本發(fā)明屬于生化檢測領(lǐng)域，具體是涉及一種核酸分子、病原微生物、血液細(xì)胞或免疫分子的分離、檢測裝置。

背景技術(shù)：

在生物樣品中目標(biāo)物檢測過程中，多涉及被檢測目標(biāo)物與非分析物之間的分離及其他處理過程，使目標(biāo)物獨(dú)立、完整的顯現(xiàn)，并展示其狀況。因此這些被檢測目標(biāo)物與非分析物之間的分離及其他處理過程在檢測過程中顯得非常重要，盡最大可能消除非分析物對目標(biāo)物檢測的干擾。能否徹底分離，能否充分保留目標(biāo)物，還有操作上是否便捷，直接關(guān)系到方法的可靠性和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

poct，即時(shí)檢驗(yàn)(point-of-caretesting)，是在采樣現(xiàn)場即刻進(jìn)行分析，省去標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)時(shí)的復(fù)雜處理程序，快速得到檢驗(yàn)結(jié)果的一類新方法?，F(xiàn)有的poct檢測技術(shù)主要包括以膠體金和熒光物質(zhì)為標(biāo)記物的硝酸纖維素膜(nc膜)固相側(cè)向免疫層析技術(shù)和以醋酸纖維素膜為固相、膠體金為標(biāo)記物的斑點(diǎn)免疫滲濾技術(shù)。

固相側(cè)向免疫層析技術(shù)通常通過玻璃纖維阻攔及抗紅細(xì)胞抗體的聯(lián)合使用，用于全血樣品檢測，簡便是其突出的特點(diǎn)，然而由于nc膜、玻璃纖維膜、底板與膠材料變異大、固相工藝不能分離已固相與未固相，以及檢測過程無洗滌等缺陷，產(chǎn)品質(zhì)量可控性差，使得此類產(chǎn)品靈敏度低，不精密度高，重復(fù)性差，定量準(zhǔn)確性不足；只能用于對高危人群的初篩，不能用作疾病診斷的常規(guī)工具。

斑點(diǎn)免疫滲濾技術(shù)是在醋酸纖維素膜上特定位置點(diǎn)樣固定有特定抗體(抗原)，將此固相膜與其下的吸水材料纖維固定在一塑料盒中。檢測時(shí)，先點(diǎn)上樣品，反應(yīng)一定時(shí)間后，再滴入膠體金標(biāo)記物，形成固相-樣品待測定物-膠體金復(fù)合物，呈現(xiàn)有色反應(yīng)物，從而實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)物的定性檢測，未反應(yīng)的成分通過醋酸纖維素間隙在吸水材料的毛細(xì)管力作用下吸至吸水材料中。此方法分析能力與側(cè)向免疫層析分析相當(dāng)。其固相過程是粗放型被動(dòng)吸附作用，固相的量不確定，未被吸附的固相成分在后續(xù)檢測時(shí)會(huì)帶走待測物，影響檢測靈敏度，膜只能結(jié)合固相成分而不能作為膠體金標(biāo)記物吸附載體而形成一體結(jié)構(gòu)。由于膜致密透光性差，發(fā)光分析時(shí)會(huì)阻礙光線傳播，吸光分析難于比色，只能用掃描或目測法進(jìn)行定性或半定量檢測。由于未反應(yīng)物是有限分離的，效率不高，亦不徹底，故靈敏度低，不能濾過分離紅細(xì)胞等成分，因而不能用于測定全血。

因此，研究適合poct檢測的樣品中的顆粒物分離與檢測互不影響的方法十分必要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在提供一種多重膜濾過反應(yīng)裝置，該裝置易于自動(dòng)化操作，使得含有顆粒物的樣品中的目標(biāo)物在反應(yīng)檢測過程中，顆粒與分子態(tài)目標(biāo)物互不影響，用于即時(shí)檢測或其他分離需要，并滿足高靈敏度、高準(zhǔn)確性和重復(fù)性等要求，以克服現(xiàn)有即時(shí)檢測方法對全血等含顆粒成分樣品檢測之不足。

具體方案如下：

本發(fā)明提供的一種多重膜濾過反應(yīng)裝置，包括外管、內(nèi)管、標(biāo)記物膜和固相膜，所述內(nèi)管套接在外管內(nèi)并與該外管定位，所述標(biāo)記物膜固定安裝在內(nèi)管的底部，所述外管的下部設(shè)有氣液導(dǎo)出通道，所述固相膜固定安裝在外管上并且介于標(biāo)記物膜和氣液導(dǎo)出通道之間，所述標(biāo)記物膜上具有用于過濾的第一孔隙，并且標(biāo)記物膜上還具有標(biāo)記物，所述固相膜上具有用于過濾的的第二孔隙，所述固相膜上還具有與目標(biāo)物對應(yīng)的配體分子。

