氯苯甲醛，601111 丙酮加入150ml圓底燒瓶，加熱至回流溫度回流反應(yīng)10h。待反應(yīng)結(jié)束，靜置冷卻至室溫，抽 濾得到橙色粗產(chǎn)物。
[0043] 2)粗產(chǎn)物以無(wú)水甲醇：二氯甲烷=100:20(體積比）組成的溶劑重結(jié)晶，得到橙 色固體產(chǎn)物（I. 〇3g，產(chǎn)率66% )。
[0044] 所得橙色固體產(chǎn)物經(jīng)過(guò)核磁表征，確定為本發(fā)明所述的2- (2, 4-二氯苯基）-5-硝 基-1，3-二氫苯并咪唑。
[0045] 申請(qǐng)人對(duì)本發(fā)明所述的2_(2, 4-二氯苯基）-5_硝基-1，3-二氫苯并咪唑進(jìn)行了 抗腎纖維化實(shí)驗(yàn)，具體如下：
[0046] -、2-(2, 4-