優(yōu)選的，所述外管包括上外管和下外管，所述下外管包括位于下外管上部的第一腔壁、位于中部的固相膜區(qū)以及位于下部的氣液導(dǎo)出通道，所述上外管包括位于第二腔壁和第三腔壁，所述第三腔壁的外壁的上部貼合在第二腔壁的內(nèi)壁的下部上，所述第二腔壁的底面與第一腔壁的頂面相抵，所述第三腔壁的外壁與第一腔壁的內(nèi)壁緊密貼合。

優(yōu)選的，所述固相膜區(qū)上設(shè)有用于承載固相膜的網(wǎng)格狀的第一支架，所述第三腔壁的底部延伸至固相膜區(qū)內(nèi)與該第一支架的頂面相抵，以將位于第一支架上的固相膜壓在該第一支架上。

優(yōu)選的，所述上外管和下外管分別一體注塑成型。

優(yōu)選的，所述內(nèi)管包括上內(nèi)管和下內(nèi)管，所述下內(nèi)管包括第四腔壁以及位于第四腔壁底部的標(biāo)記物膜區(qū)，所述上內(nèi)管包括壓蓋和第五腔壁，所述第五腔壁的外壁緊貼在第四腔壁的內(nèi)壁上，所述壓蓋的一端與第五腔壁相連接，另第一端延伸至外管的頂部，并且壓蓋的底面與外管的頂面相抵，使得內(nèi)管和外管之間形成氣密結(jié)構(gòu)。

優(yōu)選的，所述標(biāo)記物膜區(qū)內(nèi)設(shè)有網(wǎng)格狀的第二支架，所述第五腔壁的底部延伸至標(biāo)記物膜區(qū)內(nèi)與該第二支架的頂面相抵，以將位于第二支架上的標(biāo)記物膜壓在該第二支架上。

優(yōu)選的，所述上內(nèi)管和下內(nèi)管分別一體注塑成型。

優(yōu)選的，所述標(biāo)記物膜上的標(biāo)記物以包埋的方式固定在標(biāo)記物膜上。

優(yōu)選的，所述固相膜上的配體分子以分子力固相結(jié)合在固相膜的第二孔隙內(nèi)。

本發(fā)明提供的多重膜濾過反應(yīng)裝置與現(xiàn)有技術(shù)相比較具有以下有益效果：

1、本發(fā)明提供的多重膜濾過反應(yīng)裝置的內(nèi)管和外管之間通過純物理結(jié)構(gòu)組合，避免了其他化學(xué)成分對反應(yīng)物的干擾，增加檢測的精度。而內(nèi)管和外管都采用梯形一體化上下壓蓋式疊加結(jié)構(gòu)，增加了內(nèi)管和外管之間的氣密性，保證氣壓驅(qū)動(dòng)下的濾過過程順利進(jìn)行，使檢測反應(yīng)能夠順利實(shí)現(xiàn)。

2、本發(fā)明提供的多重膜濾過反應(yīng)裝置的標(biāo)記物膜以及固相膜的支架都為網(wǎng)格狀支架，以形成點(diǎn)狀壓膜結(jié)構(gòu)，最大限度減少了在分離、反應(yīng)和檢測過程中膜的死空間，最大限度使膜上成份發(fā)揮其功能。

附圖說明

圖1示出了多重膜濾過反應(yīng)裝置的立體圖。

圖2示出了多重膜濾過反應(yīng)裝置的剖面示意圖。

圖3示出了外管的剖面示意圖。

圖4示出了內(nèi)管的剖面示意圖。

具體實(shí)施方式

為進(jìn)一步說明各實(shí)施例，本發(fā)明提供有附圖。這些附圖為本發(fā)明揭露內(nèi)容的一部分，其主要用以說明實(shí)施例，并可配合說明書的相關(guān)描述來解釋實(shí)施例的運(yùn)作原理。配合參考這些內(nèi)容，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)能理解其他可能的實(shí)施方式以及本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。圖中的組件并未按比例繪制，而類似的組件符號通常用來表示類似的組件。

現(xiàn)結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對本發(fā)明進(jìn)一步說明。

如圖1和圖2所示，本發(fā)明提供的一種多重膜濾過反應(yīng)裝置，包括外管10、內(nèi)管20、標(biāo)記物膜30和固相膜40，所述內(nèi)管20套接在外管10內(nèi)并與該外管10定位，所述標(biāo)記物膜30固定安裝在內(nèi)管20的底部，所述外管10的下部設(shè)有氣液導(dǎo)出通道12，所述固相膜40固定安裝在外管10上并且介于標(biāo)記物膜30和氣液導(dǎo)出通道12之間，所述標(biāo)記物膜30上具有用于過濾的第一孔隙(圖中未示出)，并且標(biāo)記物膜上還具有標(biāo)記物(圖中未示出)，所述固相膜上具有用于過濾的的第二孔隙(圖中未示出)，所述固相膜上還具有與目標(biāo)物對應(yīng)的配體分子(圖中未示出)。其中標(biāo)記物膜由微孔材料制成，標(biāo)記物以噴涂、填埋等方式固定在標(biāo)記物膜上，被測液經(jīng)過標(biāo)記物膜時(shí)，標(biāo)記物膜上的標(biāo)記物與被測液中的目標(biāo)物結(jié)合進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)和標(biāo)記，并且被標(biāo)記物標(biāo)記過的目標(biāo)物能夠穿過標(biāo)記物膜30上的第一孔隙流到固相膜上；固相膜同也由微孔材料制成，配體分子以噴涂、分子力固相結(jié)合等方式固定在固相膜上，當(dāng)被標(biāo)記物標(biāo)記過的目標(biāo)物經(jīng)過固相膜時(shí)，固相膜上的配體分子與待測物反應(yīng)形成固相-目標(biāo)物分子-標(biāo)記物反應(yīng)鏈，反應(yīng)夠產(chǎn)生的固相-目標(biāo)物分子-標(biāo)記物反應(yīng)鏈留著固相膜上，而未反應(yīng)的廢液則通過第二孔隙從氣液導(dǎo)出通道中排出，完成濾過反應(yīng)。

參考圖2和圖3，作為外管的優(yōu)選方案，所述外管10包括上外管100和下外管110，所述下外管包括位于下外管上部的第一腔壁112、位于中部的固相膜區(qū)114以及位于下部的氣液導(dǎo)出通道12，所述上外管包括位于第二腔壁102和第三腔壁104，所述第三腔壁104的外壁的上部貼合在第二腔壁102的內(nèi)壁的下部上，所述第二腔壁102的底面與第一腔壁112的頂面相抵，所述第三腔壁104的外壁與第一腔壁112的內(nèi)壁緊密貼合，優(yōu)選的，所述固相膜區(qū)114上設(shè)有用于承載固相膜的網(wǎng)格狀的第一支架116，所述第三腔壁104的底部延伸至固相膜區(qū)114內(nèi)與該第一支架116的頂面相抵，以將位于第一支架上的固相膜壓在該第一支架116上。其中上外管的第二腔壁102和下外管的第一腔壁112緊密貼合，增加了上外管和下外管之間的氣密性，而第三腔壁104的底面和第一支架116的頂面相抵以點(diǎn)壓的方式將固相膜壓在該第一支架116上，上外管和下外管之間通過純物理的疊加方式來實(shí)現(xiàn)外管的氣密性，可以減少其他化學(xué)成分(例如粘結(jié)劑)對反應(yīng)物的干擾，增加檢測的精度。作為一個(gè)更優(yōu)的方案，所述上外管和下外管分別一體注塑成型。

參考圖2和圖4，作為內(nèi)管的優(yōu)選方案，所述內(nèi)管20包括上內(nèi)管200和下內(nèi)管210，所述下內(nèi)管210包括第四腔壁212以及位于第四腔壁底部的標(biāo)記物膜區(qū)214，所述上內(nèi)管包括壓蓋202和第五腔壁204，所述第五腔壁204的外壁緊貼在第四腔壁212的內(nèi)壁上，所述壓蓋202的一端與第五腔壁204相連接，另第一端延伸至外管10的頂部，并且壓蓋202的底面與外管10的頂面相抵，使得內(nèi)管20和外管10之間形成氣密結(jié)構(gòu)。優(yōu)選的，所述標(biāo)記物膜區(qū)214內(nèi)設(shè)有網(wǎng)格狀的第二支架216，所述第五腔壁204的底部延伸至標(biāo)記物膜區(qū)內(nèi)與該第二支架的頂面相抵，以將位于第二支架上的標(biāo)記物膜30壓在該第二支架上。其中下內(nèi)管的第四腔壁212和上內(nèi)管的第五腔壁204緊密貼合，增加了上內(nèi)管和下內(nèi)管之間的氣密性，而第五腔壁204的底面和第二支架216的頂面相抵以點(diǎn)壓的方式將標(biāo)記物膜固定在該第二支架216上，上內(nèi)管和下內(nèi)管之間通過純物理的疊加方式來實(shí)現(xiàn)外管的氣密性，可以減少其他化學(xué)成分(例如粘結(jié)劑)對反應(yīng)物的干擾，增加檢測的精度。作為一個(gè)更優(yōu)的方案，所述上內(nèi)管和下內(nèi)管分別一體注塑成型。

其中，所述標(biāo)記物膜優(yōu)選由可調(diào)節(jié)孔徑的惰性支撐材料制成，標(biāo)記物以包埋的方式固定到標(biāo)記膜上，以干燥的狀態(tài)固定到標(biāo)記物膜區(qū)內(nèi),作為載體和濾過的功能。

所述的固相膜載體為一可調(diào)節(jié)孔徑與厚度的功能性膜型結(jié)構(gòu),所述固相膜上的配體分子以分子力固相結(jié)合在固相膜的第二孔隙內(nèi)，以干燥狀態(tài)固定至固相膜區(qū)內(nèi)，作為反應(yīng)器和濾過非目標(biāo)物成分的功能。

本發(fā)明提供的多重膜濾過反應(yīng)裝置可采用自動(dòng)控制正壓或負(fù)壓來加速反應(yīng)進(jìn)行的可能方式，以增加裝置內(nèi)反應(yīng)物流動(dòng)性，使反應(yīng)物充分接觸和完成反應(yīng)，從而保證反應(yīng)過程的可控性和檢測準(zhǔn)確性。以下以負(fù)壓為例進(jìn)行說明，參考圖1-圖4，所述的內(nèi)管組合結(jié)構(gòu)套入外管組合結(jié)構(gòu)，壓實(shí)內(nèi)管上部的壓蓋，使內(nèi)管和外管緊密契合，形成氣密腔壁，構(gòu)成集成試劑管。

檢測時(shí)，將樣品加至集成試劑管內(nèi)管內(nèi)，標(biāo)記物膜內(nèi)的標(biāo)記物水相溶解，與樣品中的待測物在標(biāo)記物膜內(nèi)結(jié)合反應(yīng),完成目標(biāo)物的標(biāo)記。多重膜濾過反應(yīng)裝置的下部置于負(fù)壓腔內(nèi)，啟動(dòng)真空泵，標(biāo)記物膜上的樣品及反應(yīng)物在負(fù)壓作用下下行穿過標(biāo)記物膜進(jìn)入固相膜上面區(qū)域，與固相膜上固相物進(jìn)一步反應(yīng)形成固相-目標(biāo)物分子-標(biāo)記物反應(yīng)鏈。充分反應(yīng)后，新的樣品液在一定負(fù)壓力量作用下不斷穿過標(biāo)記物膜下行，新的反應(yīng)不斷形成，使樣品液完全參與反應(yīng)，形成固相-目標(biāo)物分子-標(biāo)記物反應(yīng)鏈，進(jìn)一步施加負(fù)壓，未反應(yīng)物穿過固相膜下行通過氣液導(dǎo)出通道從反應(yīng)裝置排出，完成濾過反應(yīng)。而正壓則將多重膜濾過反應(yīng)裝置的上部與氣泵相連，濾過反應(yīng)在正壓的情況下完成，其過程與負(fù)壓相同，在此不再贅述。

本發(fā)明提供的多重膜濾過反應(yīng)裝置內(nèi)可完成進(jìn)樣、免疫反應(yīng)、洗滌、發(fā)光反應(yīng)與測定發(fā)光/熒光等檢測過程，省去了添加試劑標(biāo)記物、固相物的過程，大大縮短檢測時(shí)間，并有高靈敏度和良好的精密性和重復(fù)性。

盡管結(jié)合優(yōu)選實(shí)施方案具體展示和介紹了本發(fā)明，但所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明白，在不脫離所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，在形式上和細(xì)節(jié)上可以對本發(fā)明做出各種變化，均為本發(fā)明的保護(hù)范圍。